ELL Studio предлагает купить подписчиков ВКонтакте в группу на выгодных условиях. ВКонтакте – одна из популярных и посещаемых социальных сетей в Рунете, главный конкурент Facebook и Twitter по количеству участников и активности юзеров. ВКонтакте предлагает множество инструментов для социального взаимодействия: возможность добавления в друзья, ранжирование друзей по категориям (коллеги, родственники, лучшие друзь ВКонтакте).

Накрутить подписчиков в группу ВК с помощью сервиса ELL Studio

ВКонтакте является также одной из основных социальных сетей в SMM-технологиях, т. е. продвижении брендов и товаров в массмедиа. Наличие большого количества онлайн-подписчиков ВКонтакте, выразивших одобрение, оставивших комментарии и поделившихся информацией о товаре/услуге позволяет повысить лояльность целевой аудитории. Чтобы добиться этого, используются различные инструменты, включая накрутку ВКонтакте. Сделать это можно как «вживую», привлекая пользователей броскими заголовками, изображениями и материальным поощрением, так и с помощью различных программных методов, в т. ч. купить подписчиков ВК. ELL Studio предлагает вам прекрасную возможность добиться высоких показателей и повысить количество вступивших в вашу группу/паблик купив необходимую Вам услугу.

Воспользуйтесь выгодной возможностью купить подписчиков в группу ВК
Здесь вы сможете купить подписчиков в группу ВКонтакте дешево, заказав любое количество офферных пользователей в режиме онлайн. Офферы – это настоящие пользователи, имеющие собственный активный аккаунт в социальной сети. За вознаграждение они выполняют требуемые действия, которые в сумме позволяют повысить рейтинг вашей группы. Заказывайте прямо сейчас, и вы сможете купить накрутку ВКонтакте быстро – от нескольких часов до нескольких суток в зависимости от необходимого количества офферов. Заказ подписчиков в группу ВК – это распространенная практика в SMM.

Существует множество ресурсов, где можно заказать их для выполнения определенных действий:

• вступить в группу;
• подписаться на обновление страницы;
• добавиться в друзья;
• поставить лайк;
• оставить комментарий;
• поделиться записью в своей ленте.

Следующая категория услуг на ELL Studio – это покупка накрутки подписчиков ВК онлайн по критериям. Здесь вы сможете заказать нужное число активных пользователей, вступивших или подписавшихся на ваш паблик, соответствующих определенным критериям. Если вы продвигаете косметику для женщин, то вы можете заказать офферов среди женских аккаунтов определенного возраста. Если раскручиваете сайт по продаже автоинструмента, то офферные подписчики на вашу группу покупаются среди мужчин.

Купить подписчиков ВКонтакте вы сможете также по регионам, с использованием функции геотаргетинга, т. е. выбрать пользователей, проживающих в определенном регионе и городе. Эта возможность позволит вам значительно повысить конверсию вашего сайта, а также пригласить реальных покупателей в ваш оффлайновый магазин. Данной функцией часто пользуются заказчики, предлагающие свои услуги в определенном регионе/городе: фотографы, стилисты, парикмахеры, мастера маникюра и т. п. В этом случае накрутка в ВК это 80 % эффективности всей рекламной кампании.

Купить подписчиков в ВК на ELL Studio вы сможете очень легко. На сайте вы найдете несколько виджетов, по которым можно перейти для быстрого заказа в режиме онлайн. Выберите подходящую услугу и введите ваши данные для обработки задания. Через короткое время вы увидите значительно возросшую активность в своей группе. Почему именно у нас нужно заказывать накрутку лайков и подписчиков в ВК? Конечно, вы можете воспользоваться и автоматическими инструментами для накрутки, которые предлагают роботизированные аккаунты, имитирующие реальные действия живых пользователей. Но это может иметь негативные последствия и сыграть с вами злую шутку, т. к. администрация соцсети имеет право заблоЧелябинскать вашу группу за такие действия.Другие сайты для накрутки в ВК также предлагают возможность купить живых офферов, но не все они способны гарантировать предсказуемость и стабильность поведения пользователей.

Накрутка ботов ВК бесплатно и вовсе за копеечки — 0,23р

На сайте представлена рабочая инструкция о накрутке ботов Вконтакте бесплатно, а так же недорогие сервисы с эконом услугами на ботов ВК

Дешёвая накрутка ботов в группу ВК – опись сайтов и цен на них

Боты ВК — это не заблокированные странички, это фейковые профили, созданные специально для увеличения активности страниц. Боты — это самый бюджетный вариант на рынке услуг, а потому и более актуальный. Давайте рассмотрим сайты, с наиболее дешевыми ценами на накрутку ботов в группу ВК:

1. https://doctorsmm.com — сервис с чётким дизайном и активной техподдержкой, предлагает один из самых удобных вариантов того, как добавить бота в ВК за деньги. Подписчики боты в группу ВК стоят 290 – 300 р за 1000 шт, смотря на категорию.
2. https://prtut.ru — это сервис, на котором можно накрутить ботов в ВК недорого. Набрать на нём стандартных ботов в группу можно по 300 р за 1000 ед. Консультанты работают с 9 до 24, вопросы решаются быстро, в порядке живой очереди.
3. Avi1 — относительно молодая, но уже опытная фирма, дающая возможность заказать не просто ботов 1000 шт за 207 р, но и 1000 ботов с активных аккаунтов за 269 р.
4. Zakazweb — это интернет-магазин услуг с пёстрым, рябящим в глазах дизайном, предлагающий мгновенную накрутку ботов ВК, 1000 шт за 200 р, за дополнительную плату можно выбрать пол и возраст ботов.
5. Prof­it-smm — ещё один сайт, с неудачным дизайном, но с приятными ценами, помогающий продвигать социальные сети. Подписчики в группу – скорей всего боты, потому что дёшево и с отписками, кое-где будет присутствовать информация о принадлежности страницы к странам СНГ — 179 р за 1000 шт.
6. Vasv­top — дизайн хороший, а вот боты оставляют желать лучшего, сайт честно заявляет об их некачественности: у многих пустые страницы, нет записей и даже аватарки отсутствуют, цена 200 р за 1000 ботов в группу. Подписчики боты — не отписываются, но могут быть забанены.
7. Like­ma­nia – продолжает развиваться и сайт Win­like — кусочек их сети, где просто подписки неизвестного качества стоят 1000 шт— 1890 р, а в онлайн-чате название гласит – открытая линия Like­ma­nia, пишешь, в ответ – тишина. На настоящем сайте Like­ma­nia на 1000 подписчиков ботов придётся оставить 350 р.
8. Простоспец — нет вкладки боты, есть вступившие в группы – эконом, 1000 таких аккаунтов выйдут на 451,26 р. Можно добавить им страну или город, возраст и пол за дополнительную плату.
9. Fast­pro­mo — своеобразный сайт с непонятной альтернативой. Есть 2 вида стандартных подписчиков-ботов в группу, везде низкое качество, средняя скорость, разница лишь в цене — 711,55 р за 1000 шт или 920,20 р за столько же.
10. Prices­mm — это не коммерческий сервис, однако, для получения большей информации на тему покупки ботов, стоит заглянуть в этот блог.

Лучшая техника накрутки ботов в ВК группу бесплатно

Боты накручиваются для видимости и дальнейшего привлечения настоящих пользователей сети. Это недорогой материал, который в разы может увеличить заинтересованность мимо проходящих. Вот несколько простых советов, которые помогут выйти на новый уровень:

1. Ещё разок подумайте о теме своего бизнеса, просмотрите аккаунты конкурентов, что они предлагают в своих группах, решите, как Вы будете двигаться дальше: создадите группу или начнёте распространять услугу со своего профиля.
2. Заполните страницу, подберите соответствующую фотографию на аватарку. Если Вы продвигаете услугу или товар, то аватар должен быть связан с бизнесом, если это Ваша личная страница, то она должна говорить о Вас. Помните, что пользователи ВК, не добавленные в друзья, в первую очередь увидят Вашу авку и имя, затем всё остальное.
3. Расшарьте страницу, если желаете большего увеличения показателей рейтинга. Если Вы откроете страницу для всех пользователей, то они смогут увидеть информацию с Вашей страницы, а Вы сможете получить больше друзей. Профиль можно открыть и для сторонних от ВК людей, и при вводе в поисковике имени страницы выйдет информация о Вас.
4. Определитесь с контентом, выкладывайте посты как можно чаще, главное, чтобы количество не повлияло на качество.
5. Добавьте друзей, подписчиков, а также создайте активность на странице с помощью товарищей, близких, а также групп взаимного добавления показателей популярности. Не забывайте следить за лимитами и ограничениями в ВК при различных вариантах увеличения аудитории.

   Только после этого стоит делать накрутку ботами. Так, как сделать ботов в ВК бесплатно, 50 или даже 500+? Вам могут помочь такие лайфхаки, как:

• С помощью софтов, которые могут увеличить друзей в основном ботами. Однако, есть вероятность добавления собачек, от которых придётся избавляться вручную, либо устанавливать доп. проги для их удаления. Нельзя использовать несколько программ одновременно. Бесплатных софтов почти нет, но есть демо-версии платных, где чуть меньше функций, но смысл тот же, как пример — VK10000Friends. Недостаток любой программы, в том, что все действия Вы производите с Вашей страницы, и админы легко могут обнаружить непонятную активность по IP.
• Бесплатным методом продвижения ВК и других соцсетей являются биржи, Вы получите на них офферов, но они могут быть не активными, да и выглядеть как боты. Там придётся оставлять свои данные и также, как и в 1 случае, есть опасность быть забаненными.

Самой безвредной для страницы является накрутка на платных сервисах.

Сколько стоят боты ВК на рынке СММ услуг — сравнение

Сколько стоит бот ВК на сервисах? Цена за 1 бота в настоящий момент представлена с очень большим разбегом от 10 копеек до 2 р. Нет смысла платить тысячи за ботов, когда можно за такие деньги приобрести живых, поэтому дорогие фирмы рассматривать бессмысленно. Боты обычно представлены в низком и в стандартном качестве, либо просто указаны, как подписчики—эконом. Интересным вариантом покажутся боты с активными аккаунтами (см выше). Очень важна скорость поступления ботов на страницу. Если она будет очень быстрой, их сразу заблокируют админы. Стремитесь к более спокойному плавному продвижению. Не делайте накрутку без предварительного увеличения аудитории вручную.

От чего зависит цена на ботов:

• От количества и качества (с аватарками или без).
• От оптовиков — цена закупки.
• От рекламы сайта, где фирма себе брала рекламу и почём.
• От численности штата (зарплату сотрудникам тоже надо с чего-то выдавать).
• От процента, который фирма оставит себе на дальнейшее развитие.

  Но это совсем не означает, что если компания большая, то и денег с покупателей сдерёт побольше. Сейчас большая конкуренция в smm сфере, каждый стремится быть лучше и в профессиональном плане, и в стоимости, компании предоставляют акции и скидки.

Как сделать ботов в ВК с нуля до 100К одним лишь кликом

С нуля никаких накруток в социальных сетях делать не рекомендуется. Они сразу будут обнаружены администрацией и заблокированы. Мало того, даже при очень аккуратном взаимодействии с ботами списания неизбежны, но Вы можете предотвратить массовую блокировку подписок.

Варианты того, как добавить бота в группу ВК наиболее быстрым образом представлены тут:

• Можно воспользоваться платной накруткой ботов ВК с помощью программы. Кликов явно придётся сделать больше одного, но по скорости выйдет оперативнее, чем скажем на бирже. Для этого Вам придётся ознакомиться со всеми нюансами выбранной программы. Почитать о том, как её настроить правильно либо разобраться самостоятельно, без наличия мануала. При установке параметров набора соблюдайте ограничения ВК. А также заранее позаботиться о защите своего компьютера от вирусов и потенциально нежелательного ПО.
• Либо заказать ботов у профи на недорогом сервисе. В фирме, которая уже ни один год занимается этим, знает и соблюдает лимиты сети, даёт гарантии конфиденциальности, где Вам не придётся ни о чём задумываться. Найдите подходящий сайт, сообщите техподдрежке информацию о возрасте вашей страницы, задайте вопросы, выберете способ оплаты, совершите её, и ждите поступления ботов.

Добавить ботов в ВК без задержек и больших списаний

Наиболее безопасно получить ботов можно, привлекая коммерческие сервисы. Накрутка там происходит более естественно, поступления плавные и за ними следят профессионалы. Естественно при заказе на сайте минимум проблем и списаний.

Чтобы меньше переживать о списаниях, лучше придерживаться такой линии поведения в накрутке ботов, как:

1. В начале заполняете профиль, добавляете наиболее правдоподобный вариант картинки или фото на аватар. Создаёте уникальный контент, ежедневно публикуете материалы.
2. Далее, увеличиваете показатель друзей и подписчиков самостоятельно, следя за ограничениями.
3. Затем разбираетесь как добавить бота ВКонтакте безопасно на сайте, при этом:

• следите за желанием накрутить как можно больше, около 50 ботов в день вполне достаточно, далее, потихоньку можно довести этот показатель до 500 подписок в день, но лучше меньше;
• ежедневно подчищайте собачек, сделать это можно либо самому, либо спец приложениями.;
• оставляйте ссылки с рекламой о странице на сторонних сервисах, и привлекайте настоящих пользователей для смешанных поступлений, но ни в коем случае не заказывайте накрутку в нескольких местах;
• устраивайте конкурсы на странице для большей активности живой публики, просите знакомых оставить Вам комменты и сердечки.

Как накрутить ботов ВК на страницу и в группу — Активных

Представьте себе ситуацию, когда боты не просто подписались к Вам на страницу, а начали продвигать её, смотреть посты, ставить сердца, а может и оставлять комменты. Как приобрести активных или запрограммированных на активность ботов?

Сейчас существует три варианта получения активных ботов на страницу или в группу:

• Накрутка ботов ВК программой с различной стоимостью. В этом случае придётся разбираться с особенностями программы. Придётся искать скрипты для бота в интернете или создавать самому. Для работы в программах требуется логин и пароль Вашей страницы ВК, поэтому главная опасность — взломы.
• Купить автоматизированных ботов у частных лиц в интернете. Никто не спорит с тем, что профессиональные разработчики смогут создать Вам ботов не просто стандартных, а под заказ, с теми функциями, которые Вам необходимы. Цены на каждый пункт будут особыми и автоматизация за эксклюзив может достигнуть 50000 р, а ещё можно попасть на мошенников.
• То ли дело отечественные сервисы, предлагающие ботов по низким ценам. Да, сейчас на некоторых сайтах появилась возможность купить ботов с активными аккаунтами. Прайс не сильно отличается от обычного. Плюсы и в том, что на сайтах заключается договор, даются гарантии, а также предложены варианты скорости поступления ботов.

Быстрые боты ВК – цена от 23 коп за малоактивного подписчика

Самая распространенная причина покупки ботов в социальных сетях — получение дохода. Заработать можно несколькими путями:

1. Рекламируя чужой товар или услугу на своей странице, получать деньги за просмотры её или же за переход по ссылке с Вашего профиля в группу компании, а может за покупку товара, всё зависит от пожелания фирмы. Обычно доход около 5%, но для именитых блогеров он гораздо больше.
2. Открыть своё дело в соцсетях. Благоприятно соединить страницы всех социальных сетей. Создать интернет-магазин в ВК сейчас не составляет труда. Тут можно продвигать как свои товары, так и товары партнёров.
3. Можно заняться раскруткой групп для их последующей продажи.

Чтобы фирмы обратили на Вас внимание, для этого надо получить на профиль порядка 1000 — 2000 подписчиков. Если изначально у акка есть хотя бы 100 пользователей ВК, добавив ботов, можно быстрее начать зарабатывать. Глядя на активность на Вашей странице, и количество подписок на Ваш профиль увеличится, и процесс пойдёт быстрее.

Получить ботов размеренно для безопасности, но быстрее, чем другими вариантами можно на smm сервисах. Можно ли найти бота за 23 копейки? При покупке ботов ВК цены на сайтах могут отличаться, но приятно обнаружить на сайтах не только за 23, но и за 20 копеек.

Накрутка ботов ВК – программы с доказанной эффективностью

С изобретением роботов наступил переломный момент в мире, и вот, прогресс добрался до социальных сетей. Необходимость в накрутке «живыми» будет становится всё меньше, ровно в той прогрессии, с какой будет проявляться автоматизация. Приобретать их пачками скоро будет ни к чему, появятся активные боты что в программах, что на сервисах.

Большинство программ, выполняющих накрутку ботов в ВК группу бесплатно, занимаются подписками, сердцами и репостами, часто это демо-версии платных софтов, надо понимать, что они урезаны и самый лучший софт – платный.

Эффективность активных, автоматизированных ботов максимальна и уже сейчас мы можем наблюдать такие функции как:

• писать друзьям, загружать фото, вступать в сообщества, постить на чужие страницы — Botovod, Viking Botovod,
• автоматически обновлять статус — VkBot,
• написание более оригинальных текстов, благодаря поддержки синонимов — Бробот.

Эти программы поддерживают работу с прокси сервером, что позволяет одному компьютеру выполнять запросы к другим от своего имени.

Несмотря на повышение функционала, с программами надо разбираться, а ещё их безопасность всё ещё далека от совершенства. Если у Вас мало времени или нет желания этим заниматься, всегда можно обратиться к профи – smm сервисы сделают всю работу за Вас.

А вы знали, что у нас есть Instagram и Telegram?

Подписывайтесь, если вы ценитель красивых фото и интересных историй!

Накрутка

Если вам приходилось заниматься накруткой, то наверняка вы слышали термин «Оффер». Сейчас я расскажу вам, что он означает, и научу вас покупать и накручивать офферов для группы или страницы Вконтакте.

Читать полную версию →

В процессе раскрутки группы (см. как раскрутить группу вконтакте), владельцу приходится применять много способов повышения активности аудитории (см. как повысить активность в группе вконтакте).

Один из самых эффективных методов — это проведение всевозможных конкурсов. А если еще и призы добавите, то просто замечательно. Ваши подписчики обязательно захотят принять участие. Как итог — рост аудитории, ее активность.

Давайте вместе подумаем, какие идеи для такого мероприятия, были бы особенно актуальные.

Читать полную версию →

Если вы являетесь владельцем группы Вконтакте, то количество подписчиков не является вашей конечной целью. Наиболее важна активность аудитории. Нет смысла в большом числе людей, которые не принимают участия в жизни сообщества. Если нет обсуждений, лайков, а в случае с бизнес сообществом — продаж, то пользы от такого сообщества нет.

Один из важных моментов, который не стоит упускать из вида — это раскрутка. Вы должны привлекать в свою группу живую аудиторию, которая заинтересована в предлагаемом вами контенте. Нет особого смысла накручивать ботов. Эффекта не будет. И можете схлопотать блокировку. Нам нужна именно живая аудитория.

Но что делать дальше? Допустим, мы привлекли десять, сто, несколько тысяч человек. Как теперь вовлечь их в активную жизнь сообщества? Об этом читайте ниже.

Читать полную версию →

Мы с вами уже разбирали, что такое спам вконтакте. Если вы будете рассылать его со своей страницы, то во-первых, ее скорее всего заблокируют (см. как заблокировать страницу в контакте), а во вторых, больших успехов вы не добьетесь (см. что делать если заморозили страницу в вк).

Другое дело, если использовать специальный софт. Сейчас я покажу вам программу для спама Вконтакте.

Читать полную версию →

Мы с вами уже разбирали, как накручивать основные показатели:

Теперь я хочу показать вам, как накручивать голоса в опросах вконтакте. Разобраны будут несколько способов.

Читать полную версию →

В данной инструкции я покажу вам программу для накрутки друзей в вк. Дам ссылку на ее скачивание, и покажу подробный алгоритм работы.

Читать полную версию →

В данной инструкции я покажу вам два способа, которые позволят накрутить лайки и подписчиков вконтакте. Они бесплатные. Хотя при необходимости, вы можете заплатить за накрутку деньги — так процесс пойдет быстрее.

Речь будет идти про популярный сервис и программу. Обо всем ниже.

Читать полную версию →

Мы с вами уже говорили про накрутку лайков вконтакте, и увеличение количества подписчиков (см. как накрутить группу в контакте).

Теперь давайте поговорим про комментарии. Сейчас я покажу вам, как накрутить комментарии вконтакте. Будут рассмотрены основные способы, которые вы сможете использовать онлайн.

Читать полную версию →

Если у вас есть своя группа вконтакте, то вы должны знать и применять методы, которые позволят увеличить вашу аудиторию. Весь пустое сообщество никому не нужно.

Я уже показывал вам, как раскрутить группу вконтакте самому. Давайте продолжим разбирать эту тему, и познакомимся с другими, не менее эффективными способами.

Итак, как раскрутить группу вконтакте бесплатно, и не только.

Читать полную версию →

Продолжаем тему накрутки. Для увеличения популярности нашей страницы, мы уже научились накручивать лайки (см. как накрутить лайки вконтакте) и репосты (см. как накрутить репосты вконтакте).

Очень популярно иметь большое количество непрочитанных сообщений. Это значит, что много пользователей хотят с вами связаться. Как накрутить сообщения вконтакте? Очень просто. Сейчас я покажу вам рабочие методы.

Читать полную версию →

Если у вас есть группа или сообщество вконтакте, то вы наверняка заинтересованы в том, чтобы количество ее участников росло.

Чтобы это происходило, вы должны соблюдать ряд условий. Публиковать интересные материалы, взаимодействовать со своей аудиторией и т.д. Давайте поговорим про это подробнее.

Итак, как набрать людей или участников в группу вконтакте?

Читать полную версию →

Считается, что чем больше у вас друзей и подписчиков вконтакте, тем более популярна ваша страница (см. как сделать свою страницу вконтакте популярной). Иметь в социальной сети несколько тысяч друзей (см. как набрать 10000 друзей вконтакте), естественным путем удается только людям, которые имеют определенную популярность в реальной жизни, или в мировой паутине. Певцы, блогеры, политики и т.д. На их страницах всегда можно увидеть большое количество подписчиков.

А как быть простым пользователям? Что нужно сделать, чтобы накрутить много подписчиков вконтакте?

На самом деле, особой сложности здесь нет. И способов довольно много. Сейчас я покажу вам основные.

Читать полную версию →

Мы с вами уже знаем, что такое репост вконтакте. И как правило, их тоже любят накручивать.

Мы с вами уже научились, как накручивать лайки вконтакте. С репостами процесс не сильно отличается. Сейчас я дам вам пошаговую инструкцию.

Читать полную версию →

На очереди у нас еще один сервис, с помощью которого мы получим сердечки на свои материалы Вконтакте. Я покажу вам, как правильно зарегистрироваться, что нужно сделать, чтобы получить баллы, и как потратить их на создание нового задания.

Итак, накрутка лайков в сервисе турболайкер.

Читать полную версию →

Продолжаем знакомиться с сервисами, с помощью которых можно проводить накрутку вконтакте. Сейчас я покажу вам сайт Vliker.ru, и научу вас им пользоваться.

Итак, накрутка лайков онлайн в лайкере.

Читать полную версию →

Продолжаем накручивать лайки вконтакте, и подписчиков на нашу страницу. Сейчас я покажу вам еще один сервис, который поможет это сделать. Называется он Olike.

Сейчас мы разберем, как зарегистрироваться, и что нужно сделать в личном кабинете, чтобы получить желаемые сердечки, и новых гостей на своей странице.

Итак, накрутка лайков и подписчиков с сервисом Olike.

Читать полную версию →

Продолжаем тему накрутки лайков и подписчиков. Сейчас я покажу вам сервис likest. С его помощью мы сможем получить сердечки на наши материалы (см. где в вк посмотреть свои лайки), а также увеличить количество ваших подписчиков (см. накрутка подписчиков в группу).

Читать полную версию →

Популярность материалов в социальной сети вконтакте, принято оценивать по количеству лайков, которые оставили пользователи. Это своеобразный метод показать то, что фотография, видео запись или пост на стене, понравился.

Некоторые люди хотят накручивать лайки. Сейчас я покажу вам программу для накручивания лайков вконтакте. С ее помощью вы без труда наберете большое количество сердечек.

Читать полную версию →

Все покупки вконтакте совершаются благодаря использованию внутренней валюты — голосов.

Первым делом, вы должны получить их на свой счет. Все основные способы, позволяющие это сделать, вы найдете в этой инструкции. Теперь можно тратить их, на приобретение товаров или услуг.
Читать полную версию →

Продолжаем говорить про заработок и накрутку голосов. В инструкции как заработать голоса вконтакте, я уже рассказывал про сервис роболайкер.

Сейчас мы подробнее познакомимся с ним, пройдем процедуру регистрации, и научимся им пользоваться. Мы будем использовать роболайкер для получения голосов в вк.

Читать полную версию →

Если вы решили приобрести голоса, чтобы потратить их на покупку подарков (см. как отправить подарок вконтакте), стикеров (см. все стикеры вк бесплатно установить) и прочих плюшек, то нужно знать, сколько стоит 1 голос вконтакте.

Сейчас я расскажу вам об этом, и покажу, где находится форма для покупки голосов (см. как передать голоса вконтакте).
Читать полную версию →

Друзья мои. Данную инструкцию я публикую с той целью, чтобы предостеречь вас от использования подозрительных программ.

Перед написанием этой статьи, я попробовал скачать в сети популярный чит на голоса в вк. И сейчас я расскажу вам, к чему привело его использование.
Читать полную версию →

Голоса — это внутренняя валюта, используемая в социальной сети вконтакте. Она позволяет приобретать различные бонусы, тратить на приложения, подарки (см. как отправить подарок в вк бесплатно) и тд.

В данном уроке мы поговорим о том, что такое голоса и как их можно получить или заработать. Рассмотрим, как платные, так и бесплатные методы.
Читать полную версию →

Если у вас есть свое сообщество, то наверняка вы задавались вопросом, как накрутить подписчиков в группу в вк? Ведь получение целевой аудитории — основная задача.

Для этой цели можно использовать несколько методов. Сейчас я расскажу вам о них.
Читать полную версию →

Как вы уже знаете, в рамках социальной сети вконтакте, можно вступать в дружбу с другими пользователями. Эти люди будут отображаться у вас в одноименном списке, и вы получите некоторые функции, которые доступны только для друзей. Они в свою очередь тоже.
Читать полную версию →

Популярность ваших фотографий, добавленных на страницу профиля Вконтакте, оценивается по количеству положительных комментариев (см. для чего нужны комментарии в вк), репостов (см. как сделать репост в вк) и лайков. Как правило, пользователи чаще всего ставят именно сердечки — тем самым выказывая свой интерес и одобрение вашей фотки. Многие даже ставят себе цель, получить как можно больше сердечек для своей аватарки.
Читать полную версию →

Если вы хотите, чтобы пользователи вашего сайта имели возможность высказать свое мнение или начать обсуждение, необходимо, чтобы для них была доступна функция комментирования. Разработчики Вконтакте сделали специальную форму комментариев, которую вы можете вставить на свой сайт или блог. Если пользователь что-то напишет, то это сообщение автоматически продублируется на его странице — что приведет к небольшому увеличению интереса к вашему проекту. Смотрите также — виджет группы вк.

Читать полную версию →

Голоса являются внутренней валютой социальной сети Вконтакте. С их помощью вы можете покупать всевозможные штуки — открытки, подарки (см. как бесплатно отправить подарок в вк) и тд. Основной способ их получения — покупка за реальные деньги (см. как пополнить счет в контакте). Но нас это не особо устраивает. Давайте посмотрим, как накрутить голоса в ВК бесплатно.
Читать полную версию →

Накрутка Instagram | Раскрутка YouTube

ВАЖНО! Обратите внимание, что данный метод не является наиболее точным анализатором накрутки, т.к. при правильном продвижении все графики будут выглядеть вполне естественно.

Вы можете добавить на анализ любой публичный профиль инстаграм, что позволит следить за динамикой его прогресса. Инструмент анализа позволяет ежедневно сохранять в базу данных следующие показатели:
— количество подписчиков на профиле;
— среднее количество лайков на последних публикациях;
— количество публикаций на анализируемом профиле;
— рейтинг профиля по результатам анализа десятков показателей;
— процент активной аудитории;
— количество исходящих подписок.

Сводный анализ перечисленных показателей, выведенный на графики, дает возможность определить ряд важнейших деталей, например, по резким скачкам количества подписчиков или лайков можно отследить факт накрутки или моменты, когда инстаграм срезает подозрительную активность.

При наличии достаточного количества статистических данных о профиле, можно с высокой степенью вероятности спрогнозировать его развитие, а наша система автоматически сгенерирует рекомендации по улучшению показателей.

Данный инструмент будет полезен рекламодателям, желающим проверить потенциальных партнеров. Остерегайтесь сотрудничества с обладателями аккаунтов инстаграм с резкими перепадами количества подписчиков на графике, т.к. в большинстве случаев они свидетельствует о наличии ботов или нецелевой аудитории.

Наибольшее доверие рекламодателей, как правило, вызывают профили с плавно растущими показателями.

Вы можете добавить на анализ любое суммарное количество профилей инстаграм, но не более одного за раз. Обратите внимание, что к собранной статистике будут иметь доступ все пользователи нашей системы.
Правила использования сервиса: заказывая данную услугу, вы соглашаетесь с правилами нашей системы. См. правила использования сервиса.

Дополнительная информация об анализе профилей в инстаграм: ССЫЛКА

Как накрутить подписчиков для группы в Вконтакте: 3 лучших способа

Накрутка подписчиков в группу в ВК необходима, чтобы повысить посещаемость и вывести сообщество в ТОП. Количество последователей влияет на популярность среди похожих по тематике.

Накрутить подписчиков в Вконтакте

Стандартное продвижение сообщества, даже с интересной темой, может занять от месяца до нескольких лет. Зависит от количества контента, как подписывались пользователи в течение первого времени, были ли репосты. Если в группе низкая активность – повысить посещаемость сложно, если не использовать накрутку участников или платные способы продвижения.

Варианты, как сделать сообщество активным:

• пригласить блогеров. Сотрудничество с популярными персонами повысит интерес к группе;
• платная таргетированная реклама. Найти целевую аудиторию и поставить несколько записей на продвижение;
• накрутка. Получить подписчиков с помощью создания заказа в одном из сервисов;
• сотрудничество с другими сообществами.

Вариант с блогерами также требует оплаты. Зависит от тематики сообщества: система бартеров или оплата самого заказа. Например, если группа направлена на продажу товаров, то возможен формат с бартером: блогеру отправляют товар на тестирование после чего – тот делает обзор и рекламирует группу среди своей аудитории.

Gainstorm — лидер по цене/качество

Накрука подписчиков в сообщество ВК доступна через сервис GainStorm. В его функции входит платный способ продвижения и с помощью обмена заказами. Если владелец группы не хочет пополнять счет – нужно выполнить несколько заданий, получить баллы. После – настроить продвижение по тому объему монет, который есть на счету.

Как сделать накрутку подписчиков в ВК платно:

1. Зайти на сайт и создать аккаунт – перейти в раздел: «Магазин».
2. Выбрать нужное количество монет – пополнить счет.
3. Подождать, пока средства появятся.

Следующий шаг – создать заявку на продвижение. При выборе параметров, пользователь может указать максимальную скорость на привлечение подписчиков.

Как быстро накрутить активных подписчиков:

1. Нажать сверху: «Начать продвижение» — выбрать пункт: «Подписчики».
2. Задать нужное количество и скорость – запустить.

При выполнении задачи пользователю будут приходить уведомления. Отследить результат можно и через сообщество, регулярно просматривая список подписчиков.

Накрутить с помощью Morelikes

Накрутка людей в группу в ВК доступна через сервис Morelikes. В отличие от GrainStorm, здесь нет бесплатного получения монет. Но пользователь может выбрать один из вариантов тарифов: с максимальной скорость, с привлечение подписчиков, накруткой лайков и комментариев одновременно.

Каждый тариф выделен отдельно, поэтому можно выбирать один из представленных или оформить заявку сразу на несколько. Как работать с сервисом:

1. Зайти в сервис – создать аккаунт или авторизоваться через социальные сети.
2. Подтвердить адрес электронной почты.
3. Перейти в раздел: «Услуги» — указать в списке социальную сеть: «Вконтакте».
4. Указать тариф и тип аудитории.
5. Добавить в корзину и оплатить заявку.

Владелец сообщества может корректировать количество подписчиков, которые должны появиться. В зависимости от выбранного тарифа, скорость накрутки может отличаться.

С помощью кнопки: «Детали» можно узнать подробную информацию о форме продвижения: лимиты для заказа, требования к аккаунту или сообществу, можно ли заказать повторно.

Заказать накрутку в Hypelike

Накрутка живых подписчиков через Hypelike – это еще один способ, как получить живую аудиторию. Пользователь добавляет необходимый объем, указывает тариф и следит за ходом выполнения задачи. Как и в предыдущем сервисе, здесь нет заработка монет. Поэтому получить подписчиков возможно только через пополнение счета.

Как сделать накрутку через HypeLike:

1. Зайти на сайт – выбрать: «Регистрация».
2. Ввести активный адрес электронной почты.
3. Перейти в боковом меню во вкладку: «Вконтакте» — указать услугу.
4. Выбрать один из тарифов – отредактировать количество подписчиков.
5. Добавить в корзину – пополнить баланс.
6. Запустить продвижение.

В сервисе есть несколько вариантов накрутки участников: живая аудитория и боты. Вторые необходимы, чтобы увеличить количество посетителей страницы и создать эффект активности.

Отдельно есть раздел с «Эмуляцией активности», которая поможет в продвижении сообщества и появлении его в ТОПе.

Получить подписчиков в группу ВК

Другие варианты, как накрутить подписчиков в ВК – создать таргетированную рекламу или привлечь блогеров. Первый вариант подходит, если владелец группы «знаком» со своей аудиторией: их предпочтения, наиболее удобные способы просмотра контента, тип устройства и прочие.

Преимущества платной рекламы в ВК:

• разрешена социальной сетью. Пользователю не нужно соблюдать лимиты и следить за страницей, чтобы отследить наличие предупреждений или блокировок;
• результативность, если правильно выставить параметры.

При оформлении объявления для Вконтакте, нужно учесть требования к размеру фотографии или видео, определить сроки проведения и максимальную цену за одного подписчика.

Сотрудничество с блогерами или другими сообществами будет эффективным, если выбраны площадки с активной аудиторией. Также влияет и тематика: если темы различаются, то в группу будет привлечено минимальное число потенциальных клиентов.

Таргетированная реклама: как запустить

Бесплатная накрутка людей в группу в ВК таким способом невозможна. Но владелец сообщества сможет провести тонкую настройку по предполагаемым подписчикам.

Как запустить:

1. Зайти в ВК – перейти в свое сообщество.
2. Нажать под аватаркой: «Создать объявление» — выбрать места размещения.
3. Указать сроки проведения – подобрать тип публикации.
4. Вписать основные интересы аудитории, геолокацию и возраст.
5. Указать цену за подписчика – запустить.

После того, как владелец сообщества создаст рекламу – она отправится на рассмотрение к модерации. Проверка может занять более суток, а если была допущена ошибка – запись будет возвращена.

Сотрудничество с блогерами

С помощью сервисов, как EpicStars, владелец сообщества сможет найти блогера для продвижения. При выборе обращают внимание на похожие темы, количество аудитории и активность самого блогера. Важны и отзывы, которые были после выполнения других рекламных предложений.

Искать блогера, чтобы накрутить подписчиков в ВК:

1. Зайти в EpicStars – создать аккаунт.
2. Перейти к поиску: указать в фильтрах «Вконтакте».
3. Написать в личных сообщениях или отправить уведомление в самом ВК.
4. Договориться о цене и сроках проведения.

Обычно, рекламодатель самостоятельно предлагает формат публикации для рекламы. Это может быть короткое видео или целая запись для Ленты.

Сотрудничество с другими сообществами – также подходящий вариант, чтобы привлечь аудиторию. Для этого, нужно составить рекламу и предложить группе. Возможен вариант с репостом, когда другое сообщество просто прорекламирует, поделившись публикацией в своей ленте.

Повышение бифункциональной электрокаталитической активности в углеродных нанолистах с со-легированием S и N для высокоэффективных Zn-воздушных батарей

Zn – воздушные аккумуляторы — перспективные устройства для электрохимического накопления и преобразования энергии. Для практического применения срочно необходимы бифункциональные кислородные электрокатализаторы с низкой стоимостью. В данном случае безметалловые пористые углеродные нанолисты (SNC), легированные S и N, были получены путем простой двухэтапной термической обработки. Благодаря синергическому эффекту серы и азота была достигнута превосходная бифункциональная электрокаталитическая активность в отношении реакций восстановления и выделения кислорода, намного лучше, чем у однокомпонентных углеродных нанолистов.Расчеты также подтверждают, что введение S в углеродные нанолисты, легированные азотом, может эффективно повысить их каталитическую активность OER и даже общие каталитические характеристики. Кроме того, Zn-воздушные батареи, изготовленные с помощью SNC, показали высокую плотность мощности и отличную перезаряжаемость, превзойдя по характеристикам большинство известных безметалловых и даже металлических электрокатализаторов, и полностью продемонстрировали хорошие перспективы для практического применения.

У вас есть доступ к этой статье

Оценка активности экстракта водных семян Hunteria umbellata по повышению мужской фертильности у крыс Wistar

Предпосылки. В этом исследовании на крысах Wistar изучали активность экстракта водных семян Hunteria umbellata ( HU ) по повышению фертильности самцов в дозе 100, 200 и 400 мг / кг / день в течение 60 дней. При этом было изучено влияние повторных доз HU на характер набора веса, гонадосоматический индекс (GSI), сывороточный фолликулостимулирующий гормон (FSH), лютеинизирующий гормон (LH), тестостерон (TS), пролактин (PRL), и эстрадиол (ES), а также антиоксидантный статус яичек обработанных крыс как способ выяснения механизма (ов) действия HU . Метод. Тридцать шесть (36) самцов крыс линии Wistar были случайным образом разделены на шесть групп (I-VI) по шесть крыс в группе. Крысам группы I вводили через зонд 10 мл / кг / день дистиллированной воды, и они служили необработанным контролем; Крысам группы II вводили через зонд кломифен в дистиллированной воде в дозе 0,3 мг / кг / день; Крысы групп III-V получали 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день HU , соответственно, а крысы группы VI получали 20 мг / кг / день витамина C в целом. дистиллированная вода. Все обработки длились 60 дней, после чего обработанных крыс гуманно умерщвляли.Сыворотки крови были обработаны на указанный выше гормональный профиль. Аналогичным образом полученные ткани яичек были обработаны для анализа спермы и полного антиоксидантного профиля яичек, обработанных HU , путем анализа на супероксиддисмутазу (SOD), каталазу (CAT) и глутатион (GSH), глутатионредуктазу (GSR), глутатионпероксидазу. (GSH-Px) и тиобарбитурические реактивные виды (TBARS). Результаты . Продолжительное лечение 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день HU в течение 60 дней вызывало дозозависимое снижение веса с наиболее значительным (p <0.001) эффект, зарегистрированный с максимальной дозой HU . Напротив, значительное (p <0,001) увеличение было зарегистрировано для GSI при той же дозе HU . Кломифен и HU также вызывали значительное (p <0,01, p <0,001) дозозависимое увеличение общего количества сперматозоидов,% живых сперматозоидов, но обратное влияние на% мертвых сперматозоидов и% аномальных сперматозоидов. Что касается гормонального фона, пероральное лечение экстрактом 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день вызывало глубокую депрессию (p <0,05, p <0.01 и p <0,001) дозозависимое увеличение сывороточного TS, LH и FSH, хотя это вызывало обратный эффект на сывороточный ПРЛ, но не вызывало значительных изменений в сывороточных уровнях ES. Точно так же пероральное лечение витамином С и 100-400 мг / кг / день HU индуцировало значительное (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) повышение активности антиоксидантных ферментов. Заключение. В целом, длительное пероральное лечение 100-400 мг / кг массы тела HU в течение 60 дней значительно улучшило функцию сперматозоидов, что было опосредовано усилением сперматогенеза, стероидогенеза и антиоксидантных механизмов.

1. Общие сведения

Бесплодие — серьезная проблема общественного здравоохранения, затрагивающая каждую пятую супружескую пару во всем мире, причем примерно 30% заболеваний обусловлены мужскими факторами [1]. Зарегистрировано, что несколько факторов могут влиять на процесс сперматогенеза и снижать количество и качество сперматозоидов, причем некоторые из идентифицируемых причинных факторов включают ишемическую болезнь сердца, сахарный диабет, хронические заболевания печени, курение сигарет, агрохимические стоки, загрязнители воздуха, и гиповитаминоз [2].Однако в предыдущем исследовании сообщалось, что регулярный прием антиоксидантов и витаминов, таких как витамины A, B, C и E, улучшает стабильность гематоэнцефалического барьера яичек и защищает ДНК сперматозоидов от эндогенного окислительного стресса, возникающего в результате активности высокоактивных свободных радикалов, образующихся в организме. тело [3].

Мужское бесплодие может проявляться в виде преждевременной эякуляции, гипоактивной сексуальности, эректильной дисфункции, олигоспермии, азооспермии, и т.д. ., Но наиболее частой формой его проявления является олигоспермия.При лечении этого состояния часто в клинических условиях используются тестостерон и другие формы заместительной гормональной терапии из-за их способности стимулировать / усиливать сексуальный аппетит у пациентов мужского пола с гипогонадизмом [4, 5]. Однако, несмотря на доказанную эффективность этой заместительной терапии в лечении гипоактивного полового влечения [6], многие пациенты по-прежнему предпочитают использовать натуральные растения из-за сопутствующих нежелательных побочных эффектов, связанных с этими гормональными методами лечения. Двумя примерами популярных трав, способствующих мужской фертильности, являются Panax spp.(женьшень) и Lepidium meyenii (Maca), которые известны своим предполагаемым действием по усилению афродизиака и сперматогенеза [7–9].

Hunteria umbellata (K. Schum.) Hallier f., Принадлежащее к семейству Apocynaceae, — дерево тропических лесов, которое обычно используется в африканской фольклорной медицине для лечения таких заболеваний человека, как дефицит крови, инфекции, опухоли, сахарный диабет. и ожирение [10–12]. Он известен как «Demouain» (по-французски) и «Abeere» (на диалекте йоруба) (юго-запад Нигерии) [11–13].В юго-западном регионе Нигерии водный настой высушенных семян Hunteria umbellata широко используется для местного лечения сахарного диабета и ожирения [12, 14]. Экстракт водных семян Hunteria umbellata ( HU ) растения, как сообщается, использовался для эффективного контроля концентрации глюкозы в крови и гликозилированного гемоглобина в моделях 1 и 2 типов лекарственно-индуцированных гипергликемических крыс линии Wistar [12, 14] с его содержанием алкалоидов. причастны к наблюдаемому биологическому эффекту [15].Тот же экстракт семян растений, как сообщалось, обладал эффектом против ожирения и антигиперлипидемическим действием в экспериментальных моделях гиперлипидемии, которая опосредовалась de novo ингибированием биосинтеза холестерина и триглицеридов [16]. Кроме того, исследования острой, хронической и обратной пероральной токсичности HU показали, что он относительно безопасен [12, 17].

Недавнее этноботаническое исследование, проведенное среди избранных практикующих травников Иджебу в штате Огун (юго-запад Нигерии), показало, что HU также широко применяется в борьбе с бесплодием у коренных народов (неопубликованные данные).Несмотря на это фольклорное использование, нет никаких научных отчетов, подтверждающих или опровергающих это фольклорное утверждение. Более того, исследования хронической пероральной токсичности и обратимости токсичности HU показали, что он вызывает глубокую пролиферацию сперматогенных примордиальных клеток, клеток Сертоли и Лейдига в тканях яичек крыс, получавших экстракт [17]. Аналогичным образом, HU , как сообщается, обладает антиоксидантными и улавливающими свободные радикалы свойствами, опосредованными, прежде всего, содержанием в нем алкалоидов [18].Таким образом, это исследование было разработано для оценки эффектов хронического перорального лечения 100, 200 и 400 мг / кг HU на массу тела, гонадосоматический индекс и параметры спермы самцов крыс Wistar, получавших лечение в течение 60 дней. Кроме того, влияние перорального лечения HU на всю систему антиоксидантных ферментов [супероксиддисмутаза (SOD), каталаза (CAT) и глутатион (GSH), глутатионредуктаза (GSR), глутатионпероксидаза (GSH-Px) — и тиобарбитурические реактивные формы) (TBARS)] обработанных яичек крыс, а также его влияние на сывороточный тестостерон (TS), лютеинизирующий гормон (LH), фолликулостимулирующий гормон (FSH), пролактин (PRL) и эстрадиол (ES).

2. Методы

2.1. Сбор и идентификация растительного материала

После того, как идентификация растений и сдача ваучерных образцов были выполнены, как ранее описано Адени и Адейеми [12], восемь (8) спелых плодов Hunteria umbellata были недавно собраны из лиственных лесов района Одорасаньин в Иджебу. -Игбо в штате Огун, Нигерия, июль-август 2016 года. Собранные плоды были разрезаны на кусочки, а их свежие семена обильно промыты под проточной водой и высушены на воздухе при комнатной температуре (° C) в течение 1 месяца. , в защищенном от прямых солнечных лучей и тепла.Высушенные семена измельчали ​​с использованием лабораторной молотковой мельницы в отделении фармакогнозии фармацевтического факультета Университета Лагоса, Иди-Араба, Лагос. Измельченный образец хранили в водонепроницаемом и герметичном контейнере и хранили при 4 ° C.

2.2. Процесс водной экстракции

50 г измельченных семян Hunteria umbellata замачивали в 500 мл дистиллированной воды и выдерживали в холодильнике в течение 72 часов. Раствор повторно перемешивали с использованием магнитной мешалки в течение 6 часов, прежде чем его фильтровали через стерилизованную фильтровальную воронку с белым носовым платком.Полученный фильтрат затем полностью сушили на воздухе в вентилируемой печи, предварительно настроенной на 40 ° C, с получением темно-коричневого твердого осадка со сладким запахом ( HU ). Эту процедуру повторяли еще 9 раз, и остатки собирали в водо- и воздухонепроницаемый контейнер и хранили в морозильной камере при -4 ° C, чтобы предотвратить разложение HU.

2.3. Экспериментальные животные

После получения институционального этического разрешения на использование экспериментальных животных тридцать шесть самцов крыс линии Wistar в возрасте от 12 до 14 недель весом от 220 до 250 г были получены из Bayo Farms, Sango-Otta, Ogun State, Нигерии и размещены в Доме животных Медицинского колледжа государственного университета Лагоса для акклиматизации в течение 14 дней.Во время акклиматизации крыс кормили стандартным кормом для крыс и водопроводной водой ad libitum и поддерживали в стандартных лабораторных условиях (периодичность свет-темнота 12/12 часов, температура: 23-26 ° C и относительная влажность 40-50%). предписано Национальным институтом здравоохранения США [19]. За два дня до начала эксперимента на животных крысы были случайным образом разделены на 6 групп по 6 крыс в каждой экспериментальной группе таким образом, чтобы различия в весе внутри и между экспериментальными группами не превышали ± 20% от среднего веса выборочной популяции крыс, соответственно. .

2.4. Обработка крыс

Тридцать шесть (36) самцов крыс линии Wistar с доказанной фертильностью были случайным образом разделены на 6 групп по 6 животных в каждой, и их пероральное лечение для каждой группы было следующим: Группа I: 10 мл / кг дистиллированной воды / день в течение 60 дней. Группа II: 0,3 мг / кг / день кломифена в дистиллированной воде в течение 60 дней. Группа III: 100 мг / кг / день HU в дистиллированной воде в течение 60 дней. Группа IV: 200 мг / кг / день HU в дистиллированной воде в течение 60 дней. Группа V: 400 мг / кг / день HU в дистиллированной воде в течение 60 дней.Группа VI: 20 мг / кг / день витамина С в дистиллированной воде в течение 60 дней.

2,5. Измерение массы тела

Массу тела крыс измеряли с использованием цифровых весов Mettler, и полученные значения записывали за день до начала эксперимента, каждые две недели в течение периода лечения и в последний день эксперимента.

2.6. Расчет гонадосоматического индекса (GSI)

Семенники и их хвостовой придаток яичка были идентифицированы, удалены, взвешены и немедленно зафиксированы в растворе Буэна для морфометрического исследования.Гонадосоматические показатели рассчитывались следующим образом: масса семенников ÷ масса тела} x 100 [20]

2.7. Гормональные анализы

Уровень тестостерона в сыворотке определяли радиоиммуноанализом (РИА). Анализы выполняли с использованием имеющихся в продаже наборов (Diagnostic Products Company, Лос-Анджелес, Калифорния, США). Все образцы были проанализированы за один и тот же период анализа. Вариация внутри анализа составляла 5,5%, в то время как чувствительность анализа тестостерона составляла 8 нг / мл. Уровни сывороток FSH, LH, PRL и ES измеряли с помощью иммунорадиометрического анализа (IRMA) в твердой фазе, также используя коммерчески доступные наборы (Diagnostic Products Company, Лос-Анджелес, Калифорния, США).

2.8. Приготовление образца спермы для анализа

На 61 день крыс умерщвляли вдыханием диэтилового эфира и делали продольный хирургический разрез вдоль шва мошонки и перегородки мошонки для обнажения яичек и их придатка яичка. Эпидидимис был освобожден от прилипшего жира и соединительной ткани. Левый придаток яичка собирали, взвешивали и разрезали на дистальном конце чистым хирургическим лезвием. Хвостовик придатка яичка (100 мг) осторожно измельчали ​​стеклянной палочкой, не повреждая ткань, до 5 мл 0.9% NaCl [21].

2.9. Анализ спермы на подвижность, подсчет и морфологию

Полный анализ спермы для определения прогрессивной подвижности, подсчета и морфологии был проведен в чистой счетной камере гемоцитометра Нойбауэра под покровным стеклом с использованием метода Аммана [21].

Количество сперматозоидов на хвостовой придаток яичка рассчитывали следующим образом: Среднее количество x 50} ÷ 0,01 x 0,01}

2,10. Оценка уровней пониженного глутатиона в яичках

При определении уровня GSH в яичках гомогенат тестикулярной ткани составляет 0.1М фосфатный буфер при pH 7,4 обрабатывали по методике, описанной Shaik и Mehvar [22].

2.11. Оценка активности SOD и CAT в ткани яичка

Активность SOD и CAT в ткани яичка оценивали с использованием метода Zhang et al. [23] и Ивасе и др. . [24] соответственно.

2.12. Анализ данных

Полученные данные представлены в виде среднего значения ± S.E.M. из шести наблюдений. Данные были проанализированы статистически с использованием одностороннего дисперсионного анализа по системе SYSTAT 10.6. Апостериорный тест проводился с использованием t-критерия Стьюдента, и уровни значимости учитывались при p <0,05, p <0,01 и p <0,001.

3. Результаты

3.1. Водная экстракция

Водная экстракция измельченных высушенных семян Hunteria umbellata давала темно-коричневый, сладко пахнущий твердый остаток весом в среднем 7,33 ± 0,32 г с процентным выходом 14,66 ± 0,65%.

3.2. Влияние перорального лечения кломифеном, витамином С и экстрактом семян воды

Повторные пероральные обработки с использованием 100-400 мг / кг / день HU индуцировали значительное (p <0.05, p <0,01 и p <0,001) связанное с дозой уменьшение в модели набора веса обработанных крыс, эффективное от дня до дня перорального лечения, по сравнению с характером увеличения веса крыс, получавших витамин С и кломифен, в течение такой же период лечения. Наиболее значительное (p <0,001) снижение веса наблюдалось при дозе 400 мг / кг / день HU в день (таблица 1). Однако ежедневное пероральное введение 0,3 мг / кг / день кломифена в течение 60 дней вызывало устойчивое и последовательное увеличение массы тела обработанных крыс с наиболее значительным (p <0.001) увеличение зарегистрировано на 60-е сутки (Таблица 1). Об аналогичном эффекте сообщалось для 20 мг / кг / день витамина С (таблица 1).

3.3. Влияние перорального лечения 100-400 мг / кг / день экстракта семян воды

Повторное пероральное введение 100, 200 и 400 мг / сут. кг HU индуцировал дозозависимое увеличение веса яичек и GSI обработанных крыс со значительным увеличением (p <0,001), зарегистрированным для крыс, получавших 400 мг / кг / день HU (таблица 2). Такие же эффекты были зарегистрированы у крыс, получавших кломифен и витамин С (таблица 2).

3.4. Влияние перорального приема 100-400 мг / кг / день

Повторяющееся ежедневное пероральное введение 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день HU в течение 60 дней при анализе спермы показал значимое (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) дозозависимое увеличение общего количества сперматозоидов у обработанных крыс с наиболее значимым (p <0,001 ) повышение, зарегистрированное у крыс, получавших самую высокую дозу (400 мг / кг / день) экстракта, которая была сопоставима с таковой, зарегистрированной для стандартного лекарственного средства (0.3 мг / кг / день кломифена) (Таблица 3). Аналогичная картина была также зарегистрирована для количества подвижных сперматозоидов (таблица 3). Однако HU оказал обратный эффект на% мертвых сперматозоидов и% аномальных количеств сперматозоидов (Таблица 3), в то время как 0,3 мг / кг / день кломифена вызвали значительное (p <0,001) увеличение% аномального количества сперматозоидов по сравнению с необработанные контрольные (группа I) крысы (таблица 3).

3.5. Влияние перорального лечения 0,3 мг / кг / день кломифена и 100-400 мг / кг / день экстракта семян воды

Повторное пероральное лечение 0 .3 мг / кг / день кломифена приводили к значительному (p <0,001) увеличению уровней TS, LH и FSH в сыворотке по сравнению с необработанными контрольными значениями (группа I) (таблица 4). Однако кломифен в дозе 0,3 мг / кг / день значительно (p <0,05) снижал уровень ES в циркулирующей сыворотке по сравнению со значениями группы I (таблица 4). Аналогичным образом, повторные обработки ступенчатыми пероральными дозами HU в течение 60 дней приводили к значительному (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) дозозависимому увеличению уровней TS, LH и FSH в циркулирующей сыворотке, в то же время приводя к значительному (р <0.05) снижение сывороточного ПРЛ по сравнению со значениями необработанного контроля (группа I) (таблица 4). Однако не было никаких значительных изменений в уровнях ES в сыворотке между группами лечения и необработанной контрольной группой (таблица 4).

3.6. Влияние перорального лечения 0,3 мг / кг / день кломифена и 100-400 мг / кг / день экстракта семян воды

Повторные пероральные обработки 0,3 мг Кломифен / кг / день не оказывал значительного (p> 0,05) изменения активности SOD, CAT и TBARS в тканях яичек по сравнению с необработанными контрольными значениями (группа I) (таблица 5). Однако повторное ежедневное пероральное лечение 100-400 мг / кг / день HU вызывало значительный (p <0.05 и p <0,001) дозозависимое увеличение уровней SOD, CAT и TBARS в тканях яичек по сравнению с необработанными контрольными (Группа I) и обработанными кломифеном (Группа II) значениями (Таблица 5). Точно так же пероральное лечение витамином C в дозе 20 мг / кг / день имело аналогичные эффекты на SOD, CAT и TBARS ткани яичек, зарегистрированные для крыс, получавших 400 мг / кг / день HU (таблица 5).

3.7. Эффект перорального лечения 100-400 мг / кг / день экстракта

Обработка 100-400 мг / кг / день HU вызвала значимые (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) дозозависимые уровни GSH, GSH-Px и GSR в ткани яичка по сравнению с необработанным контролем (Группа I) и обработанными кломифеном (Группа II) значениями (Таблица 6) .Однако значения, полученные для 400 мг / кг / день HU , были сопоставимы со значениями, зарегистрированными для крыс, получавших витамин С (Таблица 6). Также стоит отметить, что лечение кломифеном 0,3 мг / кг / день не вызывало серьезных изменений (p> 0,05) в уровнях GSH, GSH-Px и GSR в тканях яичек (Таблица 6).

4. Обсуждение

Бесплодие — это неспособность пары противоположного пола достичь клинической беременности после 52 недель или более регулярных незащищенных половых контактов. Другими словами, это полная неспособность сексуально компетентной и активной, не способной к контрацепции пары забеременеть через один или несколько лет, несмотря на регулярные сексуальные контакты [25].Последние эпидемиологические данные показали, что примерно 15% супружеских / не состоящих в браке пар страдают бесплодием, из которых только 40-50% случаев связаны с мужским бесплодием [26], которое само может быть связано либо с азооспермией, либо с эректильной дисфункцией [27]. Определяемые факторы (обратимые / необратимые), влияющие на мужскую фертильность, как сообщалось в предыдущих исследованиях, включают лекарственные препараты (такие как анаболические стероиды, замещающий тестостерон и опиаты), варикоцеле яичек, неопущение яичек, инфекции мочевыводящих путей, опухоль яичек, гормональный дисбаланс, преждевременную или ретроградную эякуляцию. , длительное тепловое воздействие, ожирение, пожилой возраст, курение сигарет, алкоголь, тяжелые металлы, пестициды, окислительный стресс, генетические факторы и различные факторы окружающей среды и питания [28–34].Таким образом, при лечении мужского бесплодия планы лечения разрабатываются с учетом идентифицируемой возможной причины, и эти вмешательства могут быть либо медицинскими, либо хирургическими [27, 35].

Помимо традиционного лечения бесплодия, бесплодные пары, как известно, одновременно используют традиционную / дополнительную медицину в качестве терапевтической альтернативы своему бесплодию, поскольку 25% современных лекарств либо растительного, либо растительного происхождения [36]. Более того, до 80% населения мира частично или полностью зависит от растительных продуктов для лечения своих заболеваний [37].Однако при оценке фармакологической активности лекарственных растений, повышающих мужскую фертильность, проводятся научные исследования моделей in vitro (с использованием линий культуральных клеток) и in vivo (с использованием экспериментальных животных и людей). Например, экстракты, полученные из Vanda tessellata [38], Turnera diffusa и Pfaffia paniculata [39], Eurycoma longifolia [40], Terminalia catappa [41], Butea frondosa [42] , Curculigo orchioides [43], Panax quinquefolius (женьшень) [44] и Lepidium meyenii были исследованы и, как сообщалось, усиливают действие афродизиаков, в то время как экстракты, полученные из Astragalusmbranaceus, Asparagus racemosraphus, Withania spp. , и Acanthopanax senticosus , как сообщалось, также улучшают параметры сперматозоидов [45, 46].

В этом исследовании мы оценили возможное повышение фертильности и механизм действия HU у самцов крыс Wistar в течение 60 дней в качестве альтернативы / дополнения к существующим препаратам, повышающим фертильность, с учетом их высокой стоимости и связанных с ними нежелательных побочных эффектов. с их клиническим применением. При этом самцам крыс Wistar вводили через желудочный зонд дифференцированные дозы (100, 200 и 400 мг / кг / день) HU самцам крыс Wistar в течение 60 дней подряд с использованием таких конечных точек, как соматогонадальный индекс, параметры анализа спермы и гонадный гормон. профиль, а также антиоксидантный профиль тестикулярной ткани.

Гормональный анализ крыс, получавших HU , четко показал, что экстракт значительно улучшает циркулирующие сыворотки TS, FSH и LH, в то же время уменьшая циркулирующий пролактин. Литература показала, что повышение уровня тестостерона, ФСГ и ЛГ в сыворотке улучшает качество сперматозоидов в зависимости от количества, объема, подвижности и морфологии сперматозоидов [43]. Известно, что ФСГ и ЛГ влияют на судьбу половых клеток, и это влияние опосредуется их действием на специфические трансмембранные рецепторы, рецептор фолликулостимулирующего гормона (ФСГ-Р) и рецептор лютеинизирующего гормона (ЛГ-Р), которые явно выражаются в Клетки Сертоли и интерстициальные клетки Лейдига соответственно [47–50].Имеется множество научных доказательств критической роли сигнального пути ЛГ-тестостерона в праймировании и поддержании процесса сперматогенеза во внетубулярных клетках Лейдига, в то время как ФСГ регулирует сперматоцитогенез и сперматогенез, влияя как на зародышевый эпителий, так и на клетки Сертоли [51, 52]. Таким образом, взаимодействие ФСГ, ЛГ и тестостерона сильно влияет на количественный и качественный сперматогенез. В этом исследовании повторное пероральное лечение 100-400 мг / кг / день HU стимулировало значительный сперматогенез, который характеризовался увеличением объема и количества сперматозоидов, прогрессирующей подвижностью и улучшением морфологии сперматозоидов.Это улучшение качества спермы могло быть связано с улучшением стероидогенеза, характеризующимся повышением циркулирующих TS, FSH и LH, которые, как широко сообщалось, усиливают сперматогенез [53]. Кломифен, подобный тамоксифену, является известным антиэстрогенным аналогом, который блокирует взаимодействие эстрогена с передней долей гипофиза, вызывая повышенный синтез ЛГ, ФСГ и ТС [54]. Таким образом, механизм повышения фертильности с помощью HU, по-видимому, аналогичен механизму кломифена.

Еще одним важным открытием этого исследования является незначительное изменение уровней циркулирующего пролактина в группах лечения.Физиологически пролактин подавляет секрецию ЛГ и ФСГ, что неизменно снижает уровни циркулирующего TS и снижает сексуальное влечение. Это утверждение полностью согласуется с повышенными уровнями ФСГ, ЛГ и ТС в группах, получавших HU . В предыдущих исследованиях сообщалось, что любое растение с потенциалом повышения афродизиака / мужской фертильности часто значительно снижает сывороточный ПРЛ и повышает уровни циркулирующих ЛГ и ФСГ и, соответственно, увеличивает уровни циркулирующего ТС [55, 56], с чем наши результаты полностью согласуются.

Сообщалось, что лекарственные растения, богатые некоторыми вторичными метаболитами, такими как фенольные кислоты, флавоноиды, флавоны, алкалоиды и витамины-антиоксиданты (например, витамины A, C, D и E), стимулируют и усиливают сперматогенез [57–61]. Однако в наших предыдущих исследованиях сообщалось, что HU богато алкалоидами, флавоноидами, дубильными веществами и гликозидами [12]. Таким образом, относительное обилие этих фитохимических веществ могло быть ответственным за усиление сперматогенеза, наблюдаемое в этом исследовании.

Причина бесплодия примерно у 50% всех бесплодных пар полностью или частично связана с мужскими факторами, одним из факторов которых является окислительный стресс [62]. Избыточное производство свободных радикалов или активных форм кислорода (АФК) связано с повреждением сперматозоидов, и, как таковые, АФК широко изучались в этиологии мужского бесплодия. Супероксид-анион, гидроксильный радикал и перекись водорода являются одними из основных АФК, присутствующих в семенной плазме, и они участвуют в мужском бесплодии [63–66].В нормальных физиологических условиях сперматозоиды вырабатывают небольшое и незначительное количество АФК, и это важно для емкости сперматозоидов и акросомной реакции. Однако, когда генерация АФК является подавляющей, она может необратимо связываться с полиненасыщенными жирными кислотами, богатыми плазматической мембраной и цитоплазмой сперматозоидов, что приводит к перекисному окислению липидов и гибели клеток сперматозоидов [67].

Антиоксиданты, включая супероксиддисмутазу (SOD), каталазу и глутатионпероксидазу (GPX), часто высвобождают АФК, чтобы защитить сперматозоиды от вредного воздействия генерируемых АФК [68, 69].Сперма также содержит множество эндогенных неферментативных антиоксидантных молекул, таких как витамины A, C, D и E, пируват, глутатион и карнитин [70]. Эти антиоксиданты компенсируют потерю цитоплазматических ферментов сперматозоидов во время сперматогенеза, что, в свою очередь, снижает механизмы эндогенной репарации и ферментативную защиту [71–73]. Принимая во внимание установленную прямую взаимосвязь между фертильностью самцов и антиоксидантным статусом яичек, HU значительно улучшило антиоксидантный статус обработанных яичек крыс, о чем свидетельствуют повышенные уровни SOD, CAT, GSH, GSH-Px, GSR и TBARS, которые согласуются с нашими предыдущими открытиями in vitro [18] и in vivo [74] и недавно опубликованными Oboh et al .[10]. Таким образом, эти результаты ясно демонстрируют потенциал HU в значительном улучшении сперматогенных параметров за счет его антиоксидантного механизма. Кроме того, в литературе показано, что антиоксиданты улучшают различные окислительные процессы, включая сперматогенез и стероидогенез [68, 75], тем самым подтверждая наблюдаемые сперматогенные и стероидогенные эффекты HU у обработанных крыс, которые объясняются его высоким антиоксидантным профилем.

5. Заключение

В целом, длительное пероральное лечение 100-400 мг / кг / день HU в течение 60 дней значительно улучшило функцию сперматозоидов (по оценке подвижности, количества, жизнеспособности и морфологии сперматозоидов), опосредованного увеличением сперматогенез, стероидогенез и антиоксидантные механизмы.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Конфликт интересов

Авторы не заявляют о конфликте интересов. Адеджувон Адевале Адени — профессор кафедры фармакологии, терапии и токсикологии факультета фундаментальных клинических наук Медицинского колледжа государственного университета Лагоса и главный исследователь настоящего исследования. Джозеф Абайоми Олагунджу — профессор кафедры медицинской биохимии факультета фундаментальных медицинских наук Медицинского колледжа государственного университета Лагоса и соисследователь этого исследования.Бабатунде Адекунле Муртала — главный технолог отделения физиологии факультета фундаментальных медицинских наук Медицинского колледжа государственного университета Лагоса и соисследователь настоящего исследования.

Вклад авторов

Адеджувон Адевале Адени задумал, разработал и провел исследование. Он также анализировал и интерпретировал данные и отвечал за написание рукописи. Бабатунде Адекунле Муртала проводил анализ спермы, а Джозеф Абайоми Олагунджу также участвовал в разработке дизайна исследования и интерпретации данных.

Благодарности

Авторы выражают благодарность за полную финансовую поддержку, предоставленную этой исследовательской работе через выделение средств Фонда исследований на базе учреждений TETFUND, второго () пакетного исследовательского проекта на цикл 2016 года. Наша исследовательская группа также благодарит за вклад проректора и руководства Государственного университета Лагоса (LASU) во главе с профессором Оланреваджу А. Фагбохун, а также сотрудника отдела LASU TETFUND, доктора Сураджа Мудасиру, за содействие и своевременное выделение средств. для этой исследовательской работы.В то время как исследовательская группа также должным образом благодарит персонал технической поддержки приюта для животных, LASUCOM, за уход за экспериментальным животным, использованным в период исследования, техническая поддержка г-на Сандей О. Аденекана из BIOLIFE CONSULTS в области Мы высоко ценим анализ окислительного стресса. Эта исследовательская работа была полностью спонсирована Федеральным правительством Нигерии через институциональный исследовательский грант Фонда высшего образования (TETFund).

Оценка фитохимической, антиоксидантной и улучшающей память активности Garuga pinnata Roxb.Кора и Bryophyllum pinnatum (Lam) Oken. Листья

Garuga pinnata Roxb. (Burseraceae) — дерево среднего размера, широко распространенное в тропических регионах Азии. Bryophyllum pinnatum (Lam) Окен. (Crassulaceae) — коренное и экзотическое растение, выращиваемое в тропических регионах. Оба растения использовались для их противовоспалительного, антиоксидантного, противоопухолевого, ранозаживляющего, противодиабетического действия и т.д. мощность и сохранение памяти у экспериментальных мышей наряду с количественной оценкой способности нейтрализации фенольных соединений и радикалов DPPH.Активность по улучшению памяти определялась методом приподнятого крестообразного лабиринта у мышей с амнезией, вызванной скополамином, с использованием пирацетама в качестве аллопатического препарата и шанхпушпи в качестве стандартных аюрведических препаратов. Две дозы (200 и 400 мг / кг перорально) обоих экстрактов вводили мышам в течение 8 дней подряд; Задержка передачи индивидуальной группы была записана через 45 минут, а память о пережитых вещах была исследована через 1 день. Для определения антиоксидантной активности и общего количества фенола, соответственно, использовали метод анализа DPPH и метод Фолина-Чокалтеу.400 мг / кг экстракта коры B. pinnatum в метаноле значительно улучшили память и обучение мышей с задержкой переноса (TL) 32,75 с, что сопоставимо со стандартным пирацетамом (21,78 с) и Шанхпушпи (27,83 с). Более высокое содержание фенолов было определено количественно в экстракте коры B. pinnatum (156,80 ± 0,33 µ г GAE / мг сухого экстракта), а также антиоксидантная активность (69,77% ингибирования свободных радикалов при концентрации 100 µ г / мл. ). Наше исследование провозгласило научное доказательство того, что оба растения улучшают память.

1. Введение

Память — это жизненно важный процесс, с помощью которого записываются переживания, которые можно использовать для адаптации их реакции к окружающей среде. Болезнь Альцгеймера (БА) является серьезным заболеванием, связанным с ухудшением памяти, и ее можно охарактеризовать как непрерывное нейродегенеративное заболевание, которое может приводить к старческой деменции, особенно в области коры головного мозга и гиппокампа. Помимо отчетливых клинических проявлений, поведенческие признаки включают прогрессирующую потерю памяти, нарушение способности суждения, проблемы с принятием решений, ориентацию в физической атмосфере и языковые проблемы [1].Исследования пациентов с БА выявили снижение уровня ацетилхолина в головном мозге [2]. Несмотря на то, что существует множество вариантов лечения для лечения БА, из-за отсутствия полной эффективности и побочных эффектов в настоящее время растет интерес к растительной медицине.

Шанкхпушпи — широко используемый растительный препарат для лечения когнитивных расстройств со времен Ачарьи Чарака (200 г. до н.э.) до наших дней [3]. Шанкхпушпи классифицируется как Медхья Расаяна, то есть эффективное тонизирующее средство для мозга согласно аюрведическим текстам.Согласно Аюрведической фармакопее Индии, целые части Convolvulus pluricaulis Choisy одобрены для использования в медицинских целях [4]. Основываясь на их способности лечить нарушения памяти и форму цветка, три других ботанических препарата, а именно Clitoria ternatea Linn., Canscora decussata Schult. И Evolvulus alsinoides Linn. также классифицируются индийскими практикующими как Шанкхпушпи [5]. Чаще всего он показан при тревоге, депрессии, психических заболеваниях, судорогах, бессоннице, жгучей боли, гиперлипидемии, осложнениях со стороны мочевыводящих путей и отеках.Сообщалось, что Шанхпушпи регулирует синтез адреналина и гидрокортизона из организма [4, 6]. Shankhpushpi увеличивает количество ацетилхолина в области гиппокампа в зависимости от введенной дозы, которая может способствовать его активности по улучшению памяти [7]. Нейтрализация нейротоксических свободных радикалов наряду с усилением разрастания нейритов также играет важную роль в этом эффекте [8, 9].

Bryophyllum pinnatum (Crassulaceae) широко распространен в тропических и субтропических регионах по всему миру.Надземные части или все растение можно использовать для лечения гипертонии, сифилиса, желтухи, кандидоза, дисменореи, судорог и т. Д. Многие биологически активные соединения, такие как бриотоксин A, B, C, кофейная кислота и протокатеховая кислота, были обнаружены из этого растения [10], которые проявляют различные активности, такие как антиоксидантная, противоязвенная, анальгезирующая активность [11]; противоуролитиаз; и так далее [12].

Garuga pinnata (Burseraceae) — лиственное растение, произрастающее в Индии, а также в восточной и южной частях Азии.Сообщалось, что экстрактов G. pinnata обладают противоязвенной, противоопухолевой, антибактериальной, противодиабетической и антиоксидантной активностью [13]. Этномедицински, в Непале, отвар из листа B. pinnatum и коры G. pinnata используется этническими группами общины тару для улучшения памяти. Однако нет никаких научных доказательств этого этномедицинского утверждения. Таким образом, наше исследование в основном сосредоточено на изучении эффекта улучшения памяти этих двух растений наряду с их антиоксидантной активностью.

2. Материалы и методы

2.1. Химические вещества

Используемые химические вещества: пирацетам и скополамина гидробромид (Asian Pharmaceuticals, Непал), Shankhpushpi (Bhagvati Herbal and Healthcare Private Limited, Индия), аскорбиновая кислота (Merck), DPPH (Sigma-Aldrich), бикарбонат натрия (Fisher Scientific), соляная кислота, хлорид ртути, хлорид калия, хлорид железа, ацетат свинца и лента кагния (SD fine-chem limited).

2.2. Сбор и экстракция растений

г.pinnata и B. pinnatum были собраны в Боадгоу, Капилвасту, Непал (27,5518 ° с.ш., 83,0469 ° в.д., высота 107 м от уровня моря) в течение сентября 2019 г. и идентифицированы Национальными лабораториями гербариев и растений Непала. Ваучерные образцы растений были депонированы в лаборатории фармакогнозии Crimson College of Technology (CCT-HRB-075-187 ( G. pinnata ) и CCT-HRB-075-188 ( B. pinnatum )). . Кора и листья обоих растений были высушены в тени; измельчали ​​до тонкого порошка и экстрагировали путем тройной мацерации с использованием метанола в качестве менструального цикла.Экстракты сушили с помощью роторного вакуумного испарителя при 45 ° C и получали липкий высушенный экстракт, который далее хранили при 4 ° C до использования.

2.3. Фитохимический скрининг

Предварительный скрининг на наличие вторичных метаболитов в образце проводился с использованием ранее описанных методов с небольшими модификациями [14–16].

2.4. Общее содержание фенола (TPC)

Для определения TPC был принят метод Фолина – Чокальте [17].TPC рассчитывали по калибровочной кривой галловой кислоты и выражали в виде мкл эквивалента г галловой кислоты (GAE) / мг экстрактов.

2,5. Измерение антиоксидантной активности

Способность растительных экстрактов нейтрализовать свободные радикалы DPPH определялась ранее установленным методом [18]. Этанол и аскорбиновая кислота использовались в качестве холостого и стандартного образцов соответственно. Процент улавливания радикалов рассчитывали по следующему уравнению:

Здесь A ₀ обозначает поглощение раствора DPPH, а A ₁ обозначает поглощение исследуемого образца.

2.6. Этическое одобрение животных и исследования острой токсичности

Самцов и самок швейцарских мышей-альбиносов (25–30 г) помещали в полипропиленовые клетки со стандартным кормом и водой ad libitum. Обращение с животными, уход и план экспериментов проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по обзору, Совет по исследованиям в области здравоохранения Непала (Ref. № 622/2019). Подопытные животные акклиматизировались в течение двух недель перед экспериментальными процедурами [19–21]. Рекомендации Организации экономического сотрудничества и развития были использованы для изучения острой токсичности у экспериментальных животных [22].

2.7. Деятельность по улучшению памяти

2.7.1. Метод приподнятого крестообразного лабиринта

Приподнятый крестообразный лабиринт и амнезия, вызванная скополамином, использовались для дизайна экстероцептивного и интероцептивного поведения соответственно, чтобы контролировать когнитивные способности и сохранение памяти, в соответствии с ранее разработанным методом с небольшими изменениями [23 ].

Был использован приподнятый крестообразный лабиринт, имеющий 2 открытых рукава (16 × 5 см), 2 закрытых рукава (16 × 5 × 12 см), поднятых вертикально на высоту 25 см.Отдельные экспериментальные животные содержались у края открытого рукава, обращенного далеко от среднего рострума; затем отмечали общую продолжительность движения от края открытой руки к обеим закрытым руками с использованием всех ног (время ожидания передачи, TL). Те животные, которым не удавалось проникнуть внутрь любой закрытой руки в течение 90 секунд, любезно подталкивались к закрытым рукавам, и TL считалось 90 секунд. Мышам разрешалось обыскивать лабиринт в течение следующих 10 с, а затем возвращаться в клетку. Память об этой опытной работе была исследована через 1 день после дня первоначального обследования.

Задержка передачи через 1 день была интерпретирована в терминах коэффициента перегиба (IR) с применением следующего уравнения: где L ₀ — задержка передачи через 1 день, а L ₁ — первая передача задержка выражается в секундах.

2.7.2. План эксперимента

Всего 48 мышей были разделены на 8 групп ( n = 6). Все группы, за исключением контроля с носителем (группа I), обрабатывали гидробромидом скополамина (0.4 мг / кг) внутрибрюшинно, на восьмой день лечения экстрактом / стандартным лекарственным средством для индукции амнезии. Латентность переноса регистрировалась через 45 минут, и память о пережитом оценивалась через 1 день в каждой классификации: (1) Группа I: контроль носителя (2) Группа II: контроль скополамина (3) Группа III: B. pinnatum листьев испытуемый образец (200 мг / кг) (4) Группа IV: испытуемый образец листьев B. pinnatum (400 мг / кг) (5) Группа V: испытуемый образец коры G. pinnata (200 мг / кг) (6 ) Группа VI: г.pinnata образец коры (400 мг / кг) (7) Группа VII: Шанхпушпи (5-кратное разведение) (8) Группа VIII: пирацетам (100 мг / кг)

2.8. Статистический анализ

Все данные были представлены в виде среднего ± стандартное отклонение. Средние различия между разными классами были рассчитаны с помощью одностороннего дисперсионного анализа (MS-Excel 2019) и считались значимыми, если.

3. Результаты

3.1. Экстракционный выход, фитохимический скрининг и общее содержание фенолов

Экстракционный выход метанольного экстракта г.pinnata коры и листьев B. pinnatum составляли 12,04 и 10,46% соответственно. Качественное фитохимическое исследование выявило наличие фенольных соединений, флавоноидов, дубильных веществ, сапонинов и алкалоидов. Общее количество фенола было определено количественно с использованием калибровочной кривой стандартной галловой кислоты (рис. 1) и интерпретировано как эквивалент галловой кислоты (GAE). Общее фенольное содержание листьев B. pinnatum и коры G. pinnata составило 27.782 ± 0,25 и 156.80 ± 0,33 µ г GAE / мг сухого экстракта соответственно.