Накрутка активности в группе вк: Накрутить активность в группе ВК (лайки. просмотры, репосты) на новые посты

Содержание

Накрутка статистики ВК недорого, накрутить активность ВКонтакте

Социальные сети активно используются не только для знакомств, но и для бизнеса, способствуя реализации товаров и услуг. Для этого предпринимаются меры по популяризации тематических групп и их продвижению в ТОП поисковых запросов. Группа или страница ВК с низкой активностью не способна надолго оставаться в рейтинге выдачи. Обеспечить эффективную поддержку раскрученному сообществу поможет покупка профессиональной эмуляции активности Вконтакте. Наш веб-сервис Smmlaba предлагает купить расширенный комплекс услуг, позволяющий имитировать активность на выбранных вами аккаунтах ВК.

·         Лайки новых записей

Простой, но надежный программный механизм позволяет в случайном порядке выставлять лайки свежим комментариям. Неважно, какой оттенок они несут. Иногда кардинально противоположное мнение порождает продолжительное обсуждение и даже спор, а значит, и способствует росту интереса к обсуждаемой теме.

·         Накрутка просмотров в группах

Не менее важно обеспечить простой интерес со стороны посетителей и пользователей сайта. Именно эта категория является наиболее многочисленной, а покупка эмуляции такой активности Вконтакте выглядит вполне естественной. Ваша группа ВК и отдельные публикации будут обеспечены новыми посетителями, среди которых с большой долей вероятности найдутся те, кто даст дальнейшее развитие предложенной вами идее, теме или станет активным участником группы.

·         Репосты рандомных записей

Обмен заинтересовавшей информацией очень важен для дальнейшего продвижения группы и изложенных на ее страницах публикаций. В числе оказываемых нами услуг по эмуляции активности Вконтакте предлагается распространение среди друзей, знакомых и прочих респондентов появляющихся записей. Это могут быть как отдельные посты, так и комментарии к ним. Чтобы репосты выглядели наиболее естественно, записи определяются в случайном порядке.

Накрутка статистики Вконтакте — надёжный способ оставаться в ТОПе

Пользоваться нашими услугами просто и удобно.

Купив отдельное направление эмуляции активности Вконтакте, вы указываете период, на протяжении которого хотели бы получать наши услуги, и количество суточных активных действий. Там же указана и стоимость, оплатить которую вы можете с помощью наиболее популярных систем электронных платежей.

Результат сотрудничества с нами вы ощутите сразу. Повышенная активность в группе привлекает новых участников обсуждений и даже подписчиков, тем самым способствуя продвижению сообщества и росту его популярности.

Накрутка лайков и подписчиков Вконтакте

Комплексная накрутка ВКонтакте

Продвижение и накрутка ВК позволяет сделать ваш паблик более популярным. Дело в том, что Вконтакте — это одна из самых развитых социальных сетей в русском сегменте интернета и не только. Изначально она была создана только для общения, но сегодня группы и сообщества в Вконтакте — это отличный способ развить собственный бизнес: создать дополнительный рекламный паблик к своему делу или создать его прямо Вконтакте. Это могут быть магазины или просто информационные группы, которые будут востребованы среди многочисленной аудитории. А нужно больше подписчиков или участников сообщества, которые регулярно просматривают записи и посты, то тем выше стоимость рекламы в этой группе.

Если вы создали свою группу в ВК, но в ней мало участников, а также недостаточно активности под постами, продвижение сообщества поможет решить эту проблему. Главная цель раскрутки группы — привлечение как можно большего количества участников и подписчиков. Можно увеличить популярность своей страницы многими методами, каждый из которых имеет свои преимущества и недостатки. Один из самых эффективных, недорогих и безопасных способов — покупка активности и подписчиков.

Сервис PR Motion — лучший, и предлагает вам услуги накрутки страницы или сообщества Вконтакте на самых выгодных условиях. Мы работаем сразу в нескольких направлениях и продвигаем быстро, надежно и качественно. В этом вы можете убедиться сами, гарантируем, почитайте о нас отзывы!

Давайте рассмотрим методы продвижения, которые мы используем.

Накрутка через покупку лайков Вконтакте


Если рассматривать отдельные посты и публикации в группе Вконтакте, то «пальцы вверх» или «сердечки» как их называют — это основные показатели их популярности. Дело в том, что человек, который видит много лайков под сообщением, может либо автоматически поставить оценку, а затем уже его прочитать, а может просто заинтересоваться и прочитать, доверяя оценке других людей и увеличивая тем самым просмотры. Учитывая критерии, поэтому продвижение сообщества за счет лайков — первое, что необходимо делать для дальнейшей раскрутки.

Чтобы самостоятельно увеличить количество лайков, необходимо:

  • постоянно работать над контентом, тратя драгоценное время;
  • настраиваться на долгий процесс развития аккаунта;
  • ставить взаимные лайки, подписываться на другие паблики и пр.

Все эти методы раскрутки сообщества с нуля малоэффективны, хоть и бесплатны. Ваше время стоит денег, поэтому можно провести его с гораздо большей пользой! А продвижение группы Вконтакте от PR Motion стоит сравнительно недорого, но при этом результат вы получаете моментальный!

Раскрутка через покупку подписчиков Вконтакте


Как работает данный сервис раскрутки? В вашу группу в Вконтакте вступают реальные люди, активные пользователи которые, безусловно, через некоторое время начнут отписываться. Но этого времени будет достаточно, чтобы повысить к вам доверие целевой аудитории. Люди, которые реально интересуются вашим контентом, фолловеры, с большей вероятностью выберут вас, если у вашей группы ВК будет больше участников, чем у конкурентов.

Но стоит понимать, что эффективность накрутки сообщества в ВК будет выше, если вы будете дополнительно мотивировать народ присоединиться к вам:

  • делать интересные публикации, сопровождать их яркими фото и аудио, публиковать развлекательные или познавательные видео;
  • не забывать о регулярности — люди привыкают к тому, что в вашей группе посты появляются, например, 10 раз в день;
  • баловать своих подписчиков, например, акциями, розыгрышами, промокодами и пр.

Накрутка через покупку просмотров Вконтакте


Любая публикация ВК профиля может быть просмотрена в следующих случаях:

  • если зритель на вас подписан и регулярно посещает группу, чтобы увидеть ваш контент;
  • если зритель на вас подписан и смотрит ваши посты в новостной ленте;
  • если зритель на вас не подписан и находит вас в топе рекомендаций — это и позволяет обрести новых подписчиков.

Алгоритмы Вконтакте работают так, что, чем больше просмотров под вашей публикацией, тем быстрее он попадает в топы. Поэтому продвижение и раскрутка сообщества Вконтакте происходит естественным образом: просмотры лишь подталкивают пост в рекомендации, больше людей его видят, больше людей им заинтересовываются, больше людей в итоге становятся вашими фолловерами ВК.

Раскрутка через покупку комментариев В ВК


Стоит отметить, что раскрутка странички Вконтакте при помощи комментариев — это лишь дополнительная мера, так сказать «важный добивающий» метод (но мы рекомендуем использовать все методы продвижения), который будет эффективно работать лишь в двух случаях:

  • у вашего сообщества в ВК уже есть много подписчиков, есть лайки, но полученных комментариев почему-то недостаточно;
  • если хотите накрутить лайки, недостаток комментариев под такими постами будет выглядеть странно не только для подписчиков, но и для модераторов и алгоритмов.

Поэтому накрутка комментов от пользователей под постами Вконтакте в качестве дополнительной меры станет отличным инструментом для вашего продвижения. А сервис PR Motion предоставит вам надежную и живую аудиторию, где ознакомится с нашими услугами по ссылке. С нашей помощью вы сможете раскрутить вашу группу или паблик ВК в максимально короткие сроки. Вы можете легко проверить сервис: закажите у нас минимальное количество лайков, и мы гарантируем, что вы увидите результат уже завтра! Ну а мы всегда рады видеть вас в числе наших постоянных клиентов!

Дайте нам задание, и мы покажем свой профессионализм! Используйте на сайте оплату онлайн любым способом для начала работы с накручиванием!

ВК (Вконтакте): Раскрутка/Накрутка/Продвижение — Подписчики (в группу/сообщество). Челябинск

Полезная информация:

Накрутка подписчиков Вконтакте

ELL Studio предлагает купить подписчиков ВКонтакте в группу на выгодных условиях. ВКонтакте – одна из популярных и посещаемых социальных сетей в Рунете, главный конкурент Facebook и Twitter по количеству участников и активности юзеров. ВКонтакте предлагает множество инструментов для социального взаимодействия: возможность добавления в друзья, ранжирование друзей по категориям (коллеги, родственники, лучшие друзь ВКонтакте).

Функция быстрого обмена сообщениями и файлами, прослушивания аудиофайлов и просмотра видео, а также лайки, комментарии, репосты и другие функции делают социальную сеть очень удобной для общения и развлечений.

Накрутить подписчиков в группу ВК с помощью сервиса ELL Studio

ВКонтакте является также одной из основных социальных сетей в SMM-технологиях, т. е. продвижении брендов и товаров в массмедиа. Наличие большого количества онлайн-подписчиков ВКонтакте, выразивших одобрение, оставивших комментарии и поделившихся информацией о товаре/услуге позволяет повысить лояльность целевой аудитории. Чтобы добиться этого, используются различные инструменты, включая накрутку ВКонтакте. Сделать это можно как «вживую», привлекая пользователей броскими заголовками, изображениями и материальным поощрением, так и с помощью различных программных методов, в т. ч. купить подписчиков ВК. ELL Studio предлагает вам прекрасную возможность добиться высоких показателей и повысить количество вступивших в вашу группу/паблик купив необходимую Вам услугу.

Воспользуйтесь выгодной возможностью купить подписчиков в группу ВК
Здесь вы сможете купить подписчиков в группу ВКонтакте дешево, заказав любое количество офферных пользователей в режиме онлайн. Офферы – это настоящие пользователи, имеющие собственный активный аккаунт в социальной сети. За вознаграждение они выполняют требуемые действия, которые в сумме позволяют повысить рейтинг вашей группы. Заказывайте прямо сейчас, и вы сможете купить накрутку ВКонтакте быстро – от нескольких часов до нескольких суток в зависимости от необходимого количества офферов. Заказ подписчиков в группу ВК – это распространенная практика в SMM.

Существует множество ресурсов, где можно заказать их для выполнения определенных действий:

  • вступить в группу;
  • подписаться на обновление страницы;
  • добавиться в друзья;
  • поставить лайк;
  • оставить комментарий;
  • поделиться записью в своей ленте.

Быстрая накрутка подписчиков ВКонтакте онлайн: офферы обычные и по критериям
На ELL Studio представлено множество возможностей добиться нужных результатов в увеличении активности в группе. Накрутить группу ВК у нас можно по различным критериям. Начиная от обычных пользователей для набора количества подписчиков без определенных требований к аккаунту и заканчивая юзерами по определенным требованиям к региону проживания, возрасту, полу — накрутить подписчиков ВКонтакте вы сможете по различным параметрам!

Заказать накрутку подписчиков ВКонтакте в группу у нас можно по таким критериям:
Без определенных требований. Эта услуга направлена на быстрый результат при проведении различных рекламных акций и других краткосрочных мероприятий в рамках продвижения в социальных сетях. В этом случае вы сможете купить подписчиков в ВКонтакте в нужном количестве (минимум 100), но не можете в дальнейшем контролировать их действия (через некоторое время пользователь может покинуть паблик).Быстро и с высоким качеством. В этом случае активность пользователей, подписавшихся на группу, контролируется на предмет выполнения нужных действий (поставить лайк, оставить комментарий, сделать репост и т. п.). Это гарантирует вам лучшие результаты и предсказуемость действий в группе ВКонтакте, а также долгосрочный эффект в продвижении бренда/товара.

Следующая категория услуг на ELL Studio – это покупка накрутки подписчиков ВК онлайн по критериям. Здесь вы сможете заказать нужное число активных пользователей, вступивших или подписавшихся на ваш паблик, соответствующих определенным критериям. Если вы продвигаете косметику для женщин, то вы можете заказать офферов среди женских аккаунтов определенного возраста. Если раскручиваете сайт по продаже автоинструмента, то офферные подписчики на вашу группу покупаются среди мужчин.

Купить подписчиков ВКонтакте вы сможете также по регионам, с использованием функции геотаргетинга, т. е. выбрать пользователей, проживающих в определенном регионе и городе. Эта возможность позволит вам значительно повысить конверсию вашего сайта, а также пригласить реальных покупателей в ваш оффлайновый магазин. Данной функцией часто пользуются заказчики, предлагающие свои услуги в определенном регионе/городе: фотографы, стилисты, парикмахеры, мастера маникюра и т. п. В этом случае накрутка в ВК это 80 % эффективности всей рекламной кампании.

Накрутка подписчиков ВКонтакте онлайн быстро поможет вам добиться высоких результатов в продвижении

Купить подписчиков в ВК на ELL Studio вы сможете очень легко. На сайте вы найдете несколько виджетов, по которым можно перейти для быстрого заказа в режиме онлайн. Выберите подходящую услугу и введите ваши данные для обработки задания. Через короткое время вы увидите значительно возросшую активность в своей группе. Почему именно у нас нужно заказывать накрутку лайков и подписчиков в ВК? Конечно, вы можете воспользоваться и автоматическими инструментами для накрутки, которые предлагают роботизированные аккаунты, имитирующие реальные действия живых пользователей. Но это может иметь негативные последствия и сыграть с вами злую шутку, т. к. администрация соцсети имеет право заблоЧелябинскать вашу группу за такие действия.Другие сайты для накрутки в ВК также предлагают возможность купить живых офферов, но не все они способны гарантировать предсказуемость и стабильность поведения пользователей.

На ELL Studio вы получаете гарантию результата. Мы контролируем поведение пользователей, что позволяет вам не беспокоиться об активности вашей группы в социальной сети.
— г. Челябинск



Накрутка ботов ВК бесплатно и вовсе за копеечки — 0,23р

На сайте представлена рабочая инструкция о накрутке ботов Вконтакте бесплатно, а так же недорогие сервисы с эконом услугами на ботов ВК

Дешёвая накрутка ботов в группу ВК – опись сайтов и цен на них

Боты ВК — это не заблокированные странички, это фейковые профили, созданные специально для увеличения активности страниц. Боты — это самый бюджетный вариант на рынке услуг, а потому и более актуальный. Давайте рассмотрим сайты, с наиболее дешевыми ценами на накрутку ботов в группу ВК:

  1. https://doctorsmm.com — сервис с чётким дизайном и активной техподдержкой, предлагает один из самых удобных вариантов того, как добавить бота в ВК за деньги. Подписчики боты в группу ВК стоят 290 – 300 р за 1000 шт, смотря на категорию.
  2. https://prtut.ru — это сервис, на котором можно накрутить ботов в ВК недорого. Набрать на нём стандартных ботов в группу можно по 300 р за 1000 ед. Консультанты работают с 9 до 24, вопросы решаются быстро, в порядке живой очереди.
  3. Avi1 — относительно молодая, но уже опытная фирма, дающая возможность заказать не просто ботов 1000 шт за 207 р, но и 1000 ботов с активных аккаунтов за 269 р.
  4. Zakazweb — это интернет-магазин услуг с пёстрым, рябящим в глазах дизайном, предлагающий мгновенную накрутку ботов ВК, 1000 шт за 200 р, за дополнительную плату можно выбрать пол и возраст ботов.
  5. Prof­it-smm — ещё один сайт, с неудачным дизайном, но с приятными ценами, помогающий продвигать социальные сети. Подписчики в группу – скорей всего боты, потому что дёшево и с отписками, кое-где будет присутствовать информация о принадлежности страницы к странам СНГ — 179 р за 1000 шт.
  6. Vasv­top — дизайн хороший, а вот боты оставляют желать лучшего, сайт честно заявляет об их некачественности: у многих пустые страницы, нет записей и даже аватарки отсутствуют, цена 200 р за 1000 ботов в группу. Подписчики боты — не отписываются, но могут быть забанены.
  7. Like­ma­nia – продолжает развиваться и сайт Win­like — кусочек их сети, где просто подписки неизвестного качества стоят 1000 шт— 1890 р, а в онлайн-чате название гласит – открытая линия Like­ma­nia, пишешь, в ответ – тишина. На настоящем сайте Like­ma­nia на 1000 подписчиков ботов придётся оставить 350 р.
  8. Простоспец — нет вкладки боты, есть вступившие в группы – эконом, 1000 таких аккаунтов выйдут на 451,26 р. Можно добавить им страну или город, возраст и пол за дополнительную плату.
  9. Fast­pro­mo — своеобразный сайт с непонятной альтернативой. Есть 2 вида стандартных подписчиков-ботов в группу, везде низкое качество, средняя скорость, разница лишь в цене — 711,55 р за 1000 шт или 920,20 р за столько же.
  10. Prices­mm — это не коммерческий сервис, однако, для получения большей информации на тему покупки ботов, стоит заглянуть в этот блог.

Лучшая техника накрутки ботов в ВК группу бесплатно

Боты накручиваются для видимости и дальнейшего привлечения настоящих пользователей сети. Это недорогой материал, который в разы может увеличить заинтересованность мимо проходящих. Вот несколько простых советов, которые помогут выйти на новый уровень:

  1. Ещё разок подумайте о теме своего бизнеса, просмотрите аккаунты конкурентов, что они предлагают в своих группах, решите, как Вы будете двигаться дальше: создадите группу или начнёте распространять услугу со своего профиля.
  2. Заполните страницу, подберите соответствующую фотографию на аватарку. Если Вы продвигаете услугу или товар, то аватар должен быть связан с бизнесом, если это Ваша личная страница, то она должна говорить о Вас. Помните, что пользователи ВК, не добавленные в друзья, в первую очередь увидят Вашу авку и имя, затем всё остальное.
  3. Расшарьте страницу, если желаете большего увеличения показателей рейтинга. Если Вы откроете страницу для всех пользователей, то они смогут увидеть информацию с Вашей страницы, а Вы сможете получить больше друзей. Профиль можно открыть и для сторонних от ВК людей, и при вводе в поисковике имени страницы выйдет информация о Вас.
  4. Определитесь с контентом, выкладывайте посты как можно чаще, главное, чтобы количество не повлияло на качество.
  5. Добавьте друзей, подписчиков, а также создайте активность на странице с помощью товарищей, близких, а также групп взаимного добавления показателей популярности. Не забывайте следить за лимитами и ограничениями в ВК при различных вариантах увеличения аудитории.

    Только после этого стоит делать накрутку ботами. Так, как сделать ботов в ВК бесплатно, 50 или даже 500+? Вам могут помочь такие лайфхаки, как:

  • С помощью софтов, которые могут увеличить друзей в основном ботами. Однако, есть вероятность добавления собачек, от которых придётся избавляться вручную, либо устанавливать доп. проги для их удаления. Нельзя использовать несколько программ одновременно. Бесплатных софтов почти нет, но есть демо-версии платных, где чуть меньше функций, но смысл тот же, как пример — VK10000Friends. Недостаток любой программы, в том, что все действия Вы производите с Вашей страницы, и админы легко могут обнаружить непонятную активность по IP.
  • Бесплатным методом продвижения ВК и других соцсетей являются биржи, Вы получите на них офферов, но они могут быть не активными, да и выглядеть как боты. Там придётся оставлять свои данные и также, как и в 1 случае, есть опасность быть забаненными.

Самой безвредной для страницы является накрутка на платных сервисах.

Сколько стоят боты ВК на рынке СММ услуг — сравнение

Сколько стоит бот ВК на сервисах? Цена за 1 бота в настоящий момент представлена с очень большим разбегом от 10 копеек до 2 р. Нет смысла платить тысячи за ботов, когда можно за такие деньги приобрести живых, поэтому дорогие фирмы рассматривать бессмысленно. Боты обычно представлены в низком и в стандартном качестве, либо просто указаны, как подписчики—эконом. Интересным вариантом покажутся боты с активными аккаунтами (см выше). Очень важна скорость поступления ботов на страницу. Если она будет очень быстрой, их сразу заблокируют админы. Стремитесь к более спокойному плавному продвижению. Не делайте накрутку без предварительного увеличения аудитории вручную.

От чего зависит цена на ботов:

  • От количества и качества (с аватарками или без).
  • От оптовиков — цена закупки.
  • От рекламы сайта, где фирма себе брала рекламу и почём.
  • От численности штата (зарплату сотрудникам тоже надо с чего-то выдавать).
  • От процента, который фирма оставит себе на дальнейшее развитие.

    Но это совсем не означает, что если компания большая, то и денег с покупателей сдерёт побольше. Сейчас большая конкуренция в smm сфере, каждый стремится быть лучше и в профессиональном плане, и в стоимости, компании предоставляют акции и скидки.

Как сделать ботов в ВК с нуля до 100К одним лишь кликом

С нуля никаких накруток в социальных сетях делать не рекомендуется. Они сразу будут обнаружены администрацией и заблокированы. Мало того, даже при очень аккуратном взаимодействии с ботами списания неизбежны, но Вы можете предотвратить массовую блокировку подписок.

Варианты того, как добавить бота в группу ВК наиболее быстрым образом представлены тут:

  • Можно воспользоваться платной накруткой ботов ВК с помощью программы. Кликов явно придётся сделать больше одного, но по скорости выйдет оперативнее, чем скажем на бирже. Для этого Вам придётся ознакомиться со всеми нюансами выбранной программы. Почитать о том, как её настроить правильно либо разобраться самостоятельно, без наличия мануала. При установке параметров набора соблюдайте ограничения ВК. А также заранее позаботиться о защите своего компьютера от вирусов и потенциально нежелательного ПО.
  • Либо заказать ботов у профи на недорогом сервисе. В фирме, которая уже ни один год занимается этим, знает и соблюдает лимиты сети, даёт гарантии конфиденциальности, где Вам не придётся ни о чём задумываться. Найдите подходящий сайт, сообщите техподдрежке информацию о возрасте вашей страницы, задайте вопросы, выберете способ оплаты, совершите её, и ждите поступления ботов.

Добавить ботов в ВК без задержек и больших списаний

Наиболее безопасно получить ботов можно, привлекая коммерческие сервисы. Накрутка там происходит более естественно, поступления плавные и за ними следят профессионалы. Естественно при заказе на сайте минимум проблем и списаний.

Чтобы меньше переживать о списаниях, лучше придерживаться такой линии поведения в накрутке ботов, как:

  1. В начале заполняете профиль, добавляете наиболее правдоподобный вариант картинки или фото на аватар. Создаёте уникальный контент, ежедневно публикуете материалы.
  2. Далее, увеличиваете показатель друзей и подписчиков самостоятельно, следя за ограничениями.
  3. Затем разбираетесь как добавить бота ВКонтакте безопасно на сайте, при этом:
  • следите за желанием накрутить как можно больше, около 50 ботов в день вполне достаточно, далее, потихоньку можно довести этот показатель до 500 подписок в день, но лучше меньше;
  • ежедневно подчищайте собачек, сделать это можно либо самому, либо спец приложениями.;
  • оставляйте ссылки с рекламой о странице на сторонних сервисах, и привлекайте настоящих пользователей для смешанных поступлений, но ни в коем случае не заказывайте накрутку в нескольких местах;
  • устраивайте конкурсы на странице для большей активности живой публики, просите знакомых оставить Вам комменты и сердечки.

Как накрутить ботов ВК на страницу и в группу — Активных

Представьте себе ситуацию, когда боты не просто подписались к Вам на страницу, а начали продвигать её, смотреть посты, ставить сердца, а может и оставлять комменты. Как приобрести активных или запрограммированных на активность ботов?

Сейчас существует три варианта получения активных ботов на страницу или в группу:

  • Накрутка ботов ВК программой с различной стоимостью. В этом случае придётся разбираться с особенностями программы. Придётся искать скрипты для бота в интернете или создавать самому. Для работы в программах требуется логин и пароль Вашей страницы ВК, поэтому главная опасность — взломы.
  • Купить автоматизированных ботов у частных лиц в интернете. Никто не спорит с тем, что профессиональные разработчики смогут создать Вам ботов не просто стандартных, а под заказ, с теми функциями, которые Вам необходимы. Цены на каждый пункт будут особыми и автоматизация за эксклюзив может достигнуть 50000 р, а ещё можно попасть на мошенников.
  • То ли дело отечественные сервисы, предлагающие ботов по низким ценам. Да, сейчас на некоторых сайтах появилась возможность купить ботов с активными аккаунтами. Прайс не сильно отличается от обычного. Плюсы и в том, что на сайтах заключается договор, даются гарантии, а также предложены варианты скорости поступления ботов.

Быстрые боты ВК – цена от 23 коп за малоактивного подписчика

Самая распространенная причина покупки ботов в социальных сетях — получение дохода. Заработать можно несколькими путями:

  1. Рекламируя чужой товар или услугу на своей странице, получать деньги за просмотры её или же за переход по ссылке с Вашего профиля в группу компании, а может за покупку товара, всё зависит от пожелания фирмы. Обычно доход около 5%, но для именитых блогеров он гораздо больше.
  2. Открыть своё дело в соцсетях. Благоприятно соединить страницы всех социальных сетей. Создать интернет-магазин в ВК сейчас не составляет труда. Тут можно продвигать как свои товары, так и товары партнёров.
  3. Можно заняться раскруткой групп для их последующей продажи.

Чтобы фирмы обратили на Вас внимание, для этого надо получить на профиль порядка 1000 — 2000 подписчиков. Если изначально у акка есть хотя бы 100 пользователей ВК, добавив ботов, можно быстрее начать зарабатывать. Глядя на активность на Вашей странице, и количество подписок на Ваш профиль увеличится, и процесс пойдёт быстрее.

Получить ботов размеренно для безопасности, но быстрее, чем другими вариантами можно на smm сервисах. Можно ли найти бота за 23 копейки? При покупке ботов ВК цены на сайтах могут отличаться, но приятно обнаружить на сайтах не только за 23, но и за 20 копеек.

Накрутка ботов ВК – программы с доказанной эффективностью

С изобретением роботов наступил переломный момент в мире, и вот, прогресс добрался до социальных сетей. Необходимость в накрутке «живыми» будет становится всё меньше, ровно в той прогрессии, с какой будет проявляться автоматизация. Приобретать их пачками скоро будет ни к чему, появятся активные боты что в программах, что на сервисах.

Большинство программ, выполняющих накрутку ботов в ВК группу бесплатно, занимаются подписками, сердцами и репостами, часто это демо-версии платных софтов, надо понимать, что они урезаны и самый лучший софт – платный.

Эффективность активных, автоматизированных ботов максимальна и уже сейчас мы можем наблюдать такие функции как:

  • писать друзьям, загружать фото, вступать в сообщества, постить на чужие страницы — Botovod, Viking Botovod,
  • автоматически обновлять статус — VkBot,
  • написание более оригинальных текстов, благодаря поддержки синонимов — Бробот.

Эти программы поддерживают работу с прокси сервером, что позволяет одному компьютеру выполнять запросы к другим от своего имени.

Несмотря на повышение функционала, с программами надо разбираться, а ещё их безопасность всё ещё далека от совершенства. Если у Вас мало времени или нет желания этим заниматься, всегда можно обратиться к профи – smm сервисы сделают всю работу за Вас.

А вы знали, что у нас есть Instagram и Telegram?

Подписывайтесь, если вы ценитель красивых фото и интересных историй!

Накрутка

Если вам приходилось заниматься накруткой, то наверняка вы слышали термин «Оффер». Сейчас я расскажу вам, что он означает, и научу вас покупать и накручивать офферов для группы или страницы Вконтакте.

Читать полную версию →

Загрузка…

В процессе раскрутки группы (см. как раскрутить группу вконтакте), владельцу приходится применять много способов повышения активности аудитории (см. как повысить активность в группе вконтакте).

Один из самых эффективных методов — это проведение всевозможных конкурсов. А если еще и призы добавите, то просто замечательно. Ваши подписчики обязательно захотят принять участие. Как итог — рост аудитории, ее активность.

Давайте вместе подумаем, какие идеи для такого мероприятия, были бы особенно актуальные.

Читать полную версию →

Загрузка…

Если вы являетесь владельцем группы Вконтакте, то количество подписчиков не является вашей конечной целью. Наиболее важна активность аудитории. Нет смысла в большом числе людей, которые не принимают участия в жизни сообщества. Если нет обсуждений, лайков, а в случае с бизнес сообществом — продаж, то пользы от такого сообщества нет.

Один из важных моментов, который не стоит упускать из вида — это раскрутка. Вы должны привлекать в свою группу живую аудиторию, которая заинтересована в предлагаемом вами контенте. Нет особого смысла накручивать ботов. Эффекта не будет. И можете схлопотать блокировку. Нам нужна именно живая аудитория.

Но что делать дальше? Допустим, мы привлекли десять, сто, несколько тысяч человек. Как теперь вовлечь их в активную жизнь сообщества? Об этом читайте ниже.

Читать полную версию →

Загрузка…

Мы с вами уже разбирали, что такое спам вконтакте. Если вы будете рассылать его со своей страницы, то во-первых, ее скорее всего заблокируют (см. как заблокировать страницу в контакте), а во вторых, больших успехов вы не добьетесь (см. что делать если заморозили страницу в вк).

Другое дело, если использовать специальный софт. Сейчас я покажу вам программу для спама Вконтакте.

Читать полную версию →

Загрузка…

Мы с вами уже разбирали, как накручивать основные показатели:

Теперь я хочу показать вам, как накручивать голоса в опросах вконтакте. Разобраны будут несколько способов.

Читать полную версию →

Загрузка…

В данной инструкции я покажу вам программу для накрутки друзей в вк. Дам ссылку на ее скачивание, и покажу подробный алгоритм работы.

Читать полную версию →

Загрузка…

В данной инструкции я покажу вам два способа, которые позволят накрутить лайки и подписчиков вконтакте. Они бесплатные. Хотя при необходимости, вы можете заплатить за накрутку деньги — так процесс пойдет быстрее.

Речь будет идти про популярный сервис и программу. Обо всем ниже.

Читать полную версию →

Загрузка…

Мы с вами уже говорили про накрутку лайков вконтакте, и увеличение количества подписчиков (см. как накрутить группу в контакте).

Теперь давайте поговорим про комментарии. Сейчас я покажу вам, как накрутить комментарии вконтакте. Будут рассмотрены основные способы, которые вы сможете использовать онлайн.

Читать полную версию →

Загрузка…

Если у вас есть своя группа вконтакте, то вы должны знать и применять методы, которые позволят увеличить вашу аудиторию. Весь пустое сообщество никому не нужно.

Я уже показывал вам, как раскрутить группу вконтакте самому. Давайте продолжим разбирать эту тему, и познакомимся с другими, не менее эффективными способами.

Итак, как раскрутить группу вконтакте бесплатно, и не только.

Читать полную версию →

Загрузка…

Продолжаем тему накрутки. Для увеличения популярности нашей страницы, мы уже научились накручивать лайки (см. как накрутить лайки вконтакте) и репосты (см. как накрутить репосты вконтакте).

Очень популярно иметь большое количество непрочитанных сообщений. Это значит, что много пользователей хотят с вами связаться. Как накрутить сообщения вконтакте? Очень просто. Сейчас я покажу вам рабочие методы.

Читать полную версию →

Загрузка…

Если у вас есть группа или сообщество вконтакте, то вы наверняка заинтересованы в том, чтобы количество ее участников росло.

Чтобы это происходило, вы должны соблюдать ряд условий. Публиковать интересные материалы, взаимодействовать со своей аудиторией и т.д. Давайте поговорим про это подробнее.

Итак, как набрать людей или участников в группу вконтакте?

Читать полную версию →

Загрузка…

Считается, что чем больше у вас друзей и подписчиков вконтакте, тем более популярна ваша страница (см. как сделать свою страницу вконтакте популярной). Иметь в социальной сети несколько тысяч друзей (см. как набрать 10000 друзей вконтакте), естественным путем удается только людям, которые имеют определенную популярность в реальной жизни, или в мировой паутине. Певцы, блогеры, политики и т.д. На их страницах всегда можно увидеть большое количество подписчиков.

А как быть простым пользователям? Что нужно сделать, чтобы накрутить много подписчиков вконтакте?

На самом деле, особой сложности здесь нет. И способов довольно много. Сейчас я покажу вам основные.

Читать полную версию →

Загрузка…

Мы с вами уже знаем, что такое репост вконтакте. И как правило, их тоже любят накручивать.

Мы с вами уже научились, как накручивать лайки вконтакте. С репостами процесс не сильно отличается. Сейчас я дам вам пошаговую инструкцию.

Читать полную версию →

Загрузка…

На очереди у нас еще один сервис, с помощью которого мы получим сердечки на свои материалы Вконтакте. Я покажу вам, как правильно зарегистрироваться, что нужно сделать, чтобы получить баллы, и как потратить их на создание нового задания.

Итак, накрутка лайков в сервисе турболайкер.

Читать полную версию →

Загрузка…

Продолжаем знакомиться с сервисами, с помощью которых можно проводить накрутку вконтакте. Сейчас я покажу вам сайт Vliker.ru, и научу вас им пользоваться.

Итак, накрутка лайков онлайн в лайкере.

Читать полную версию →

Загрузка…

Продолжаем накручивать лайки вконтакте, и подписчиков на нашу страницу. Сейчас я покажу вам еще один сервис, который поможет это сделать. Называется он Olike.

Сейчас мы разберем, как зарегистрироваться, и что нужно сделать в личном кабинете, чтобы получить желаемые сердечки, и новых гостей на своей странице.

Итак, накрутка лайков и подписчиков с сервисом Olike.

Читать полную версию →

Загрузка…

Продолжаем тему накрутки лайков и подписчиков. Сейчас я покажу вам сервис likest. С его помощью мы сможем получить сердечки на наши материалы (см. где в вк посмотреть свои лайки), а также увеличить количество ваших подписчиков (см. накрутка подписчиков в группу).

Читать полную версию →

Загрузка…

Популярность материалов в социальной сети вконтакте, принято оценивать по количеству лайков, которые оставили пользователи. Это своеобразный метод показать то, что фотография, видео запись или пост на стене, понравился.

Некоторые люди хотят накручивать лайки. Сейчас я покажу вам программу для накручивания лайков вконтакте. С ее помощью вы без труда наберете большое количество сердечек.

Читать полную версию →

Загрузка…

Все покупки вконтакте совершаются благодаря использованию внутренней валюты — голосов.

Первым делом, вы должны получить их на свой счет. Все основные способы, позволяющие это сделать, вы найдете в этой инструкции. Теперь можно тратить их, на приобретение товаров или услуг.
Читать полную версию →

Загрузка…

Продолжаем говорить про заработок и накрутку голосов. В инструкции как заработать голоса вконтакте, я уже рассказывал про сервис роболайкер.

Сейчас мы подробнее познакомимся с ним, пройдем процедуру регистрации, и научимся им пользоваться. Мы будем использовать роболайкер для получения голосов в вк.

Читать полную версию →

Загрузка…

Если вы решили приобрести голоса, чтобы потратить их на покупку подарков (см. как отправить подарок вконтакте), стикеров (см. все стикеры вк бесплатно установить) и прочих плюшек, то нужно знать, сколько стоит 1 голос вконтакте.

Сейчас я расскажу вам об этом, и покажу, где находится форма для покупки голосов (см. как передать голоса вконтакте).
Читать полную версию →

Загрузка…

Друзья мои. Данную инструкцию я публикую с той целью, чтобы предостеречь вас от использования подозрительных программ.

Перед написанием этой статьи, я попробовал скачать в сети популярный чит на голоса в вк. И сейчас я расскажу вам, к чему привело его использование.
Читать полную версию →

Загрузка…

Голоса — это внутренняя валюта, используемая в социальной сети вконтакте. Она позволяет приобретать различные бонусы, тратить на приложения, подарки (см. как отправить подарок в вк бесплатно) и тд.

В данном уроке мы поговорим о том, что такое голоса и как их можно получить или заработать. Рассмотрим, как платные, так и бесплатные методы.
Читать полную версию →

Загрузка…

Если у вас есть свое сообщество, то наверняка вы задавались вопросом, как накрутить подписчиков в группу в вк? Ведь получение целевой аудитории — основная задача.

Для этой цели можно использовать несколько методов. Сейчас я расскажу вам о них.
Читать полную версию →

Загрузка…

Как вы уже знаете, в рамках социальной сети вконтакте, можно вступать в дружбу с другими пользователями. Эти люди будут отображаться у вас в одноименном списке, и вы получите некоторые функции, которые доступны только для друзей. Они в свою очередь тоже.
Читать полную версию →

Загрузка…

Популярность ваших фотографий, добавленных на страницу профиля Вконтакте, оценивается по количеству положительных комментариев (см. для чего нужны комментарии в вк), репостов (см. как сделать репост в вк) и лайков. Как правило, пользователи чаще всего ставят именно сердечки — тем самым выказывая свой интерес и одобрение вашей фотки. Многие даже ставят себе цель, получить как можно больше сердечек для своей аватарки.
Читать полную версию →

Загрузка…

Если вы хотите, чтобы пользователи вашего сайта имели возможность высказать свое мнение или начать обсуждение, необходимо, чтобы для них была доступна функция комментирования. Разработчики Вконтакте сделали специальную форму комментариев, которую вы можете вставить на свой сайт или блог. Если пользователь что-то напишет, то это сообщение автоматически продублируется на его странице — что приведет к небольшому увеличению интереса к вашему проекту. Смотрите также — виджет группы вк.

Читать полную версию →

Загрузка…

Голоса являются внутренней валютой социальной сети Вконтакте. С их помощью вы можете покупать всевозможные штуки — открытки, подарки (см. как бесплатно отправить подарок в вк) и тд. Основной способ их получения — покупка за реальные деньги (см. как пополнить счет в контакте). Но нас это не особо устраивает. Давайте посмотрим, как накрутить голоса в ВК бесплатно.
Читать полную версию →

Загрузка…

Накрутка Instagram | Раскрутка YouTube

Бесплатный анализ профилей в инстаграм позволяет получать актуальные данные о любом публичном профиле: динамика изменения количества подписчиков, подписок и среднего количества лайков на последних публикациях. Данная услуга предназначена для определения качества аудитории и фактов накрутки, в первую очередь это окажется полезным для рекламодателей. Обратите внимание, что в случае добавления профиля, ранее не проходившего анализ, может потребоваться какое-то время для получения актуальной статистики. Подробное описание услуги: ССЫЛКА

ВАЖНО! Обратите внимание, что данный метод не является наиболее точным анализатором накрутки, т.к. при правильном продвижении все графики будут выглядеть вполне естественно.

Вы можете добавить на анализ любой публичный профиль инстаграм, что позволит следить за динамикой его прогресса. Инструмент анализа позволяет ежедневно сохранять в базу данных следующие показатели:
— количество подписчиков на профиле;
— среднее количество лайков на последних публикациях;
— количество публикаций на анализируемом профиле;
— рейтинг профиля по результатам анализа десятков показателей;
— процент активной аудитории;
— количество исходящих подписок.

Сводный анализ перечисленных показателей, выведенный на графики, дает возможность определить ряд важнейших деталей, например, по резким скачкам количества подписчиков или лайков можно отследить факт накрутки или моменты, когда инстаграм срезает подозрительную активность.

При наличии достаточного количества статистических данных о профиле, можно с высокой степенью вероятности спрогнозировать его развитие, а наша система автоматически сгенерирует рекомендации по улучшению показателей.

Данный инструмент будет полезен рекламодателям, желающим проверить потенциальных партнеров. Остерегайтесь сотрудничества с обладателями аккаунтов инстаграм с резкими перепадами количества подписчиков на графике, т.к. в большинстве случаев они свидетельствует о наличии ботов или нецелевой аудитории.

Наибольшее доверие рекламодателей, как правило, вызывают профили с плавно растущими показателями.

Вы можете добавить на анализ любое суммарное количество профилей инстаграм, но не более одного за раз. Обратите внимание, что к собранной статистике будут иметь доступ все пользователи нашей системы.
Правила использования сервиса: заказывая данную услугу, вы соглашаетесь с правилами нашей системы. См. правила использования сервиса.

Дополнительная информация об анализе профилей в инстаграм: ССЫЛКА

Как накрутить подписчиков для группы в Вконтакте: 3 лучших способа

Накрутка подписчиков в группу в ВК необходима, чтобы повысить посещаемость и вывести сообщество в ТОП. Количество последователей влияет на популярность среди похожих по тематике.

Накрутить подписчиков в Вконтакте

Стандартное продвижение сообщества, даже с интересной темой, может занять от месяца до нескольких лет. Зависит от количества контента, как подписывались пользователи в течение первого времени, были ли репосты. Если в группе низкая активность – повысить посещаемость сложно, если не использовать накрутку участников или платные способы продвижения.

Варианты, как сделать сообщество активным:

  • пригласить блогеров. Сотрудничество с популярными персонами повысит интерес к группе;
  • платная таргетированная реклама. Найти целевую аудиторию и поставить несколько записей на продвижение;
  • накрутка. Получить подписчиков с помощью создания заказа в одном из сервисов;
  • сотрудничество с другими сообществами.

Вариант с блогерами также требует оплаты. Зависит от тематики сообщества: система бартеров или оплата самого заказа. Например, если группа направлена на продажу товаров, то возможен формат с бартером: блогеру отправляют товар на тестирование после чего – тот делает обзор и рекламирует группу среди своей аудитории.

Gainstorm — лидер по цене/качество

Накрука подписчиков в сообщество ВК доступна через сервис GainStorm. В его функции входит платный способ продвижения и с помощью обмена заказами. Если владелец группы не хочет пополнять счет – нужно выполнить несколько заданий, получить баллы. После – настроить продвижение по тому объему монет, который есть на счету.

Как сделать накрутку подписчиков в ВК платно:

  1. Зайти на сайт и создать аккаунт – перейти в раздел: «Магазин».
  2. Выбрать нужное количество монет – пополнить счет.
  3. Подождать, пока средства появятся.

Следующий шаг – создать заявку на продвижение. При выборе параметров, пользователь может указать максимальную скорость на привлечение подписчиков.

Как быстро накрутить активных подписчиков:

  1. Нажать сверху: «Начать продвижение» — выбрать пункт: «Подписчики».
  2. Задать нужное количество и скорость – запустить.

При выполнении задачи пользователю будут приходить уведомления. Отследить результат можно и через сообщество, регулярно просматривая список подписчиков.

Накрутить с помощью Morelikes

Накрутка людей в группу в ВК доступна через сервис Morelikes. В отличие от GrainStorm, здесь нет бесплатного получения монет. Но пользователь может выбрать один из вариантов тарифов: с максимальной скорость, с привлечение подписчиков, накруткой лайков и комментариев одновременно.

Каждый тариф выделен отдельно, поэтому можно выбирать один из представленных или оформить заявку сразу на несколько. Как работать с сервисом:

  1. Зайти в сервис – создать аккаунт или авторизоваться через социальные сети.
  2. Подтвердить адрес электронной почты.
  3. Перейти в раздел: «Услуги» — указать в списке социальную сеть: «Вконтакте».
  4. Указать тариф и тип аудитории.
  5. Добавить в корзину и оплатить заявку.

Владелец сообщества может корректировать количество подписчиков, которые должны появиться. В зависимости от выбранного тарифа, скорость накрутки может отличаться.

С помощью кнопки: «Детали» можно узнать подробную информацию о форме продвижения: лимиты для заказа, требования к аккаунту или сообществу, можно ли заказать повторно.

Заказать накрутку в Hypelike

Накрутка живых подписчиков через Hypelike – это еще один способ, как получить живую аудиторию. Пользователь добавляет необходимый объем, указывает тариф и следит за ходом выполнения задачи. Как и в предыдущем сервисе, здесь нет заработка монет. Поэтому получить подписчиков возможно только через пополнение счета.

Как сделать накрутку через HypeLike:

  1. Зайти на сайт – выбрать: «Регистрация».
  2. Ввести активный адрес электронной почты.
  3. Перейти в боковом меню во вкладку: «Вконтакте» — указать услугу.
  4. Выбрать один из тарифов – отредактировать количество подписчиков.
  5. Добавить в корзину – пополнить баланс.
  6. Запустить продвижение.

В сервисе есть несколько вариантов накрутки участников: живая аудитория и боты. Вторые необходимы, чтобы увеличить количество посетителей страницы и создать эффект активности.

Отдельно есть раздел с «Эмуляцией активности», которая поможет в продвижении сообщества и появлении его в ТОПе.

Получить подписчиков в группу ВК

Другие варианты, как накрутить подписчиков в ВК – создать таргетированную рекламу или привлечь блогеров. Первый вариант подходит, если владелец группы «знаком» со своей аудиторией: их предпочтения, наиболее удобные способы просмотра контента, тип устройства и прочие.

Преимущества платной рекламы в ВК:

  • разрешена социальной сетью. Пользователю не нужно соблюдать лимиты и следить за страницей, чтобы отследить наличие предупреждений или блокировок;
  • результативность, если правильно выставить параметры.

При оформлении объявления для Вконтакте, нужно учесть требования к размеру фотографии или видео, определить сроки проведения и максимальную цену за одного подписчика.

Сотрудничество с блогерами или другими сообществами будет эффективным, если выбраны площадки с активной аудиторией. Также влияет и тематика: если темы различаются, то в группу будет привлечено минимальное число потенциальных клиентов.

Таргетированная реклама: как запустить

Бесплатная накрутка людей в группу в ВК таким способом невозможна. Но владелец сообщества сможет провести тонкую настройку по предполагаемым подписчикам.

Как запустить:

  1. Зайти в ВК – перейти в свое сообщество.
  2. Нажать под аватаркой: «Создать объявление» — выбрать места размещения.
  3. Указать сроки проведения – подобрать тип публикации.
  4. Вписать основные интересы аудитории, геолокацию и возраст.
  5. Указать цену за подписчика – запустить.

После того, как владелец сообщества создаст рекламу – она отправится на рассмотрение к модерации. Проверка может занять более суток, а если была допущена ошибка – запись будет возвращена.

Сотрудничество с блогерами

С помощью сервисов, как EpicStars, владелец сообщества сможет найти блогера для продвижения. При выборе обращают внимание на похожие темы, количество аудитории и активность самого блогера. Важны и отзывы, которые были после выполнения других рекламных предложений.

Искать блогера, чтобы накрутить подписчиков в ВК:

  1. Зайти в EpicStars – создать аккаунт.
  2. Перейти к поиску: указать в фильтрах «Вконтакте».
  3. Написать в личных сообщениях или отправить уведомление в самом ВК.
  4. Договориться о цене и сроках проведения.

Обычно, рекламодатель самостоятельно предлагает формат публикации для рекламы. Это может быть короткое видео или целая запись для Ленты.

Сотрудничество с другими сообществами – также подходящий вариант, чтобы привлечь аудиторию. Для этого, нужно составить рекламу и предложить группе. Возможен вариант с репостом, когда другое сообщество просто прорекламирует, поделившись публикацией в своей ленте.

Повышение бифункциональной электрокаталитической активности в углеродных нанолистах с со-легированием S и N для высокоэффективных Zn-воздушных батарей

Zn – воздушные аккумуляторы — перспективные устройства для электрохимического накопления и преобразования энергии. Для практического применения срочно необходимы бифункциональные кислородные электрокатализаторы с низкой стоимостью. В данном случае безметалловые пористые углеродные нанолисты (SNC), легированные S и N, были получены путем простой двухэтапной термической обработки. Благодаря синергическому эффекту серы и азота была достигнута превосходная бифункциональная электрокаталитическая активность в отношении реакций восстановления и выделения кислорода, намного лучше, чем у однокомпонентных углеродных нанолистов.Расчеты также подтверждают, что введение S в углеродные нанолисты, легированные азотом, может эффективно повысить их каталитическую активность OER и даже общие каталитические характеристики. Кроме того, Zn-воздушные батареи, изготовленные с помощью SNC, показали высокую плотность мощности и отличную перезаряжаемость, превзойдя по характеристикам большинство известных безметалловых и даже металлических электрокатализаторов, и полностью продемонстрировали хорошие перспективы для практического применения.

У вас есть доступ к этой статье

Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуй еще раз?

Оценка активности экстракта водных семян Hunteria umbellata по повышению мужской фертильности у крыс Wistar

Предпосылки. В этом исследовании на крысах Wistar изучали активность экстракта водных семян Hunteria umbellata ( HU ) по повышению фертильности самцов в дозе 100, 200 и 400 мг / кг / день в течение 60 дней. При этом было изучено влияние повторных доз HU на характер набора веса, гонадосоматический индекс (GSI), сывороточный фолликулостимулирующий гормон (FSH), лютеинизирующий гормон (LH), тестостерон (TS), пролактин (PRL), и эстрадиол (ES), а также антиоксидантный статус яичек обработанных крыс как способ выяснения механизма (ов) действия HU . Метод. Тридцать шесть (36) самцов крыс линии Wistar были случайным образом разделены на шесть групп (I-VI) по шесть крыс в группе. Крысам группы I вводили через зонд 10 мл / кг / день дистиллированной воды, и они служили необработанным контролем; Крысам группы II вводили через зонд кломифен в дистиллированной воде в дозе 0,3 мг / кг / день; Крысы групп III-V получали 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день HU , соответственно, а крысы группы VI получали 20 мг / кг / день витамина C в целом. дистиллированная вода. Все обработки длились 60 дней, после чего обработанных крыс гуманно умерщвляли.Сыворотки крови были обработаны на указанный выше гормональный профиль. Аналогичным образом полученные ткани яичек были обработаны для анализа спермы и полного антиоксидантного профиля яичек, обработанных HU , путем анализа на супероксиддисмутазу (SOD), каталазу (CAT) и глутатион (GSH), глутатионредуктазу (GSR), глутатионпероксидазу. (GSH-Px) и тиобарбитурические реактивные виды (TBARS). Результаты . Продолжительное лечение 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день HU в течение 60 дней вызывало дозозависимое снижение веса с наиболее значительным (p <0.001) эффект, зарегистрированный с максимальной дозой HU . Напротив, значительное (p <0,001) увеличение было зарегистрировано для GSI при той же дозе HU . Кломифен и HU также вызывали значительное (p <0,01, p <0,001) дозозависимое увеличение общего количества сперматозоидов,% живых сперматозоидов, но обратное влияние на% мертвых сперматозоидов и% аномальных сперматозоидов. Что касается гормонального фона, пероральное лечение экстрактом 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день вызывало глубокую депрессию (p <0,05, p <0.01 и p <0,001) дозозависимое увеличение сывороточного TS, LH и FSH, хотя это вызывало обратный эффект на сывороточный ПРЛ, но не вызывало значительных изменений в сывороточных уровнях ES. Точно так же пероральное лечение витамином С и 100-400 мг / кг / день HU индуцировало значительное (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) повышение активности антиоксидантных ферментов. Заключение. В целом, длительное пероральное лечение 100-400 мг / кг массы тела HU в течение 60 дней значительно улучшило функцию сперматозоидов, что было опосредовано усилением сперматогенеза, стероидогенеза и антиоксидантных механизмов.

1. Общие сведения

Бесплодие — серьезная проблема общественного здравоохранения, затрагивающая каждую пятую супружескую пару во всем мире, причем примерно 30% заболеваний обусловлены мужскими факторами [1]. Зарегистрировано, что несколько факторов могут влиять на процесс сперматогенеза и снижать количество и качество сперматозоидов, причем некоторые из идентифицируемых причинных факторов включают ишемическую болезнь сердца, сахарный диабет, хронические заболевания печени, курение сигарет, агрохимические стоки, загрязнители воздуха, и гиповитаминоз [2].Однако в предыдущем исследовании сообщалось, что регулярный прием антиоксидантов и витаминов, таких как витамины A, B, C и E, улучшает стабильность гематоэнцефалического барьера яичек и защищает ДНК сперматозоидов от эндогенного окислительного стресса, возникающего в результате активности высокоактивных свободных радикалов, образующихся в организме. тело [3].

Мужское бесплодие может проявляться в виде преждевременной эякуляции, гипоактивной сексуальности, эректильной дисфункции, олигоспермии, азооспермии, и т.д. ., Но наиболее частой формой его проявления является олигоспермия.При лечении этого состояния часто в клинических условиях используются тестостерон и другие формы заместительной гормональной терапии из-за их способности стимулировать / усиливать сексуальный аппетит у пациентов мужского пола с гипогонадизмом [4, 5]. Однако, несмотря на доказанную эффективность этой заместительной терапии в лечении гипоактивного полового влечения [6], многие пациенты по-прежнему предпочитают использовать натуральные растения из-за сопутствующих нежелательных побочных эффектов, связанных с этими гормональными методами лечения. Двумя примерами популярных трав, способствующих мужской фертильности, являются Panax spp.(женьшень) и Lepidium meyenii (Maca), которые известны своим предполагаемым действием по усилению афродизиака и сперматогенеза [7–9].

Hunteria umbellata (K. Schum.) Hallier f., Принадлежащее к семейству Apocynaceae, — дерево тропических лесов, которое обычно используется в африканской фольклорной медицине для лечения таких заболеваний человека, как дефицит крови, инфекции, опухоли, сахарный диабет. и ожирение [10–12]. Он известен как «Demouain» (по-французски) и «Abeere» (на диалекте йоруба) (юго-запад Нигерии) [11–13].В юго-западном регионе Нигерии водный настой высушенных семян Hunteria umbellata широко используется для местного лечения сахарного диабета и ожирения [12, 14]. Экстракт водных семян Hunteria umbellata ( HU ) растения, как сообщается, использовался для эффективного контроля концентрации глюкозы в крови и гликозилированного гемоглобина в моделях 1 и 2 типов лекарственно-индуцированных гипергликемических крыс линии Wistar [12, 14] с его содержанием алкалоидов. причастны к наблюдаемому биологическому эффекту [15].Тот же экстракт семян растений, как сообщалось, обладал эффектом против ожирения и антигиперлипидемическим действием в экспериментальных моделях гиперлипидемии, которая опосредовалась de novo ингибированием биосинтеза холестерина и триглицеридов [16]. Кроме того, исследования острой, хронической и обратной пероральной токсичности HU показали, что он относительно безопасен [12, 17].

Недавнее этноботаническое исследование, проведенное среди избранных практикующих травников Иджебу в штате Огун (юго-запад Нигерии), показало, что HU также широко применяется в борьбе с бесплодием у коренных народов (неопубликованные данные).Несмотря на это фольклорное использование, нет никаких научных отчетов, подтверждающих или опровергающих это фольклорное утверждение. Более того, исследования хронической пероральной токсичности и обратимости токсичности HU показали, что он вызывает глубокую пролиферацию сперматогенных примордиальных клеток, клеток Сертоли и Лейдига в тканях яичек крыс, получавших экстракт [17]. Аналогичным образом, HU , как сообщается, обладает антиоксидантными и улавливающими свободные радикалы свойствами, опосредованными, прежде всего, содержанием в нем алкалоидов [18].Таким образом, это исследование было разработано для оценки эффектов хронического перорального лечения 100, 200 и 400 мг / кг HU на массу тела, гонадосоматический индекс и параметры спермы самцов крыс Wistar, получавших лечение в течение 60 дней. Кроме того, влияние перорального лечения HU на всю систему антиоксидантных ферментов [супероксиддисмутаза (SOD), каталаза (CAT) и глутатион (GSH), глутатионредуктаза (GSR), глутатионпероксидаза (GSH-Px) — и тиобарбитурические реактивные формы) (TBARS)] обработанных яичек крыс, а также его влияние на сывороточный тестостерон (TS), лютеинизирующий гормон (LH), фолликулостимулирующий гормон (FSH), пролактин (PRL) и эстрадиол (ES).

2. Методы
2.1. Сбор и идентификация растительного материала

После того, как идентификация растений и сдача ваучерных образцов были выполнены, как ранее описано Адени и Адейеми [12], восемь (8) спелых плодов Hunteria umbellata были недавно собраны из лиственных лесов района Одорасаньин в Иджебу. -Игбо в штате Огун, Нигерия, июль-август 2016 года. Собранные плоды были разрезаны на кусочки, а их свежие семена обильно промыты под проточной водой и высушены на воздухе при комнатной температуре (° C) в течение 1 месяца. , в защищенном от прямых солнечных лучей и тепла.Высушенные семена измельчали ​​с использованием лабораторной молотковой мельницы в отделении фармакогнозии фармацевтического факультета Университета Лагоса, Иди-Араба, Лагос. Измельченный образец хранили в водонепроницаемом и герметичном контейнере и хранили при 4 ° C.

2.2. Процесс водной экстракции

50 г измельченных семян Hunteria umbellata замачивали в 500 мл дистиллированной воды и выдерживали в холодильнике в течение 72 часов. Раствор повторно перемешивали с использованием магнитной мешалки в течение 6 часов, прежде чем его фильтровали через стерилизованную фильтровальную воронку с белым носовым платком.Полученный фильтрат затем полностью сушили на воздухе в вентилируемой печи, предварительно настроенной на 40 ° C, с получением темно-коричневого твердого осадка со сладким запахом ( HU ). Эту процедуру повторяли еще 9 раз, и остатки собирали в водо- и воздухонепроницаемый контейнер и хранили в морозильной камере при -4 ° C, чтобы предотвратить разложение HU.

2.3. Экспериментальные животные

После получения институционального этического разрешения на использование экспериментальных животных тридцать шесть самцов крыс линии Wistar в возрасте от 12 до 14 недель весом от 220 до 250 г были получены из Bayo Farms, Sango-Otta, Ogun State, Нигерии и размещены в Доме животных Медицинского колледжа государственного университета Лагоса для акклиматизации в течение 14 дней.Во время акклиматизации крыс кормили стандартным кормом для крыс и водопроводной водой ad libitum и поддерживали в стандартных лабораторных условиях (периодичность свет-темнота 12/12 часов, температура: 23-26 ° C и относительная влажность 40-50%). предписано Национальным институтом здравоохранения США [19]. За два дня до начала эксперимента на животных крысы были случайным образом разделены на 6 групп по 6 крыс в каждой экспериментальной группе таким образом, чтобы различия в весе внутри и между экспериментальными группами не превышали ± 20% от среднего веса выборочной популяции крыс, соответственно. .

2.4. Обработка крыс

Тридцать шесть (36) самцов крыс линии Wistar с доказанной фертильностью были случайным образом разделены на 6 групп по 6 животных в каждой, и их пероральное лечение для каждой группы было следующим: Группа I: 10 мл / кг дистиллированной воды / день в течение 60 дней. Группа II: 0,3 мг / кг / день кломифена в дистиллированной воде в течение 60 дней. Группа III: 100 мг / кг / день HU в дистиллированной воде в течение 60 дней. Группа IV: 200 мг / кг / день HU в дистиллированной воде в течение 60 дней. Группа V: 400 мг / кг / день HU в дистиллированной воде в течение 60 дней.Группа VI: 20 мг / кг / день витамина С в дистиллированной воде в течение 60 дней.

2,5. Измерение массы тела

Массу тела крыс измеряли с использованием цифровых весов Mettler, и полученные значения записывали за день до начала эксперимента, каждые две недели в течение периода лечения и в последний день эксперимента.

2.6. Расчет гонадосоматического индекса (GSI)

Семенники и их хвостовой придаток яичка были идентифицированы, удалены, взвешены и немедленно зафиксированы в растворе Буэна для морфометрического исследования.Гонадосоматические показатели рассчитывались следующим образом: масса семенников ÷ масса тела} x 100 [20]

2.7. Гормональные анализы

Уровень тестостерона в сыворотке определяли радиоиммуноанализом (РИА). Анализы выполняли с использованием имеющихся в продаже наборов (Diagnostic Products Company, Лос-Анджелес, Калифорния, США). Все образцы были проанализированы за один и тот же период анализа. Вариация внутри анализа составляла 5,5%, в то время как чувствительность анализа тестостерона составляла 8 нг / мл. Уровни сывороток FSH, LH, PRL и ES измеряли с помощью иммунорадиометрического анализа (IRMA) в твердой фазе, также используя коммерчески доступные наборы (Diagnostic Products Company, Лос-Анджелес, Калифорния, США).

2.8. Приготовление образца спермы для анализа

На 61 день крыс умерщвляли вдыханием диэтилового эфира и делали продольный хирургический разрез вдоль шва мошонки и перегородки мошонки для обнажения яичек и их придатка яичка. Эпидидимис был освобожден от прилипшего жира и соединительной ткани. Левый придаток яичка собирали, взвешивали и разрезали на дистальном конце чистым хирургическим лезвием. Хвостовик придатка яичка (100 мг) осторожно измельчали ​​стеклянной палочкой, не повреждая ткань, до 5 мл 0.9% NaCl [21].

2.9. Анализ спермы на подвижность, подсчет и морфологию

Полный анализ спермы для определения прогрессивной подвижности, подсчета и морфологии был проведен в чистой счетной камере гемоцитометра Нойбауэра под покровным стеклом с использованием метода Аммана [21].

Количество сперматозоидов на хвостовой придаток яичка рассчитывали следующим образом: Среднее количество x 50} ÷ 0,01 x 0,01}

2,10. Оценка уровней пониженного глутатиона в яичках

При определении уровня GSH в яичках гомогенат тестикулярной ткани составляет 0.1М фосфатный буфер при pH 7,4 обрабатывали по методике, описанной Shaik и Mehvar [22].

2.11. Оценка активности SOD и CAT в ткани яичка

Активность SOD и CAT в ткани яичка оценивали с использованием метода Zhang et al. [23] и Ивасе и др. . [24] соответственно.

2.12. Анализ данных

Полученные данные представлены в виде среднего значения ± S.E.M. из шести наблюдений. Данные были проанализированы статистически с использованием одностороннего дисперсионного анализа по системе SYSTAT 10.6. Апостериорный тест проводился с использованием t-критерия Стьюдента, и уровни значимости учитывались при p <0,05, p <0,01 и p <0,001.

3. Результаты
3.1. Водная экстракция

Водная экстракция измельченных высушенных семян Hunteria umbellata давала темно-коричневый, сладко пахнущий твердый остаток весом в среднем 7,33 ± 0,32 г с процентным выходом 14,66 ± 0,65%.

3.2. Влияние перорального лечения кломифеном, витамином С и экстрактом семян воды
Hunteria umbellata на массу тела крысы

Повторные пероральные обработки с использованием 100-400 мг / кг / день HU индуцировали значительное (p <0.05, p <0,01 и p <0,001) связанное с дозой уменьшение в модели набора веса обработанных крыс, эффективное от дня до дня перорального лечения, по сравнению с характером увеличения веса крыс, получавших витамин С и кломифен, в течение такой же период лечения. Наиболее значительное (p <0,001) снижение веса наблюдалось при дозе 400 мг / кг / день HU в день (таблица 1). Однако ежедневное пероральное введение 0,3 мг / кг / день кломифена в течение 60 дней вызывало устойчивое и последовательное увеличение массы тела обработанных крыс с наиболее значительным (p <0.001) увеличение зарегистрировано на 60-е сутки (Таблица 1). Об аналогичном эффекте сообщалось для 20 мг / кг / день витамина С (таблица 1).

значимое уменьшение при p
I = 10 мл / кг / сутки дистиллированной воды.
II = 0,3 мг / кг / день кломифена, растворенного в дистиллированной воде.
III = 100 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
IV = 200 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
V = 400 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
VI = 20 мг / кг / день витамина С, растворенного в дистиллированной воде.
3 день день день 901 45 12,7270 27170 239,20 ± 16,90 9018 27170 27170 315,30 ± 13,7 61 9018 24170 24170 248 VI

Группы Средняя масса тела (г) на следующих этапах:
день День 60

I 227.80 ± 12,95 229,80 ± 11,58 240,70 ± 9,11 260,70 ± 8,54 290,50 ± 11,90
II 229,70 ± 13,37 229,70 ± 13,37 239,20 ± 16,90
III 226,80 ± 12,16 231,80 ± 10,94 241,00 ± 9,80 256,30 ± 5,13 280,00 ± 9,42
254,50 ± 11,29 264,80 ± 13,08 279,20 ± 14,95
V 225,00 ± 14,52 226,70 ± 12,45 234,00 ± 13,4 9018 9018
225,00 ± 15,67 240,50 ± 13,32 259,50 ± 9,9 282,20 ± 6,7 307,80 ± 5,7

3.3. Влияние перорального лечения 100-400 мг / кг / день экстракта семян воды
Hunteria umbellata на вес яичек (TW) крыс и гонадосоматические показатели (GSI)

Повторное пероральное введение 100, 200 и 400 мг / сут. кг HU индуцировал дозозависимое увеличение веса яичек и GSI обработанных крыс со значительным увеличением (p <0,001), зарегистрированным для крыс, получавших 400 мг / кг / день HU (таблица 2). Такие же эффекты были зарегистрированы у крыс, получавших кломифен и витамин С (таблица 2).

III00 ± 09,42 ± 0,34

Группы Средний вес крысы в ​​день 60 (г) TW (г) SGI (x10 ) 90 −1
I 290,50 ± 11,90 03,51 ± 0,32 12,07 ± 0,66
II 04,27 ± 13,50 ± 0,8
03,37 ± 0,20 12,01 ± 0,32
IV 279,20 ± 14,95 03,36 ± 0,27 12,04 ± 0,34
V
V 3 3 3 1 16,21 ± 0,8
VI 307.80 ± 5,78 04,04 ± 0,1 13,05 ± 0,3

и представляет собой значительное увеличение при p
кг / день дистиллированной воды.
II = 0,3 мг / кг / день кломифена, растворенного в дистиллированной воде.
III = 100 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
IV = 200 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
V = 400 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
VI = 20 мг / кг / день витамина С, растворенного в дистиллированной воде.
3.4. Влияние перорального приема 100-400 мг / кг / день
Hunteria umbellata Water Seed Extract на параметры спермы крыс

Повторяющееся ежедневное пероральное введение 100 мг / кг / день, 200 мг / кг / день и 400 мг / кг / день HU в течение 60 дней при анализе спермы показал значимое (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) дозозависимое увеличение общего количества сперматозоидов у обработанных крыс с наиболее значимым (p <0,001 ) повышение, зарегистрированное у крыс, получавших самую высокую дозу (400 мг / кг / день) экстракта, которая была сопоставима с таковой, зарегистрированной для стандартного лекарственного средства (0.3 мг / кг / день кломифена) (Таблица 3). Аналогичная картина была также зарегистрирована для количества подвижных сперматозоидов (таблица 3). Однако HU оказал обратный эффект на% мертвых сперматозоидов и% аномальных количеств сперматозоидов (Таблица 3), в то время как 0,3 мг / кг / день кломифена вызвали значительное (p <0,001) увеличение% аномального количества сперматозоидов по сравнению с необработанные контрольные (группа I) крысы (таблица 3).

9018 мертвых сперматозоидов

Группы Всего сперматозоидов / г cauda epi (x10 7 %)

I 29.58 ± 0,55 77,03 ± 0,56 22,97 ± 0,56 08,97 ± 0,41
II 50,85 ± 1,01 87,23 ± 1,4 12,77 ± 1,4 0,870 III 31,68 ± 0,55 78,55 ± 0,40 21,45 ± 0,40 19,12 ± 0,1
IV 37,93 ± 0,7 79,27 ± 0,62 20,73 ± 0,62 9018 47.38 ± 0,8 87,17 ± 1,3 16,83 ± 1,3 07,67 ± 0,9
VI 31,70 ± 1,03 78,22 ± 0,38 21,78 ± 0,38 10,86 ± 0,4
и представляют собой значительное увеличение при p и представляют собой значительное уменьшение при p
I = 10 мл / кг / день дистиллированной воды.
II = 0,3 мг / кг / день кломифена, растворенного в дистиллированной воде.
III = 100 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
IV = 200 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
V = 400 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
VI = 20 мг / кг / день витамина С, растворенного в дистиллированной воде.
3.5. Влияние перорального лечения 0,3 мг / кг / день кломифена и 100-400 мг / кг / день экстракта семян воды
Hunteria umbellata на сыворотки крыс TS, LH, FSH, PRL и ES

Повторное пероральное лечение 0 .3 мг / кг / день кломифена приводили к значительному (p <0,001) увеличению уровней TS, LH и FSH в сыворотке по сравнению с необработанными контрольными значениями (группа I) (таблица 4). Однако кломифен в дозе 0,3 мг / кг / день значительно (p <0,05) снижал уровень ES в циркулирующей сыворотке по сравнению со значениями группы I (таблица 4). Аналогичным образом, повторные обработки ступенчатыми пероральными дозами HU в течение 60 дней приводили к значительному (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) дозозависимому увеличению уровней TS, LH и FSH в циркулирующей сыворотке, в то же время приводя к значительному (р <0.05) снижение сывороточного ПРЛ по сравнению со значениями необработанного контроля (группа I) (таблица 4). Однако не было никаких значительных изменений в уровнях ES в сыворотке между группами лечения и необработанной контрольной группой (таблица 4).

2,13 ± 0,07 0,70 ± 0,1700

Группы TS (нг / мл) LH (нг / мл) мл / мл) ES (нг / мл)

I 02.53 ± 0,04 0,66 ± 0,03 02,32 ± 0,04 03,14 ± 0,19 2,40 ± 0,06
II 05,87 ± 0,6 01,47 ± 0,4 03,06 ± 0,0 03,06 ± 0,0
III 04,04 ± 0,1 00,83 ± 0,0 02,66 ± 0,0 02,82 ± 0,10 2,37 ± 0,04
IV 02,76 ± 0,0 02,42 ± 0,17 2,46 ± 0,10
В 06,39 ± 0,3 01,42 ± 0,0 03,25 ± 0,1 02,32 ± 0,03 2,13 VI 02,59 ± 0,03 00,64 ± 0,02 02,29 ± 0,03 02,90 ± 0,30 2,28 ± 0,04

представляет собой значительное снижение при p
I = 10 мл / кг / сутки дистиллированной воды.
II = 0,3 мг / кг / день кломифена, растворенного в дистиллированной воде.
III = 100 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
IV = 200 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
V = 400 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
VI = 20 мг / кг / день витамина С, растворенного в дистиллированной воде.
3.6. Влияние перорального лечения 0,3 мг / кг / день кломифена и 100-400 мг / кг / день экстракта семян воды
Hunteria umbellata на SOD, CAT и TBARS ткани яичек крыс

Повторные пероральные обработки 0,3 мг Кломифен / кг / день не оказывал значительного (p> 0,05) изменения активности SOD, CAT и TBARS в тканях яичек по сравнению с необработанными контрольными значениями (группа I) (таблица 5). Однако повторное ежедневное пероральное лечение 100-400 мг / кг / день HU вызывало значительный (p <0.05 и p <0,001) дозозависимое увеличение уровней SOD, CAT и TBARS в тканях яичек по сравнению с необработанными контрольными (Группа I) и обработанными кломифеном (Группа II) значениями (Таблица 5). Точно так же пероральное лечение витамином C в дозе 20 мг / кг / день имело аналогичные эффекты на SOD, CAT и TBARS ткани яичек, зарегистрированные для крыс, получавших 400 мг / кг / день HU (таблица 5).


70 мг / TBAR ) ± 0,08

Группы SOD
(U / мг белка)
CAT
(U / мг белка)

I 05.48 ± 0,11 20,77 ± 0,20 13,46 ± 0,06
II 05,37 ± 0,11 20,42 ± 0,19 13,45 ± 0,07
III 0,170 13,36 ± 0,08
IV 06,00 ± 0,0 21,37 ± 0,2 13,97 ± 0,0
V 06,25 ± 0,0 22,74 ± 0,0 3 70 06.92 ± 0,0 23,51 ± 0,1 16,89 ± 0,0

и представляют собой значительное увеличение при p
I = 10 мл / кг / день дистиллированной воды.
II = 0,3 мг / кг / день кломифена, растворенного в дистиллированной воде.
III = 100 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
IV = 200 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
V = 400 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
VI = 20 мг / кг / день витамина С, растворенного в дистиллированной воде.
3.7. Эффект перорального лечения 100-400 мг / кг / день экстракта
Hunteria umbellata водных семян на ткань яичек крыс GSH, GSH-Px и GSR

Обработка 100-400 мг / кг / день HU вызвала значимые (p <0,05, p <0,01 и p <0,001) дозозависимые уровни GSH, GSH-Px и GSR в ткани яичка по сравнению с необработанным контролем (Группа I) и обработанными кломифеном (Группа II) значениями (Таблица 6) .Однако значения, полученные для 400 мг / кг / день HU , были сопоставимы со значениями, зарегистрированными для крыс, получавших витамин С (Таблица 6). Также стоит отметить, что лечение кломифеном 0,3 мг / кг / день не вызывало серьезных изменений (p> 0,05) в уровнях GSH, GSH-Px и GSR в тканях яичек (Таблица 6).

83

Группы GSH
( μ M / г ткани)
902 GSH-Px
0 (nM / nM) / мин / мг белка)

I 0.36 ± 0,02 140,00 ± 1,09 207,00 ± 2,05
II 0,35 ± 0,02 137,60 ± 1,61 203,20 ± 1,28
III 0,4018 1,070 204,40 ± 1,80
IV 0,59 ± 0,0 143,30 ± 0,5 215,00 ± 2,2
V 0,69 ± 0,0 144,10 ± 0,1 0.76 ± 0,0 148,10 ± 0,6 230,60 ± 1,7

и представляют собой значительное увеличение при p
I = 10 мл / кг / день дистиллированной воды.
II = 0,3 мг / кг / день кломифена, растворенного в дистиллированной воде.
III = 100 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
IV = 200 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
V = 400 мг / кг / день водного экстракта семян Hunteria umbellata , растворенного в дистиллированной воде.
VI = 20 мг / кг / день витамина С, растворенного в дистиллированной воде.
4. Обсуждение

Бесплодие — это неспособность пары противоположного пола достичь клинической беременности после 52 недель или более регулярных незащищенных половых контактов. Другими словами, это полная неспособность сексуально компетентной и активной, не способной к контрацепции пары забеременеть через один или несколько лет, несмотря на регулярные сексуальные контакты [25].Последние эпидемиологические данные показали, что примерно 15% супружеских / не состоящих в браке пар страдают бесплодием, из которых только 40-50% случаев связаны с мужским бесплодием [26], которое само может быть связано либо с азооспермией, либо с эректильной дисфункцией [27]. Определяемые факторы (обратимые / необратимые), влияющие на мужскую фертильность, как сообщалось в предыдущих исследованиях, включают лекарственные препараты (такие как анаболические стероиды, замещающий тестостерон и опиаты), варикоцеле яичек, неопущение яичек, инфекции мочевыводящих путей, опухоль яичек, гормональный дисбаланс, преждевременную или ретроградную эякуляцию. , длительное тепловое воздействие, ожирение, пожилой возраст, курение сигарет, алкоголь, тяжелые металлы, пестициды, окислительный стресс, генетические факторы и различные факторы окружающей среды и питания [28–34].Таким образом, при лечении мужского бесплодия планы лечения разрабатываются с учетом идентифицируемой возможной причины, и эти вмешательства могут быть либо медицинскими, либо хирургическими [27, 35].

Помимо традиционного лечения бесплодия, бесплодные пары, как известно, одновременно используют традиционную / дополнительную медицину в качестве терапевтической альтернативы своему бесплодию, поскольку 25% современных лекарств либо растительного, либо растительного происхождения [36]. Более того, до 80% населения мира частично или полностью зависит от растительных продуктов для лечения своих заболеваний [37].Однако при оценке фармакологической активности лекарственных растений, повышающих мужскую фертильность, проводятся научные исследования моделей in vitro (с использованием линий культуральных клеток) и in vivo (с использованием экспериментальных животных и людей). Например, экстракты, полученные из Vanda tessellata [38], Turnera diffusa и Pfaffia paniculata [39], Eurycoma longifolia [40], Terminalia catappa [41], Butea frondosa [42] , Curculigo orchioides [43], Panax quinquefolius (женьшень) [44] и Lepidium meyenii были исследованы и, как сообщалось, усиливают действие афродизиаков, в то время как экстракты, полученные из Astragalusmbranaceus, Asparagus racemosraphus, Withania spp. , и Acanthopanax senticosus , как сообщалось, также улучшают параметры сперматозоидов [45, 46].

В этом исследовании мы оценили возможное повышение фертильности и механизм действия HU у самцов крыс Wistar в течение 60 дней в качестве альтернативы / дополнения к существующим препаратам, повышающим фертильность, с учетом их высокой стоимости и связанных с ними нежелательных побочных эффектов. с их клиническим применением. При этом самцам крыс Wistar вводили через желудочный зонд дифференцированные дозы (100, 200 и 400 мг / кг / день) HU самцам крыс Wistar в течение 60 дней подряд с использованием таких конечных точек, как соматогонадальный индекс, параметры анализа спермы и гонадный гормон. профиль, а также антиоксидантный профиль тестикулярной ткани.

Гормональный анализ крыс, получавших HU , четко показал, что экстракт значительно улучшает циркулирующие сыворотки TS, FSH и LH, в то же время уменьшая циркулирующий пролактин. Литература показала, что повышение уровня тестостерона, ФСГ и ЛГ в сыворотке улучшает качество сперматозоидов в зависимости от количества, объема, подвижности и морфологии сперматозоидов [43]. Известно, что ФСГ и ЛГ влияют на судьбу половых клеток, и это влияние опосредуется их действием на специфические трансмембранные рецепторы, рецептор фолликулостимулирующего гормона (ФСГ-Р) и рецептор лютеинизирующего гормона (ЛГ-Р), которые явно выражаются в Клетки Сертоли и интерстициальные клетки Лейдига соответственно [47–50].Имеется множество научных доказательств критической роли сигнального пути ЛГ-тестостерона в праймировании и поддержании процесса сперматогенеза во внетубулярных клетках Лейдига, в то время как ФСГ регулирует сперматоцитогенез и сперматогенез, влияя как на зародышевый эпителий, так и на клетки Сертоли [51, 52]. Таким образом, взаимодействие ФСГ, ЛГ и тестостерона сильно влияет на количественный и качественный сперматогенез. В этом исследовании повторное пероральное лечение 100-400 мг / кг / день HU стимулировало значительный сперматогенез, который характеризовался увеличением объема и количества сперматозоидов, прогрессирующей подвижностью и улучшением морфологии сперматозоидов.Это улучшение качества спермы могло быть связано с улучшением стероидогенеза, характеризующимся повышением циркулирующих TS, FSH и LH, которые, как широко сообщалось, усиливают сперматогенез [53]. Кломифен, подобный тамоксифену, является известным антиэстрогенным аналогом, который блокирует взаимодействие эстрогена с передней долей гипофиза, вызывая повышенный синтез ЛГ, ФСГ и ТС [54]. Таким образом, механизм повышения фертильности с помощью HU, по-видимому, аналогичен механизму кломифена.

Еще одним важным открытием этого исследования является незначительное изменение уровней циркулирующего пролактина в группах лечения.Физиологически пролактин подавляет секрецию ЛГ и ФСГ, что неизменно снижает уровни циркулирующего TS и снижает сексуальное влечение. Это утверждение полностью согласуется с повышенными уровнями ФСГ, ЛГ и ТС в группах, получавших HU . В предыдущих исследованиях сообщалось, что любое растение с потенциалом повышения афродизиака / мужской фертильности часто значительно снижает сывороточный ПРЛ и повышает уровни циркулирующих ЛГ и ФСГ и, соответственно, увеличивает уровни циркулирующего ТС [55, 56], с чем наши результаты полностью согласуются.

Сообщалось, что лекарственные растения, богатые некоторыми вторичными метаболитами, такими как фенольные кислоты, флавоноиды, флавоны, алкалоиды и витамины-антиоксиданты (например, витамины A, C, D и E), стимулируют и усиливают сперматогенез [57–61]. Однако в наших предыдущих исследованиях сообщалось, что HU богато алкалоидами, флавоноидами, дубильными веществами и гликозидами [12]. Таким образом, относительное обилие этих фитохимических веществ могло быть ответственным за усиление сперматогенеза, наблюдаемое в этом исследовании.

Причина бесплодия примерно у 50% всех бесплодных пар полностью или частично связана с мужскими факторами, одним из факторов которых является окислительный стресс [62]. Избыточное производство свободных радикалов или активных форм кислорода (АФК) связано с повреждением сперматозоидов, и, как таковые, АФК широко изучались в этиологии мужского бесплодия. Супероксид-анион, гидроксильный радикал и перекись водорода являются одними из основных АФК, присутствующих в семенной плазме, и они участвуют в мужском бесплодии [63–66].В нормальных физиологических условиях сперматозоиды вырабатывают небольшое и незначительное количество АФК, и это важно для емкости сперматозоидов и акросомной реакции. Однако, когда генерация АФК является подавляющей, она может необратимо связываться с полиненасыщенными жирными кислотами, богатыми плазматической мембраной и цитоплазмой сперматозоидов, что приводит к перекисному окислению липидов и гибели клеток сперматозоидов [67].

Антиоксиданты, включая супероксиддисмутазу (SOD), каталазу и глутатионпероксидазу (GPX), часто высвобождают АФК, чтобы защитить сперматозоиды от вредного воздействия генерируемых АФК [68, 69].Сперма также содержит множество эндогенных неферментативных антиоксидантных молекул, таких как витамины A, C, D и E, пируват, глутатион и карнитин [70]. Эти антиоксиданты компенсируют потерю цитоплазматических ферментов сперматозоидов во время сперматогенеза, что, в свою очередь, снижает механизмы эндогенной репарации и ферментативную защиту [71–73]. Принимая во внимание установленную прямую взаимосвязь между фертильностью самцов и антиоксидантным статусом яичек, HU значительно улучшило антиоксидантный статус обработанных яичек крыс, о чем свидетельствуют повышенные уровни SOD, CAT, GSH, GSH-Px, GSR и TBARS, которые согласуются с нашими предыдущими открытиями in vitro [18] и in vivo [74] и недавно опубликованными Oboh et al .[10]. Таким образом, эти результаты ясно демонстрируют потенциал HU в значительном улучшении сперматогенных параметров за счет его антиоксидантного механизма. Кроме того, в литературе показано, что антиоксиданты улучшают различные окислительные процессы, включая сперматогенез и стероидогенез [68, 75], тем самым подтверждая наблюдаемые сперматогенные и стероидогенные эффекты HU у обработанных крыс, которые объясняются его высоким антиоксидантным профилем.

5. Заключение

В целом, длительное пероральное лечение 100-400 мг / кг / день HU в течение 60 дней значительно улучшило функцию сперматозоидов (по оценке подвижности, количества, жизнеспособности и морфологии сперматозоидов), опосредованного увеличением сперматогенез, стероидогенез и антиоксидантные механизмы.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, можно получить у соответствующего автора по запросу.

Конфликт интересов

Авторы не заявляют о конфликте интересов. Адеджувон Адевале Адени — профессор кафедры фармакологии, терапии и токсикологии факультета фундаментальных клинических наук Медицинского колледжа государственного университета Лагоса и главный исследователь настоящего исследования. Джозеф Абайоми Олагунджу — профессор кафедры медицинской биохимии факультета фундаментальных медицинских наук Медицинского колледжа государственного университета Лагоса и соисследователь этого исследования.Бабатунде Адекунле Муртала — главный технолог отделения физиологии факультета фундаментальных медицинских наук Медицинского колледжа государственного университета Лагоса и соисследователь настоящего исследования.

Вклад авторов

Адеджувон Адевале Адени задумал, разработал и провел исследование. Он также анализировал и интерпретировал данные и отвечал за написание рукописи. Бабатунде Адекунле Муртала проводил анализ спермы, а Джозеф Абайоми Олагунджу также участвовал в разработке дизайна исследования и интерпретации данных.

Благодарности

Авторы выражают благодарность за полную финансовую поддержку, предоставленную этой исследовательской работе через выделение средств Фонда исследований на базе учреждений TETFUND, второго () пакетного исследовательского проекта на цикл 2016 года. Наша исследовательская группа также благодарит за вклад проректора и руководства Государственного университета Лагоса (LASU) во главе с профессором Оланреваджу А. Фагбохун, а также сотрудника отдела LASU TETFUND, доктора Сураджа Мудасиру, за содействие и своевременное выделение средств. для этой исследовательской работы.В то время как исследовательская группа также должным образом благодарит персонал технической поддержки приюта для животных, LASUCOM, за уход за экспериментальным животным, использованным в период исследования, техническая поддержка г-на Сандей О. Аденекана из BIOLIFE CONSULTS в области Мы высоко ценим анализ окислительного стресса. Эта исследовательская работа была полностью спонсирована Федеральным правительством Нигерии через институциональный исследовательский грант Фонда высшего образования (TETFund).

Оценка фитохимической, антиоксидантной и улучшающей память активности Garuga pinnata Roxb.Кора и Bryophyllum pinnatum (Lam) Oken. Листья

Garuga pinnata Roxb. (Burseraceae) — дерево среднего размера, широко распространенное в тропических регионах Азии. Bryophyllum pinnatum (Lam) Окен. (Crassulaceae) — коренное и экзотическое растение, выращиваемое в тропических регионах. Оба растения использовались для их противовоспалительного, антиоксидантного, противоопухолевого, ранозаживляющего, противодиабетического действия и т.д. мощность и сохранение памяти у экспериментальных мышей наряду с количественной оценкой способности нейтрализации фенольных соединений и радикалов DPPH.Активность по улучшению памяти определялась методом приподнятого крестообразного лабиринта у мышей с амнезией, вызванной скополамином, с использованием пирацетама в качестве аллопатического препарата и шанхпушпи в качестве стандартных аюрведических препаратов. Две дозы (200 и 400 мг / кг перорально) обоих экстрактов вводили мышам в течение 8 дней подряд; Задержка передачи индивидуальной группы была записана через 45 минут, а память о пережитых вещах была исследована через 1 день. Для определения антиоксидантной активности и общего количества фенола, соответственно, использовали метод анализа DPPH и метод Фолина-Чокалтеу.400 мг / кг экстракта коры B. pinnatum в метаноле значительно улучшили память и обучение мышей с задержкой переноса (TL) 32,75 с, что сопоставимо со стандартным пирацетамом (21,78 с) и Шанхпушпи (27,83 с). Более высокое содержание фенолов было определено количественно в экстракте коры B. pinnatum (156,80 ± 0,33 µ г GAE / мг сухого экстракта), а также антиоксидантная активность (69,77% ингибирования свободных радикалов при концентрации 100 µ г / мл. ). Наше исследование провозгласило научное доказательство того, что оба растения улучшают память.

1. Введение

Память — это жизненно важный процесс, с помощью которого записываются переживания, которые можно использовать для адаптации их реакции к окружающей среде. Болезнь Альцгеймера (БА) является серьезным заболеванием, связанным с ухудшением памяти, и ее можно охарактеризовать как непрерывное нейродегенеративное заболевание, которое может приводить к старческой деменции, особенно в области коры головного мозга и гиппокампа. Помимо отчетливых клинических проявлений, поведенческие признаки включают прогрессирующую потерю памяти, нарушение способности суждения, проблемы с принятием решений, ориентацию в физической атмосфере и языковые проблемы [1].Исследования пациентов с БА выявили снижение уровня ацетилхолина в головном мозге [2]. Несмотря на то, что существует множество вариантов лечения для лечения БА, из-за отсутствия полной эффективности и побочных эффектов в настоящее время растет интерес к растительной медицине.

Шанкхпушпи — широко используемый растительный препарат для лечения когнитивных расстройств со времен Ачарьи Чарака (200 г. до н.э.) до наших дней [3]. Шанкхпушпи классифицируется как Медхья Расаяна, то есть эффективное тонизирующее средство для мозга согласно аюрведическим текстам.Согласно Аюрведической фармакопее Индии, целые части Convolvulus pluricaulis Choisy одобрены для использования в медицинских целях [4]. Основываясь на их способности лечить нарушения памяти и форму цветка, три других ботанических препарата, а именно Clitoria ternatea Linn., Canscora decussata Schult. И Evolvulus alsinoides Linn. также классифицируются индийскими практикующими как Шанкхпушпи [5]. Чаще всего он показан при тревоге, депрессии, психических заболеваниях, судорогах, бессоннице, жгучей боли, гиперлипидемии, осложнениях со стороны мочевыводящих путей и отеках.Сообщалось, что Шанхпушпи регулирует синтез адреналина и гидрокортизона из организма [4, 6]. Shankhpushpi увеличивает количество ацетилхолина в области гиппокампа в зависимости от введенной дозы, которая может способствовать его активности по улучшению памяти [7]. Нейтрализация нейротоксических свободных радикалов наряду с усилением разрастания нейритов также играет важную роль в этом эффекте [8, 9].

Bryophyllum pinnatum (Crassulaceae) широко распространен в тропических и субтропических регионах по всему миру.Надземные части или все растение можно использовать для лечения гипертонии, сифилиса, желтухи, кандидоза, дисменореи, судорог и т. Д. Многие биологически активные соединения, такие как бриотоксин A, B, C, кофейная кислота и протокатеховая кислота, были обнаружены из этого растения [10], которые проявляют различные активности, такие как антиоксидантная, противоязвенная, анальгезирующая активность [11]; противоуролитиаз; и так далее [12].

Garuga pinnata (Burseraceae) — лиственное растение, произрастающее в Индии, а также в восточной и южной частях Азии.Сообщалось, что экстрактов G. pinnata обладают противоязвенной, противоопухолевой, антибактериальной, противодиабетической и антиоксидантной активностью [13]. Этномедицински, в Непале, отвар из листа B. pinnatum и коры G. pinnata используется этническими группами общины тару для улучшения памяти. Однако нет никаких научных доказательств этого этномедицинского утверждения. Таким образом, наше исследование в основном сосредоточено на изучении эффекта улучшения памяти этих двух растений наряду с их антиоксидантной активностью.

2. Материалы и методы
2.1. Химические вещества

Используемые химические вещества: пирацетам и скополамина гидробромид (Asian Pharmaceuticals, Непал), Shankhpushpi (Bhagvati Herbal and Healthcare Private Limited, Индия), аскорбиновая кислота (Merck), DPPH (Sigma-Aldrich), бикарбонат натрия (Fisher Scientific), соляная кислота, хлорид ртути, хлорид калия, хлорид железа, ацетат свинца и лента кагния (SD fine-chem limited).

2.2. Сбор и экстракция растений

г.pinnata и B. pinnatum были собраны в Боадгоу, Капилвасту, Непал (27,5518 ° с.ш., 83,0469 ° в.д., высота 107 м от уровня моря) в течение сентября 2019 г. и идентифицированы Национальными лабораториями гербариев и растений Непала. Ваучерные образцы растений были депонированы в лаборатории фармакогнозии Crimson College of Technology (CCT-HRB-075-187 ( G. pinnata ) и CCT-HRB-075-188 ( B. pinnatum )). . Кора и листья обоих растений были высушены в тени; измельчали ​​до тонкого порошка и экстрагировали путем тройной мацерации с использованием метанола в качестве менструального цикла.Экстракты сушили с помощью роторного вакуумного испарителя при 45 ° C и получали липкий высушенный экстракт, который далее хранили при 4 ° C до использования.

2.3. Фитохимический скрининг

Предварительный скрининг на наличие вторичных метаболитов в образце проводился с использованием ранее описанных методов с небольшими модификациями [14–16].

2.4. Общее содержание фенола (TPC)

Для определения TPC был принят метод Фолина – Чокальте [17].TPC рассчитывали по калибровочной кривой галловой кислоты и выражали в виде мкл эквивалента г галловой кислоты (GAE) / мг экстрактов.

2,5. Измерение антиоксидантной активности

Способность растительных экстрактов нейтрализовать свободные радикалы DPPH определялась ранее установленным методом [18]. Этанол и аскорбиновая кислота использовались в качестве холостого и стандартного образцов соответственно. Процент улавливания радикалов рассчитывали по следующему уравнению:

Здесь A 0 обозначает поглощение раствора DPPH, а A 1 обозначает поглощение исследуемого образца.

2.6. Этическое одобрение животных и исследования острой токсичности

Самцов и самок швейцарских мышей-альбиносов (25–30 г) помещали в полипропиленовые клетки со стандартным кормом и водой ad libitum. Обращение с животными, уход и план экспериментов проводились в соответствии с руководящими принципами Институционального комитета по обзору, Совет по исследованиям в области здравоохранения Непала (Ref. № 622/2019). Подопытные животные акклиматизировались в течение двух недель перед экспериментальными процедурами [19–21]. Рекомендации Организации экономического сотрудничества и развития были использованы для изучения острой токсичности у экспериментальных животных [22].

2.7. Деятельность по улучшению памяти
2.7.1. Метод приподнятого крестообразного лабиринта

Приподнятый крестообразный лабиринт и амнезия, вызванная скополамином, использовались для дизайна экстероцептивного и интероцептивного поведения соответственно, чтобы контролировать когнитивные способности и сохранение памяти, в соответствии с ранее разработанным методом с небольшими изменениями [23 ].

Был использован приподнятый крестообразный лабиринт, имеющий 2 открытых рукава (16 × 5 см), 2 закрытых рукава (16 × 5 × 12 см), поднятых вертикально на высоту 25 см.Отдельные экспериментальные животные содержались у края открытого рукава, обращенного далеко от среднего рострума; затем отмечали общую продолжительность движения от края открытой руки к обеим закрытым руками с использованием всех ног (время ожидания передачи, TL). Те животные, которым не удавалось проникнуть внутрь любой закрытой руки в течение 90 секунд, любезно подталкивались к закрытым рукавам, и TL считалось 90 секунд. Мышам разрешалось обыскивать лабиринт в течение следующих 10 с, а затем возвращаться в клетку. Память об этой опытной работе была исследована через 1 день после дня первоначального обследования.

Задержка передачи через 1 день была интерпретирована в терминах коэффициента перегиба (IR) с применением следующего уравнения: где L 0 — задержка передачи через 1 день, а L 1 — первая передача задержка выражается в секундах.

2.7.2. План эксперимента

Всего 48 мышей были разделены на 8 групп ( n = 6). Все группы, за исключением контроля с носителем (группа I), обрабатывали гидробромидом скополамина (0.4 мг / кг) внутрибрюшинно, на восьмой день лечения экстрактом / стандартным лекарственным средством для индукции амнезии. Латентность переноса регистрировалась через 45 минут, и память о пережитом оценивалась через 1 день в каждой классификации: (1) Группа I: контроль носителя (2) Группа II: контроль скополамина (3) Группа III: B. pinnatum листьев испытуемый образец (200 мг / кг) (4) Группа IV: испытуемый образец листьев B. pinnatum (400 мг / кг) (5) Группа V: испытуемый образец коры G. pinnata (200 мг / кг) (6 ) Группа VI: г.pinnata образец коры (400 мг / кг) (7) Группа VII: Шанхпушпи (5-кратное разведение) (8) Группа VIII: пирацетам (100 мг / кг)

2.8. Статистический анализ

Все данные были представлены в виде среднего ± стандартное отклонение. Средние различия между разными классами были рассчитаны с помощью одностороннего дисперсионного анализа (MS-Excel 2019) и считались значимыми, если.

3. Результаты
3.1. Экстракционный выход, фитохимический скрининг и общее содержание фенолов

Экстракционный выход метанольного экстракта г.pinnata коры и листьев B. pinnatum составляли 12,04 и 10,46% соответственно. Качественное фитохимическое исследование выявило наличие фенольных соединений, флавоноидов, дубильных веществ, сапонинов и алкалоидов. Общее количество фенола было определено количественно с использованием калибровочной кривой стандартной галловой кислоты (рис. 1) и интерпретировано как эквивалент галловой кислоты (GAE). Общее фенольное содержание листьев B. pinnatum и коры G. pinnata составило 27.782 ± 0,25 и 156.80 ± 0,33 µ г GAE / мг сухого экстракта соответственно.


3.2. Антиоксидантная активность

Согласно таблице 1, нейтрализующая активность радикалов DPPH проявляется метанольным экстрактом коры G. pinnata (MGPB) (EC 50 50.14 μ г / мл ) и метанольным экстрактом B Экстракт листьев. pinnatum (MPBL) (EC 50 109.41 μ г / мл) показал, что они обладают умеренной антиоксидантной способностью по сравнению со стандартом аскорбиновой кислоты (EC 50 5.47 мк г / мл). Кроме того, активность зависит от используемой дозы. Способность MGBP нейтрализовать свободные радикалы выше, чем у MBPL.

76 ± 4,5

Конц. ( µ г / мл) MBPL Процент ингибирования
MGPB AA

0,1 17,69 ± 0,58
1 22,35 ± 0,11 28,74 ± 0,92 42,48 ± 3,51
10 23,83 ± 0,30 40,78 ± 0,67 47,42 ± 0,69 69,77 ± 0,43 95,25 ± 1,44

MBPL: метанольный экстракт листьев B. pinnatum , MGPB: метанольный экстракт G.кора pinnata и AA: аскорбиновая кислота. и при корреляции с MBPL (примечание: все тесты были выполнены в трех экземплярах).
3.3. Тест на острую токсичность

После непрерывного мониторинга перорального приема MBPL и MGPB в различных дозах (0,2, 0,4, 0,8 и 1 г / кг) был сделан вывод, что экстракты растений не обладают острой токсичностью.

3.4. Эффект улучшения памяти

Мы впервые проверили улучшающую память активность двух этномедицинских растений.Пероральный прием MBPL (200 мг / кг) в течение 8 дней подряд не дал заметного результата на TL, на 8 и 9 день, тогда как при более высокой дозе (400 мг / кг) он продемонстрировали невероятное снижение TL (,) на 8 и 9 день, что свидетельствует о значительном улучшении когнитивной способности и способности запоминания (Таблица 2 и Рисунок 2). Экстракт MGDP в обеих дозах проявлял заметно более высокую активность по улучшению памяти () на 8 и 9 день.Гидробромид скополамина (0,4 мг / кг, внутрибрюшинно), введенный в 8 и 9 дни, имеет высокий TL, что указывает на замедление когнитивных способностей и способности запоминания. Пероральное введение MBPL и MGPB в оптимальных дозах (200 и 400 мг / кг в течение 8 обычных дней) эффективно улучшало скополамин, вызывающий потерю памяти. Результаты, полученные с экстрактами растений, сопоставимы со стандартными пирацетамом и шанхпушпи. Однако Шанхпушпи показал лучшие результаты, чем все растительные экстракты.

2 (2009 г.).

CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 7.

    Haynes, B. F. et al. Иммуно-коррелятный анализ испытания эффективности вакцины против ВИЧ-1. N. Engl. J. Med. 366 , 1275–1286. https://doi.org/10.1056/NEJMoa1113425 (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 8.

    Gartland, A. J. et al. Анализ ассоциации HLA A * 02 с эффективностью вакцины в испытании вакцины против ВИЧ-1 RV144. J. Virol. 88 , 8242–8255. https://doi.org/10.1128/jvi.01164-14 (2014).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 9.

    Адеподжу П. Продолжаем неудачное клиническое испытание вакцины против ВИЧ. Ланцет ВИЧ 7 , e161. https://doi.org/10.1016/s2352-3018(20)30047-3 (2020).

    Артикул Google Scholar

  • 10.

    Визи Р.И Лакнер, А. Иммунная система слизистых оболочек и инфекция ВИЧ-1. AIDS Rev. 5 , 245–252 (2003).

    PubMed Google Scholar

  • 11.

    Kim, S.-H. И Янг, Ю.-С. Разработка вакцин для слизистых оболочек и для системной иммунной индукции и роли адъювантов. Clin. Exp. Vaccine Res. 6 , 15–21. https://doi.org/10.7774/cevr.2017.6.1.15 (2017).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 12.

    Ranasinghe, C. et al. Оценка стратегий первичной вакцинации против вируса оспы птиц и осповакцины для высокого уровня иммунитета слизистых оболочек и системного иммунитета против ВИЧ-1. Вакцина 24 , 5881–5895. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2006.04.023 (2006).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 13.

    Ranasinghe, C. et al. Прайм-буст иммунизация слизистых оболочек вирусом оспы ВИЧ-1 индуцирует высокоавидные CD8 + Т-клетки с зависимыми от режима профилями цитокинов / гранзимов B. J. Immunol. (Балтимор, Мэриленд: 1950) 178 , 2370–2379. https://doi.org/10.4049/jimmunol.178.4.2370 (2007).

    CAS Статья Google Scholar

  • 14.

    Беляков И. М., Алерс Дж. Д., Набель Г. Дж., Мосс Б. и Берзофски Дж. А. Генерация функционально активных ВИЧ-1-специфических CD8 + CTL в слизистой оболочке кишечника после слизистой, системной или смешанной первичной иммунизации. Вирусология 381 , 106–115.https://doi.org/10.1016/j.virol.2008.08.019 (2008).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 15.

    Ранасинге, С., Триведи, С., Виджесундара, Д. К. и Джексон, Р. Дж. Рецепторы IL-4 и IL-13: роль в иммунитете и мощные адъюванты вакцины. Cytokine Growth Factor Rev. 25 , 437–442. https://doi.org/10.1016/j.cytogfr.2014.07.010 (2014).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 16.

    Fujkuyama, Y. et al. Новые стратегии разработки вакцин для индукции иммунитета слизистых оболочек. Expert Rev. Vaccines 11 , 367–379. https://doi.org/10.1586/erv.11.196 (2012).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 17.

    Li, Z., Jackson, R.J. и Ranasinghe, C. Способ вакцинации может значительно изменить субпопуляции врожденных лимфоидных клеток: обратная связь между IL-13 и IFN-γ. npj Vaccines 3 , 10. https://doi.org/10.1038/s41541-018-0048-6 (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 18.

    Roy, S. et al. Вирусный вектор и способ введения определяют профили ILC и DC, ответственные за последующие вакцино-специфические иммунные исходы. Вакцина 37 , 1266–1276. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2019.01.045 (2019).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 19.

    Li, Z., Jackson, R.J. и Ranasinghe, C. Иерархическая роль IL-25 в развитии и функционировании ILC на слизистой оболочке легких после вакцинации вирусным вектором. Вакцина: X 2 , 100035. https://doi.org/10.1016/j.jvacx.2019.100035 (2019).

    CAS Статья Google Scholar

  • 20.

    Триведи, С., Джексон, Р. Дж. И Ранасинг, С. Различные вакцины и адъюванты на основе вирусов оспы ВИЧ могут индуцировать уникальные антиген-презентирующие клетки, которые модулируют авидность Т-лимфоцитов CD8. Вирусология 468–470 , 479–489. https://doi.org/10.1016/j.virol.2014.09.004 (2014).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 21.

    Рой, С., Лю, Х.-Й., Джейсон, М. И., Деймель, Л. П. и Ранасинг, К.Уникальная опосредованная IL-13Rα2 / STAT3 регуляция IL-13, обнаруженная в обычных дендритных клетках легких через 24 часа после вакцинации вирусным вектором. Sci. Реп. 10 , 1017. https://doi.org/10.1038/s41598-020-57815-z (2020).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 22.

    Ranasinghe, C. & Ramshaw, I. A. Стратегии генетической гетерологичной первичной буст-вакцинации для улучшения системного иммунитета и иммунитета слизистых оболочек. Expert Rev. Vaccines 8 , 1171–1181. https://doi.org/10.1586/erv.09.86 (2009 г.).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 23.

    Ранасинге, К., Триведи, С., Стамбас, Дж. И Джексон, Р.Дж. Уникальная стратегия вакцины против ВИЧ-1 на основе IL-13Ralpha2 для повышения иммунитета слизистых оболочек, авидности CD8 (+) Т-клеток и защиты иммунитет. Mucosal Immunol. 6 , 1068–1080. https://doi.org/10.1038 / mi.2013.1 (2013).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 24.

    Джексон, Р. Дж., Уорли, М., Триведи, С. и Ранасинг, С. Новая стратегия вакцинации антагониста IL-4R ВИЧ может индуцировать как Т-, так и В-клеточный иммунитет высокой авидности с большей защитной эффективностью. Вакцина 32 , 5703–5714. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2014.08.023 (2014).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 25.

    Хамид, М. А., Джексон, Р. Дж., Рой, С., Ханна, М. и Ранасинг, С. Неожиданное участие передачи сигналов IL-13 через независимый механизм STAT6 во время развития мышиного IgG2a после вирусной вакцинации. евро. J. Immunol. 48 , 1153–1163. https://doi.org/10.1002/eji.201747463 (2018).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 26.

    Khanna, M. et al. Слизистая и системная SIV-специфическая цитотоксическая иерархия CD4 + Т-клеток в защите после интраназальной / внутримышечной рекомбинантной вакцинации против оспы макак с косичками. Sci. Реп. 9 , 5661. https://doi.org/10.1038/s41598-019-41506-5 (2019).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 27.

    Juno, J. A. et al. Цитотоксические CD4 Т-клетки — друг или враг во время вирусной инфекции ?. Фронт. Иммунол. https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00019 (2017).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 28.

    Munier, C. M. L. et al. Первичный иммунный ответ на вакцинацию вирусом осповакцины включает клетки с отчетливым цитотоксическим эффекторным фенотипом Т-лимфоцитов CD4. Вакцина 34 , 5251–5261 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 29.

    Soghoian, D. Z. et al. ВИЧ-специфические цитолитические CD4-Т-клеточные ответы во время острой ВИЧ-инфекции позволяют прогнозировать исход заболевания. Sci. Пер.Med. 4 , 123–125. https://doi.org/10.1126/scitranslmed.3003165 (2012).

    CAS Статья Google Scholar

  • 30.

    Чен, З. и Джон Уэрри, Е. Т-клеточные ответы у пациентов с COVID-19. Нац. Rev. Immunol. 20 , 529–536. https://doi.org/10.1038/s41577-020-0402-6 (2020).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 31.

    Meckiff, B.J. et al. Дисбаланс регуляторных и цитотоксических SARS-CoV-2-реактивных CD4 + Т-клеток в COVID-19. Ячейка https://doi.org/10.1016/j.cell.2020.10.001 (2020).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 32.

    Sanders, R. W. et al. Расщепленный растворимый энвтример ВИЧ-1 нового поколения, BG505 SOSIP.664 gp140, экспрессирует несколько эпитопов для широко нейтрализующих, но не ненейтрализующих антител. PLoSPathog. 9 , e1003618. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003618 (2013).

    CAS Статья Google Scholar

  • 33.

    Heydarchi, B. et al. Тримерные gp120-специфические бычьи моноклональные антитела требуют цистеина и ароматических остатков в CDRh4 для связывания с высокой аффинностью с Env ВИЧ. МАБ 9 , 550–566. https://doi.org/10.1080/19420862.2016.1270491 (2017).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 34.

    Klasse, P.J. et al. Эпитопы для нейтрализующих антител, индуцированных тримером гликопротеина оболочки BG505 SOSIP ВИЧ-1 у кроликов и макак. PLoS Pathog. 14 , e1006913. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1006913 (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 35.

    Георгиев И.С. et al. Одноцепочечные растворимые тримеры BG505.SOSIP gp140 как структурные и антигенные имитаторы зрелого закрытого Env ВИЧ-1. J. Virol. 89 , 5318–5329. https://doi.org/10.1128/jvi.03451-14 (2015).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 36.

    Pugach, P. et al. Нативный тример SOSIP.664 на основе гена env ВИЧ-1 подтипа B. J. Virol. 89 , 3380–3395. https://doi.org/10.1128/jvi.03473-14 (2015).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 37.

    Alsahafi, N. et al. Изменения SOSIP влияют на конформацию гликопротеина оболочки вируса иммунодефицита человека 1 типа и вовлечение CD4. J. Virol. 92 , e01080-01018. https://doi.org/10.1128/jvi.01080-18 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 38.

    McLean, M. R. et al. Димерный рецептор Fcγ иммуноферментный анализ для изучения ВИЧ-специфических антител: новый взгляд на диапазон антител к рецептору Fcγ, индуцированный испытанием вакцины RV144. J. Immunol. 199 , 816–826. https://doi.org/10.4049/jimmunol.1602161 (2017).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 39.

    Сандерс, Р. В. и Мур, Дж. П. Нативные тримеры Env в качестве платформы для разработки вакцины против ВИЧ-1. Immunol. Ред. 275 , 161–182. https://doi.org/10.1111/imr.12481 (2017).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 40.

    Sanders, R. W. et al. Нейтрализующие антитела к ВИЧ-1, индуцированные нативными тримерами оболочки. Наука 349 , aac4223. https://doi.org/10.1126/science.aac4223 (2015).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 41.

    Ranasinghe, C. et al. Сравнительный анализ ВИЧ-специфического слизистого / системного Т-клеточного иммунитета и авидности после первичной иммунизации рДНК / rFPV и поксвирус-поксвирус. Вакцина 29 , 3008–3020. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2011.01.106 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 42.

    Hanke, T. et al. Эффективная индукция цитотоксических Т-лимфоцитов, специфичных к вирусу обезьяньего иммунодефицита, у макак с использованием многоэпитопного гена и первично модифицированного ДНК вируса осповакцины Режим бустерной вакцинации Анкара. J. Virol. 73 , 7524–7532 (1999).

    CAS Статья Google Scholar

  • 43.

    Секалы Р.-П. Неудачное исследование вакцины Merck против ВИЧ: шаг назад или отправная точка для разработки вакцины в будущем ?. J. Exp. Med. 205 , 7–12. https://doi.org/10.1084/jem.20072681 (2008).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 44.

    Zak, D. E. et al. Merck Ad5 / HIV вызывает широкую активацию врожденного иммунитета, которая предсказывает ответы CD8 + Т-клеток, но ослабляется уже существующим иммунитетом к Ad5. Proc. Natl. Акад. Sci. 109 , E3503 – E3512. https://doi.org/10.1073/pnas.1208972109 (2012).

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 45.

    Karnasuta, C. et al. Антителозависимые клеточно-опосредованные цитотоксические ответы у участников, включенных в испытание первичной вакцины против ВИЧ-1 фазы I / II ALVAC-HIV / AIDSVAX B / E в Таиланде. Вакцина 23 , 2522–2529. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2004.10.028 (2005).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 46.

    Bhattacharya, T. et al. Эффекты основателя при оценке полиморфизма ВИЧ и ассоциаций аллелей HLA. Наука 315 , 1583–1586 (2007).

    ADS CAS Статья Google Scholar

  • 47.

    Brumme, Z. L. et al. Доказательства дифференциальной вирусной эволюции, опосредованной HLA класса I, функциональных и вспомогательных / регуляторных генов ВИЧ-1. PLoS Pathog. 3 , e94. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.0030094 (2007).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 48.

    Rousseau, C.M. et al. Управляемая HLA классом I эволюция протеома вируса иммунодефицита человека типа 1 подтипа c: ускользание иммунитета и вирусная нагрузка. J. Virol. 82 , 6434–6446 (2008).

    CAS Статья Google Scholar

  • 49.

    Betts, M. R. et al. ВИЧ-непроцессоров преимущественно поддерживают высокофункциональные ВИЧ-специфические CD8 + Т-клетки. Кровь 107 , 4781–4789 (2006).

    CAS Статья Google Scholar

  • 50.

    Abdel-Motal, U.M. et al. Кинетика увеличения Gag-специфических CD8 + Т-лимфоцитов SIV после заражения вакцинированных макак. Вирусология 333 , 226–238. https://doi.org/10.1016/j.virol.2004.12.030 (2005).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 51.

    Schieffer, M. et al. Индукция Gag-специфических ответов Т-лимфоцитов CD4 во время острой ВИЧ-инфекции связана с улучшенным вирусным контролем. Дж.Virol. 88 , 7357–7366. https://doi.org/10.1128/JVI.00728-14 (2014).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 52.

    Ferre, A. L. et al. Иммунодоминантные ВИЧ-специфические CD8 + Т-клеточные ответы являются обычными для крови и слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, а gag-специфические ответы преобладают в слизистой оболочке прямой кишки у контролеров ВИЧ. J. Virol. 84 , 10354–10365.https://doi.org/10.1128/jvi.00803-10 (2010).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 53.

    Turk, G. et al. Ранний gag-иммунодоминирование ВИЧ-специфического Т-клеточного ответа во время острой / ранней инфекции связано с более высокой противовирусной активностью CD8 + Т-клеток и коррелирует с сохранением CD4 + Отсек Т-клеток. J. Virol. 87 , 7445–7462. https://doi.org/10.1128/jvi.00865-13 (2013).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 54.

    Ferre, A. L. et al. Иммунные ответы слизистой оболочки на ВИЧ-1 у элитных контролеров: потенциальный коррелят иммунного контроля. Кровь 113 , 3978–3989. https://doi.org/10.1182/blood-2008-10-182709 (2009).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 55.

    Berger, C.T. et al. Ответы цитотоксических Т-лимфоцитов с высокой функциональной авидностью на HLA-B-ограниченные эпитопы, происходящие из gag, связанные с относительным контролем над ВИЧ. J. Virol. 85 , 9334–9345. https://doi.org/10.1128/jvi.00460-11 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 56.

    French, M. A. et al. Антитела иммуноглобулина G с переключением изотипа к белкам Gag ВИЧ могут обеспечивать альтернативные или дополнительные иммунные ответы на «защитные» аллели человеческого лейкоцитарного антигена-B в контроллерах ВИЧ. AIDS (Лондон, Англия) 27 , 519–528. https://doi.org/10.1097/QAD.0b013e32835cb720 (2013).

    CAS Статья Google Scholar

  • 57.

    Rowland-Jones, S. L. et al. ВИЧ-специфические цитотоксические Т-лимфоциты с широкой перекрестной реакцией у постоянно подвергавшихся воздействию серонегативных доноров. Immunol. Lett. 66 , 9–14. https://doi.org/10.1016/s0165-2478(98)00179-5 (1999).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 58.

    Фуркад, Л., Пудрие, Дж. И Роджер, М. Естественный иммунитет к ВИЧ: шаблон для стратегий вакцинации. Вирусов https://doi.org/10.3390/v10040215 (2018).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 59.

    Fouts, T. R. et al. Баланс клеточного и гуморального иммунитета определяет уровень защиты вакцинами против ВИЧ в моделях ВИЧ-инфекции на макаках-резусах. Proc. Natl.Акад. Sci. США 112 , E992-999. https://doi.org/10.1073/pnas.1423669112 (2015).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 60.

    Ханке, T. Испытание STEP и вакцины против ВИЧ-1, вызывающие Т-клеточные ответы. Expert Rev. Vaccines 7 , 303–309. https://doi.org/10.1586/14760584.7.3.303 (2008).

    ADS CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 61.

    Шаклетт Б.Л. и Ферре А.Л. Иммунитет слизистой у контролеров ВИЧ: нужное место в нужное время. Curr. Opin. ВИЧ СПИД 6 , 202–207. https://doi.org/10.1097/COH.0b013e3283453e2b (2011 г.).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 62.

    Pillai, V. K. et al. Различные модели расширения, сокращения и дифференциации памяти Gag-специфических CD8 Т-клеток ВИЧ-1, вызванных аденовирусом типа 5 и модифицированной вакциной Анкары против осповакцины. Вакцина 29 , 5399–5406. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2011.05.083 (2011).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 63.

    Беляков И.М. и др. Влияние индуцированных вакциной высокоавидных CD8 + CTL слизистой оболочки на задержку распространения вируса СПИДа из слизистой оболочки. Кровь 107 , 3258–3264. https://doi.org/10.1182/blood-2005-11-4374 (2006).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 64.

    Crotty, S. et al. Защита от вагинального заражения вирусом иммунодефицита обезьян с использованием векторов полиовируса сабин. J. Virol. 75 , 7435–7452. https://doi.org/10.1128/jvi.75.16.7435-7452.2001 (2001).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 65.

    Kent, S.J. et al. Вводимые через слизистую оболочку ДНК вируса иммунодефицита человека и обезьяны и рекомбинантные вакцины на основе поксвируса птиц снижают репликацию вируса в острой фазе у макак после вагинального заражения CCR5-тропным SHIVSF162P3. Вакцина 23 , 5009–5021. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2005.05.032 (2005).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 66.

    Wijesundara, D.K. et al. Использование анализа FTA in vivo для оценки величины, функциональной авидности и перекрестной реактивности вариантов эпитопа Т-клеточных ответов после вакцинации рекомбинантным поксвирусом ВИЧ-1. PLoS ONE 9 , e105366. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0105366 (2014).

    ADS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 67.

    Хо, Н. И., Хьюисинт Вельд, Л. Г. М., Раайджмейкерс, Т.K. & Adema, G. J. Адъюванты, усиливающие перекрестную презентацию дендритными клетками: ключ к более эффективным вакцинам ?. Фронт. Иммунол. 9 , 2874–2874. https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.02874 (2018).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 68.

    Mosca, F. et al. Молекулярные и клеточные сигнатуры адъювантов человеческих вакцин. Proc. Natl. Акад. Sci. U.S.A. 105 , 10501–10506. https://doi.org/10.1073/pnas.0804699105 (2008).

    ADS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 69.

    Del Giudice, G., Rappuoli, R. & Didierlaurent, A. M. Корреляты адъювантности: обзор адъювантов в лицензированных вакцинах. Семин. Иммунол. 39 , 14–21. https://doi.org/10.1016/j.smim.2018.05.001 (2018).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 70.

    Hua, L. et al. Цитокин-зависимая индукция CD4 + Т-клеток с цитотоксическим потенциалом при инфицировании вирусом гриппа. J. Virol. 87 , 11884–11893 (2013).

    CAS Статья Google Scholar

  • 71.

    Qui, H.Z. et al. Двойная костимуляция CD134 плюс CD137 индуцирует эомезодермин в CD4 T-клетках для программирования цитотоксической дифференцировки Th2. J. Immunol. 187 , 3555–3564 (2011).

    CAS Статья Google Scholar

  • 72.

    Workman, A. M., Jacobs, A. K., Vogel, A. J., Condon, S. & Brown, D. M. Воспаление усиливает дифференцировку цитолитических CD4 T-клеток, управляемую IL-2. PloS one 9 , e89010 (2014).

    ADS Статья Google Scholar

  • 73.

    Appay, V. et al. Характеристика CD4 + CTL ex vivo. J. Immunol. 168 , 5954–5958 (2002).

    CAS Статья Google Scholar

  • 74.

    Johnson, S. et al. Взаимодействие ВИЧ-специфических цитолитических Т-лимфоцитов CD4 и Т-лимфоцитов CD8 в контроле виремии ВИЧ. J. Virol. 89 , 7494–7505 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 75.

    Hildemann, S.K. et al. Высокая эффективность противовирусных CD4 + Killer T-клеток. PLoS ONE 8 , e60420. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0060420 (2013).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 76.

    Lin, L. et al. Секреция гранзима B Т-клетками памяти CD4 человека менее строго регулируется по сравнению с Т-клетками памяти CD8. BMC Immunol. 15 , 36.https://doi.org/10.1186/s12865-014-0036-1 (2014).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 77.

    Borrow, P. et al. Противовирусное давление, оказываемое ВИЧ-1-специфическими цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTL) во время первичной инфекции, демонстрируется быстрым отбором вируса, ускользающего от CTL. Нац. Med. 3 , 205–211. https://doi.org/10.1038/nm0297-205 (1997).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 78.

    Рис, Дж. С. et al. Трехвалентные живые аттенуированные вакцины против вируса гриппа и обезьяньего иммунодефицита: эффективность и эволюция ускользания цитотоксических Т-лимфоцитов у макак. J. Virol. 87 , 4146–4160. https://doi.org/10.1128/jvi.02645-12 (2013).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 79.

    Рис, Дж. К. et al. Время выхода иммунной системы, связанное с успехом или неудачей вакцинации. PLoS One https://doi.org/10.1371/journal.pone.0012774 (2010).

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 80.

    Almeida, J. R. et al. Чувствительность к антигену является основным фактором, определяющим полифункциональность CD8 + Т-клеток и активность по подавлению ВИЧ. Кровь 113 , 6351–6360. https://doi.org/10.1182/blood-2009-02-206557 (2009 г.).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 81.

    Barouch, D. H. et al. Возможная неудача вакцины против СПИДа у макаки-резуса из-за ускользания вируса от цитотоксических Т-лимфоцитов. Природа 415 , 335–339. https://doi.org/10.1038/415335a (2002).

    ADS CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 82.

    Эрл П. Л. и Мосс Б. Характеристика рекомбинантных вирусов осповакцины и их продуктов. Curr. Protoc. Мол. Биол. 43 , 16.18.11-16.18.11. https://doi.org/10.1002/0471142727.mb1618s43 (1998).

    Артикул Google Scholar

  • 83.

    Coupar, B.E.H. et al. Вакцины против вируса оспы птиц для клинических и доклинических испытаний на ВИЧ и SHIV. Вакцина 24 , 1378–1388. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2005.09.044 (2006).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 84.

    Center, R. J. et al. Индукция ВИЧ-1 подтипа B и AE-специфичных нейтрализующих антител у мышей и макак с помощью режимов первичной ДНК и рекомбинантного бустерного белка gp140. Вакцина 27 , 6605–6612. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.08.016 (2009).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 85.

    Фрид, Э. О., Энглунд, Г. и Мартин, М. А. Роль основного домена матрицы вируса иммунодефицита человека типа 1 в макрофагальной инфекции. J. Virol. 69 , 3949–3954. https://doi.org/10.1128/JVI.69.6.3949-3954.1995 (1995).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 86.

    de Taeye, S. W. et al. Иммуногенность стабилизированных тримеров оболочки ВИЧ-1 с пониженным воздействием ненейтрализующих эпитопов. Ячейка 163 , 1702–1715. https://doi.org/10.1016/j.cell.2015.11.056 (2015).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 87.

    Горни М. К., Гианакакос В., Шарп С. и Золла-Пазнер С. Получение человеческих моноклональных антител к вирусу иммунодефицита человека. Proc. Natl. Акад. Sci. США 86 , 1624–1628. https://doi.org/10.1073/pnas.86.5.1624 (1989).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 88.

    Познер, М. Р., Кавачини, Л. А., Эмес, С. Л., Пауэр, Дж. И Бирн, Р. Нейтрализация ВИЧ-1 с помощью F105, человеческого моноклонального антитела к сайту связывания CD4 gp120. J. Acquir. Иммунодефицит. Syndr. 6 , 7–14 (1993).

    CAS PubMed Google Scholar

  • 89.

    Калиа В., Саркар С., Гупта П. и Монтеларо Р. С. Избегание нейтрализации антител, опосредованное точечными мутациями во внутрицитоплазматическом хвосте gp41 вируса иммунодефицита человека типа 1. J. Virol. 79 , 2097–2107. https://doi.org/10.1128/JVI.79.4.2097-2107.2005 (2005).

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 90.

    De Rose, R. et al. Контроль виремии и профилактика СПИДа после иммунотерапии макак, инфицированных вирусом иммунодефицита человека, с использованием пептидной пульсирующей крови. PLoSPathog. 4 , e1000055. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1000055 (2008).

    CAS Статья Google Scholar

  • 91.

    Parsons, M. S. et al. Fc-зависимые функции являются избыточными для эффективности антитела PGT121 против ВИЧ у макак. J. Clin. Расследование. 129 , 182–191. https://doi.org/10.1172/JCI122466 (2019).

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 92.

    McLean, M. R. et al. Иммуноферментный анализ димерного рецептора Fcgamma для изучения ВИЧ-специфических антител: новый взгляд на диапазон антител к рецептору Fcgamma, индуцированный испытанием вакцины RV144. J. Immunol. 199 , 816–826. https://doi.org/10.4049/jimmunol.1602161 (2017).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


    Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

    Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить, хотите ли вы принимать файлы cookie.
    • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
    • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


    Что сохраняется в файле cookie?

    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

    Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

    Этот коммодор VK Holden курил конкуренцию • Petrolicious

    Еще в середине нулевых мне посчастливилось жить идеальной жизнью на пляжных Гран-при — подвиг, который возможен только потому, что я переехал в Мельбурн.Мой дом находился где-то между пляжем и Альберт-парком, это означало, что я буду кататься по автодрому на работу каждый день и делать небольшой объезд на пляж почти дней по дороге с работы. Я упоминаю об этом, поскольку вырос недалеко от Сильверстоуна и будучи полным заправщиком, всякий раз, когда я нахожусь рядом с гоночной трассой, я чувствую, что нахожусь в безопасном, знакомом мире.

    Это может показаться несколько ироничным, учитывая, что трассы — это среда, предназначенная для размещения опасных видов деятельности, но это чувство — среди прочего — сразу заставило Мельбурн почувствовать себя как дома.

    Другой очень заметной связью была любовь австралийцев к автомобилям, любовь, которая проявлялась как смешанное, подобранное и объединенное лоскутное одеяло из лучших предложений Европы, Америки, Азии и Австралии. Бульвары часто перекликались с смесью грохочущих V8, скрипучих V6 и форсированных 4-х — основными участниками были доморощенные Holden и Ford, а также огромное количество старых Alfa Romeo, которые, казалось, были повсюду. Разнообразное отношение к автомобилям — замечательная вещь.

    Тем не менее, эта особенность отсылает нас к одному из доморощенных Холденов в виде Touring Car VK Commodore V8 1984 года: или «Большой взрыв», как его ласково прозвали — как, кажется, все в Стране Оз. Вся ливрея настолько хороша, что я не знаю, с чего начать, но, поскольку все мои рассказы о гоночных ливреях, давайте сразу же поговорим о бренде сигарет Marlboro.

    Компания использует ставший теперь культовым брендинг и внешний вид, который украшал гораздо более известные автомобили и мотоциклы за время ее долгой связи с автоспортом.В результате компания помогла одеть некоторые из самых красивых гоночных ливрей, но для меня нет двух дизайнов, которые сочетаются друг с другом лучше, чем жесткие прямые линии VK Commodore и чистые, заостренные углы логотипа Marlboro.

    То, как линии автомобиля идеально сочетаются с линиями логотипа, кажется, бросает вызов истории, действительно похоже, что логотип Marlboro был разработан для того, чтобы поместиться только на этой машине и только на этой машине, поэтому я легко считаю его лучшим примером автомобиля, спонсируемого Marlboro.Это также один из немногих примеров того, как красный акцентный цвет не ограничивается рамкой размером с логотип, а здесь простирается над передними крыльями до низкого переднего спойлера. Черные надписи также играют решающую роль, балансируя с классическими обесцвеченными черными оконными рамами 80-х годов, а черные пороги просто занижают стойку автомобиля еще ниже до земли — из которых приподнимается другая « опора », которую имеет этот автомобиль. надо мной: это злая мать !

    Если мы говорим о дорожных автомобилях, я всегда буду на стороне заниженной угрозы таких автомобилей, как оригинальный Audi S8 и первый XJ6 с наддувом от Jaguar, но в тех редких случаях, когда четырехдверные «сверхсалоны» пересекают белую линию на дороге. гоночная трасса, эта «угроза» часто переходит в перегрузку.

    Этот автомобиль поражает меня тем, как он скрывает свой 4-дверный представительский седан, огромную массу тела, втиснувшись в самый крутой из гоночных костюмов, что приводит к мысли, что всякий раз, когда я вижу его фотографию, я только когда-либо видел «гоночную машину» — в отличие от просто подготовленной к гонке дорожной машины.

    Этот уровень угрозы — то, что он разделяет с европейским кузеном Lotus Carlton — еще одним автомобилем, занимающим высокое положение в этой эксклюзивной лиге суперселунов, — хотя для моих денег Commodore превосходит Lotus во многом так же, как Mad Max Ford Falcon V8 Interceptor превратит шины Fast and Furious Dodge Charger Вина Дизеля в желе!

    VK Commodore также соответствует этим властным взглядам, главным образом благодаря невероятным гоночным навыкам Питера «Brocky» Брока; настоящий австралийский герой.Комбинация этих двух легенд из Down Under доминировала в чемпионатах по гоночным автомобилям и гонкам на выносливость в середине 80-х, выиграв Bathurst 1000 в 1984 и 1986 годах (в спецификациях групп C и A). Но это была не только Австралия, в которой мчался автомобиль, команда Холдена также участвовала в VK в чемпионате мира по кузовным гонкам и гонках на выносливость до Фудзи в Японии и Спа в Бельгии.

    Меня несколько удивляет, насколько малоизвестна эта невероятно выглядящая машина за пределами Австралии, как и многие представители австралийской автомобильной культуры.Итак, читатели Petrolicious , что вы думаете о «большом взломе» Marlboro VK Commodore?

    Источники изображения: photobucket.com, General Motors

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    Copyright © 2022
    Дропшиппинг в России.
    Сообщество поставщиков дропшипперов и интернет предпринимателей.
    Все права защищены.
    ИП Калмыков Семен Алексеевич. ОГРНИП: 313695209500032.
    Адрес: ООО «Борец», г. Москва, ул. Складочная 6 к.4.
    E-mail: [email protected] Телефон: +7 (499) 348-21-17
    9018

    Группа (TL) 8 th день (дней) (TL) 9 th день (s) IR
    Контроль носителя (физиологический раствор) 35,05 ± 3,17 30,96 ± 2,64 0,132 ± 0,288
    Скополамин (0,4 мг / кг) 60,74 ± 2,27 66,67 ± 0,76 МБПЛ (200 мг / кг) + Скополамин 55.36 ± 1,37 50,3 ± 0,99 0,1 ± 0,073
    МБПЛ (400 мг / кг) + Скополамин 50,5 ± 1,34 43,67 ± 1,69 0,156 ± 0,10
    мг кг) + Скополамин 53,12 ± 1,3 45,67 ± 1,85 0,163 ± 0,061
    MGPB (400 мг / кг) + Скополамин 39,16 ± 2,69 32,7514 ± 1,89163 Шанхпушпи + Скополамин 36.16 ± 2,51 27,83 ± 2,1 0,299 ± 0,141
    Пирацетам (100 мг / кг) + Скополамин 26,12 ± 2,6 21,78 ± 1,19 0,19 ± 0,611
    MBPL и MGBP в обеих испытанных дозах значительно изменили нарушения памяти, вызванные скополамином, и сравнимы с таковыми для обоих контролей. MGPD (400 мг / кг) продемонстрировал лучшую активность по улучшению памяти среди всех тестовых образцов с минимальным временем задержки передачи.Все данные рассчитаны как среднее ± стандартное отклонение; n = 6. Данные статистически эффективны и высоко эффективны по сравнению со скополамином.

    4. Обсуждение

    Предварительный скрининг фитохимических веществ — важный шаг для обнаружения различных биоактивных вторичных метаболитов растений, играющих жизненно важную роль в лечебных и физиологических действиях, таких как антиоксидантная, противодиабетическая и противораковая активность [24 ].Наше исследование показало наличие биоактивных соединений, таких как флавоноиды, алкалоиды, фенолы, дубильные вещества и сапонины, что аналогично результатам другого исследования для обоих растений [25, 26]. Фенольные соединения обладают мощным антиоксидантным действием, улавливая свободные радикалы из-за присутствия гидроксильных групп. Следовательно, количественное определение содержания фенолов дает четкое представление об антиоксидантной активности растений и их биологической активности. Повышенное содержание фенола в коре г.pinnata (156,80 ± 0,33 µ г GAE / мг), чем в листьях B. pinnatum (27,782 ± 0,25 µ г GAE / мг), о которых сообщается в нашем исследовании, коррелирует с большей наблюдаемой антиоксидантной активностью и соответствует предыдущим результатам. [27, 28]. Поглотители свободных радикалов растительного происхождения, такие как флавоноиды и фенольные соединения, ответственны за антиоксидантную активность [29].

    Данные по процентному содержанию ингибирования свободных радикалов

    DPPH из таблицы 2 демонстрируют, что метанольный экстракт г.Кора pinnata более эффективна в подавлении свободных радикалов DPPH по сравнению с метанольным экстрактом B. pinnatum во всех испытанных концентрациях. Более высокое количество фенольных соединений может быть причиной лучшей антиоксидантной активности экстракта коры G. pinnata . В предыдущем исследовании было обнаружено, что 40% свободных корешков DPPH ингибируются 100 мкг / мл метанольного экстракта B. pinnatum [30]. В другом исследовании минимальная эффективная концентрация этанольного экстракта составила 144.09 мкг / мл [31].

    Модель приподнятого крестообразного лабиринта была принята для определения эффективности растительных экстрактов в отношении улучшения памяти, в которые вводили скополамин для индукции амнезии у мышей [23]. Однако продолжительное введение обоих экстрактов способствовало лучшему улучшению приобретения и сохранения памяти (пропорционально количеству введенной дозы) по сравнению с животными, получавшими скополамин, тем самым подтверждая ноотропный эффект [32]. В модели приподнятого крестообразного лабиринта уменьшенное значение TL предполагает повышение когнитивной способности и наоборот.Недавние исследования показали, что это общепринятая модель для изучения процесса обучения и памяти у мышей [33]. Иммунологические исследования показали, что повреждение нервных клеток, вызванное воспалением, может вызывать AD, а длительное использование противовоспалительных средств может снизить тяжесть этого заболевания, подавляя начало и прогрессирование AD [1, 23]. Таким образом, противовоспалительная активность G. pinnata и B. pinnatum может быть основным фактором наблюдаемой активности по улучшению памяти [34, 35].Бескислородные радикалы могут генерировать нейротоксин и могут действовать как причинный фактор для AD. Способность обоих растений улучшать память может быть подтверждена их способностью нейтрализовать свободные радикалы, благодаря которой на ответственные нейроны воздействует меньшее количество токсичных свободных радикалов, что приводит к снижению нейрональной токсичности и повышению активности мозга, таким образом повышая когнитивные способности [23]. . Кроме того, фенольные соединения могут запускать специфический внутриклеточный сигнальный путь для улучшения процесса памяти [36].Следовательно, более высокое содержание фенолов и антиоксидантная активность у G. pinnata , возможно, способствовали его более высокому эффекту улучшения памяти по сравнению с B. pinnatum в этом исследовании. В предыдущем исследовании на швейцарской модели мышей-альбиносов водный экстракт B. pinnatum (AEBP) в дозе 200 мг / кг массы тела значительно контролировал время сна и другие общие поведения, вызванные фенобарбитоном, а также замедляющее действие на начало судорог, вызванных пикротоксином и стрихнином. Экстракт B. pinnatum может оказывать депрессивное действие на центральную нервную систему в результате его ГАМКергической и, реже, глицинергической передачи [37]. Эффект усиления памяти B. pinnatum был также подтвержден предыдущим исследованием, в котором листья AEBP показали улучшение кратковременной потери памяти за счет подавления активности ацетилхолинэстеразы, индуцированной CCL 4 . Экстракт листьев очень заметно снижал индуцированное CCL 4 избыточное производство оксида азота (NO) и малонового диальдегида (MDA) в головном мозге для защиты от окислительного стресса.Повышенный уровень MDA является признаком окислительного стресса, приводящего к окислительному повреждению мозга. Избыточный синтез NO снижает функцию антиоксидантных ферментов, что приводит к нейродегенеративным заболеваниям, таким как БА и депрессия [38]. Ацетилхолин (ACh) является основным нейротрансмиттером холинергической системы, связанной с когнитивными функциями, такими как эпизодическая и пространственная память, обучающее поведение, рабочая память, обучение и регуляция мозгового кровотока [39]. Концентрация ацетилхолина (ACh) контролируется ферментом ацетилхолинэстеразой (AChE), который способен гидролизовать этот нейромедиатор.Повышение концентрации AChE в головном мозге приводит к деградации Ach, в конечном итоге уменьшая рецепторы ACh и затем вызывая нежелательный эффект на холинергическую нейротрансмиссию, а также приводит к ухудшению когнитивной функции и другим неврологическим расстройствам [40]. Введение листьев AEBP в дозе 25 и 50 мг / кг массы тела привело к заметному ингибированию активности AChE по сравнению с группой отрицательного контроля, а также привело к значительному снижению концентрации аденозиндезаминазы (ADA) в мозг мышей-альбиносов.Было доказано, что увеличение концентрации ACh в синаптической щели облегчает когнитивные функции, такие как обучение и память, а также модуляцию мозгового кровотока. Повышение концентрации ADA связано со снижением уровня аденозина, защищающего нейроны от эндогенной молекулы [38, 39]. Кора G. pinnata содержит различные типы диарилгептаноидов [41, 42], которые эффективны для защиты нейронов и улучшения когнитивных функций. Эти соединения могут значительно улучшить амнезию, вызванную скополамином, в тестах пассивного избегания.Диарилгептаноиды могут значительно увеличивать фосфорилирование белка, связывающего элемент ответа на циклический АМФ (CREB), и экспрессию нейротрофического фактора мозга (BDNF) в гиппокампе и коре головного мозга мышей, получавших скополамин. Они также особенно защищали клетки HT22 гиппокампа от нейротоксичности, вызванной глутаматным инсультом. В целом, диарилгептаноиды могут смягчать дефицит памяти за счет активации пути BDNF – CREB и ингибировать гибель нейрональных клеток для предотвращения нейродегенерации [43, 44].Кроме того, листья B. pinnatum и кора G. pinnata содержат мощные противовоспалительные нестероидные производные [10], фитостерины, тритерпеноиды, алкалоиды, гликозиды, полифенол, структуру β -амирина и т. Д. по [34, 35, 45, 46]. Флавоноиды в большом количестве присутствуют в обоих растениях, и несколько исследований показывают, что природные флавоноиды могут оказывать анксиолитический эффект, не вызывая седативного эффекта и амнезии [47, 48]. Точно так же известно, что терпеноиды вызывают седативный и анксиолитический эффекты [32].Точный механизм действия еще предстоит объяснить, но наши выводы важны, поскольку они подтверждают одно из народных применений коры G. pinnata и листьев B. pinnatum в качестве лекарственного растения в Непале.

    5. Заключение

    G. pinnata и B. pinnatum содержат биоактивные фитосоставы, такие как алкалоиды, танины, фенолы и флавоноиды, обладающие способностью улавливать свободные радикалы и улучшать память. Таким образом, можно использовать эти растения для лечения когнитивных нарушений, связанных с БА.Кроме того, значительная активность этих растений в улучшении памяти может быть связана с их фенольным содержанием и антиоксидантной активностью. Необходимы дальнейшие исследования на доклиническом и клиническом уровне с выяснением точного механизма.

    Доступность данных

    Все данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, можно получить у Р. Бхандари по запросу.

    Раскрытие информации

    Это исследование было выполнено в рамках частичного получения ученой степени в Crimson College of Technology, Непал.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

    Благодарности

    Авторы благодарят Crimson College of Technology при Университете Покхара, Непал, за всю техническую поддержку.

    Повышение вариабельности сигналов мозга отслеживает либеральные сдвиги в предвзятости принятия решений

    Существенных изменений:

    1) Одна из концептуальных проблем этой статьи заключается в том, что не дана убедительная / убедительная априорная теория, чтобы связать их с концепциями.Следует приложить больше усилий, чтобы сформулировать биологическую мотивацию, чтобы помочь читателям оценить потенциальную значимость результатов. Авторы интерпретируют свои результаты, показывая, что «гибкие корректировки моментальной изменчивости во фронтальных областях могут лежать в основе стратегических сдвигов в предвзятости решений». Однако отличительной чертой стратегического эффекта является то, что критическая переменная (то есть энтропия) на самом деле различается в среднем между условиями, которые вызывают разные стратегии. Тем не менее, анализ цифр показывает, что различия в условиях либеральной / консервативной энтропии были распределены довольно равномерно около нуля (например,g., рис. 3B), что контрастирует с колебательными эффектами в предыдущей статье, которые действительно показали достоверные различия в условиях. Таким образом, результаты, по-видимому, предполагают, что, хотя изменчивость действительно влияет на предвзятость решения, она бессистемно меняется в зависимости от условий в пределах отдельных людей. Другими словами, если я чего-то не упускаю, кажется, что изменения энтропии НЕ находятся под стратегическим контролем сверху вниз. Этот аспект требует дальнейшего обсуждения / анализа.

    Мы благодарим рецензентов за эти баллы.Мы согласны с тем, что наша центральная гипотеза о том, что повышенная от момента к моменту нейронная изменчивость лежит в основе либерального предубеждения при принятии решений, должна быть сформулирована дальше и лучше интегрирована в теоретическую основу. Наша фундаментальная гипотеза заключается в том, что нейронная система, которая является более динамичной и менее предсказуемой, позволяет когнитивному функционированию быть более гибким и адаптивным. Теперь мы более подробно определили теоретические основы нашей гипотезы во Введении, основываясь на трех независимых направлениях исследования. Во-первых, мы опираемся на данные исследований, показывающие, что повышенная нейронная изменчивость позволяет мозгу постоянно исследовать возможные внутренние состояния, что может помочь гибко реагировать на каждое событие, относящееся к задаче.Доказательства этой идеи прибывают как из работы по подключению в состоянии покоя, показывающей, что нейронный шум важен для возникновения когерентных флуктуаций сети по умолчанию (Ghosh et al., 2008), так и из данных задач, показывающих, что более значимые стимулы вызывают более высокие уровни нейронной изменчивости, предполагающие более сложную обработку (Mišić et al., 2010). Это мнение дополнительно подкрепляется несколькими статьями из нашей лаборатории, показывающими, что более высокая нейронная изменчивость связана с лучшими когнитивными функциями (Garrett et al., 2015, 2013, 2011). Во-вторых, мы опираемся на теоретические работы, предполагающие, что организмы могут использовать нейронный режим с высокой точностью, который способен отражать сложность окружающей среды и, таким образом, увеличивает шансы обнаружения соответствующих стимулов, но за счет более высокого потребления энергии, чем при низком уровне режим верности (Marzen, DeDeo, 2017). Было предложено, чтобы высокоточное кодирование отражалось в повышенной нейронной изменчивости (Młynarski and Hermundstad, 2018), и недавно мы представили первоначальные эмпирические доказательства этой идеи (Garrett et al., 2020). Наконец, мы опираемся на влиятельные модели динамических аттракторов нейронной популяционной активности, в которых временная нейронная изменчивость (операционализированная как «шум» в этих моделях) позволяет вероятностным прыжкам через барьеры в пределах многомерного энергетического ландшафта, позволяя осесть в низкоразмерном аттракторе. состояние, которое соответствует определенному когнитивному результату (Deco et al., 2009; Moreno-Bote et al., 2007; Wimmer et al., 2014). Вместе эти направления работы предполагают, что нейронная изменчивость поддерживает когнитивные функции и гибкость, которые мы стремимся усилить и расширить с помощью текущего исследования в области предубеждений при принятии решений.

    Рецензенты правильно утверждают, что в среднем (по участникам) исходная mMSE в лобных электродах не значительно выше в либеральном по сравнению с консервативным состоянием (что указывает на отсутствие основного эффекта состояния). Это контрастирует с необработанными различиями в мощности альфа и тета, которые значительно различались между условиями (см. Нашу предыдущую статью). Как это ни парадоксально, однако, мы обнаружили, что в то время как сдвиг в mMSE действительно коррелировал со сдвигом либерально-консервативного смещения, сдвиги в альфа и тета — нет; это действительно «исследовательский прогресс», который мы предоставляем в данной статье.Мы утверждаем, что эмпирическое разделение основных эффектов и поведенческих прогнозов не является неожиданным. Хотя основной эффект экспериментальных условий и корреляция изменения-изменения могут в принципе происходить параллельно, межличностные различия могут быть чувствительны к поведенческим корректировкам даже в отсутствие группового сдвига. Причина этого в том, что главный эффект и корреляция затрагивают несколько противоположные исследовательские вопросы, которые могут противоречить друг другу. С одной стороны, основной эффект обычно возникает, когда субъекты одинаково реагируют на экспериментальные условия, что обычно требует, чтобы индивидуальные различия были относительно небольшими.С другой стороны, шансы обнаружить корреляцию, например, с поведением обычно возрастают, когда индивидуальные различия больше (например, Lindenberger et al., 2008). Короче говоря, предположение о том, что главный эффект условия является предпосылкой для обнаружения поведенческих эффектов, на наш взгляд, необоснованно. Кроме того, идея о том, что свидетельство нисходящих «стратегий» требует главного эффекта состояния, также не обоснована; Некоторые субъекты могут использовать правильную, а другие неправильную стратегию, что потенциально может привести к отсутствию среднего эффекта состояния по субъектам, но при этом раскрыть, почему их поведение различается при выполнении задания.Таким образом, мы не стремились априори выдвинуть гипотезу о главном влиянии состояния на либерально-консервативный контраст, а скорее сосредоточили наши гипотезы на межиндивидуальных корректировках нейронной энтропии, которые отслеживали величину индивидуального сдвига смещения. Наблюдаемое отсутствие основного эффекта в сочетании с сильной корреляцией со сдвигом смещения указывает на то, что некоторые участники действительно показали немного более высокий mMSE в консервативном состоянии, но эти участники также показали наименьший сдвиг смещения между условиями.Это говорит о том, что эти участники ответили очень слабо как на нервном, так и на поведенческом уровнях. Таким образом, мы утверждаем, что изменения в mMSE по-прежнему отражают изменение стратегической предвзятости, даже при отсутствии основного эффекта. Наконец, мы отмечаем, что мы действительно наблюдаем значительно более сильное кратковременное увеличение mMSE после начала испытания в либеральном состоянии (после базовой коррекции данных, как это обычно бывает при частотно-временном анализе ЭЭГ). Возможно, из-за изложенной выше логики корреляция «изменение-изменение» с поведением в этой версии слабее.Теперь мы обсудим этот вопрос относительно связи между основным эффектом условия и корреляцией изменение-изменение в разделе «Обсуждение» рукописи.

    2) Мощность / размер выборки. В принципе, экспериментальный план является адекватным, поскольку он реализует надежную манипуляцию субъектным предубеждением (включая существенные индивидуальные различия в этом эффекте). Авторы также разработали недавно адаптированную безмасштабную меру энтропии, которая работает в относительно коротких связанных временных окнах.Результаты кажутся удивительно надежными (корреляция между мозгом и поведением> 0,8) и подтверждаются последовательными корреляциями внутри субъекта (которые, однако, были значительно меньше). Однако, хотя сообщаемые эффекты весьма значительны, они также являются результатом анализа, который кажется относительно исследовательским по своему характеру (по всем электродам, временным шкалам и временным точкам) с небольшой выборкой всего из 16 субъектов. Независимая репликация значительно укрепит выводы. Если предположить, что мои опасения обоснованы и основной результат отличается от предсказанного априори (потому что он не соответствует стратегическому эффекту), объяснение выглядит более апостериорным, и, как следствие, порог для принятия маломощного результат бы увеличился.Поэтому авторам следует либо повторить эксперимент, либо предоставить веские аргументы в пользу того, почему опасения относительно надежности необоснованны и / или почему их результаты в конце концов согласуются со стратегическим эффектом.

    Спасибо за эти действительные баллы. В ответ на пункт 1 выше мы уже утверждали, что отсутствие основного эффекта не препятствует интерпретации, согласно которой межиндивидуальные различия в величине сдвигов энтропии отражают стратегические корректировки смещения.Например, некоторые участники имеют немного более высокую энтропию в консервативном состоянии, но их стратегический сдвиг смещения также был небольшим, что устраняет основной эффект энтропии, сохраняя при этом сильную связь в своих изменениях. Как отмечалось в ответ на пункт 1, теперь мы лучше обосновали нашу гипотезу и аргументируем, почему мы не выдвинули гипотезу о главном эффекте состояния как такового. Более того, при корректировке базовых значений mMSE, как это обычно делается в частотно-временном анализе, мы действительно наблюдаем значительный основной эффект манипуляции смещением с более высокой энтропией в либеральных условиях (рис. 6E), но более слабую корреляцию изменения-изменения с поведением. .Мы решили протестировать взаимосвязь «изменение-изменение» без предварительного применения базовой коррекции значений mMSE перед стимулом, потому что наш блочный дизайн с непрерывной стимуляцией предполагает, что стратегическое смещение также присутствует до начала стимула, а вычисление mMSE уже включает две внутрисубъектные нормализации, в отличие от необработанной спектральной мощности, которая никоим образом не связана с собственной мозговой активностью субъекта. В частности, такое заземление обеспечивается для mMSE посредством (1) параметра подобия паттернов, контролирующего общую вариацию сигнала (SD) субъекта, в то время как (2) деление числа паттернов m и m + 1 при вычислении энтропии нормализует абсолютные числа m и m + 1 совпадений с образцом.Тем не менее, мы также включили в нашу рукопись результаты с корректировкой базовой линии, чтобы исследовать возможные эффекты гашения mMSE и позволить сравнение с результатами спектральной модуляции мощности.

    Изначально нас также удивила сильная корреляция между мозгом и поведением, особенно потому, что ни один из спектральных или ERP-показателей не показывает убедительной и значимой корреляции. Как отмечается в рукописи, можно ожидать некоторой корреляции, если эти показатели отражают нейронный процесс, центральный для сдвига смещения, учитывая большие объемы данных на одного участника и большие различия в поведении между индивидуумами.Кроме того, мы обнаружили, что корреляция также была значимой для более спонтанных флуктуаций предвзятости внутри участников, предполагая, что наблюдаемая связь между mMSE и предвзятостью решений не только происходит под стратегическим контролем, но также может быть предметом ежеминутных колебаний внимания или бдительность. В конце концов, многие элементы управления (в том числе ERP и новый анализ высокочастотной фильтрации, включенный в эту версию) убедили нас в том, что энтропия уникальным образом захватывает некоторую часть нейронной динамики, чего нет в более традиционных измерениях.

    Мы утверждаем, что ряд особенностей нашего кластерного корреляционного анализа говорит против идеи переобучения пространственно-временного пространства более высоких измерений. Во-первых, пространственная топография нашего эффекта mMSE очень похожа на среднефронтальную тета и даже коррелирует с тета, что предполагает перекрытие нейронных источников. Во-вторых, анализ показывает, что многие временные шкалы способствуют корреляции, предполагая, что низкие частоты, такие как дельта / тета, способствуют корреляции, учитывая прогрессивную фильтрацию нижних частот с более длинными временными шкалами (см. Также наш новый анализ, представленный в пункте 6 рецензента. ).Предыдущая работа действительно вовлекала дельта / тета во фронтальных каналах в стратегический и когнитивный контроль принятия решений (Helfrich et al., 2017). В-третьих, корреляция широко распространяется во временном измерении, что свидетельствует о стабильном изменении стратегической предвзятости с течением времени, как и требовалось от участников нашего блочного дизайна. Наконец, корреляционный анализ остается практически неизменным независимо от того, был ли удален связанный с событием потенциал перед энтропийным анализом (подробности см. В нашем ответе на пункт 4 обзора), что свидетельствует о надежности (Mišić et al., (2010) нашли аналогичный результат). Взятые вместе, мы считаем, что, несмотря на неожиданно сильную связь мозга и поведения для mMSE, результаты надежны и согласуются с литературными данными по нескольким параметрам. Мы лучше осветили эти различные аспекты в рукописи, чтобы более четко передать это. В заключение мы согласны с тем, что размер нашей выборки с точки зрения количества участников относительно невелик и что воспроизведение наших результатов в независимой выборке участников весьма желательно.Тем не менее, мы считаем, что настоящие результаты достаточно убедительны и концептуально мотивированы, чтобы их можно было опубликовать отдельно, учитывая огромный объем данных по предметам и устойчивость к многочисленным средствам контроля.

    Для дальнейшего раскрытия этой статистической проблемы с относительно большим пространством поиска (электроды x время x шкала времени) плюс коррекция множественного тестирования только очень высокие корреляции могут соответствовать порогу. Мне сложно определить, действительно ли это беспокойство, потому что мне трудно полностью понять процедуру кластерной коррекции, в частности, данные по каким электродам были усреднены для диаграммы рассеяния.На топографических изображениях есть места расположения электродов, которые, кажется, показывают значительную корреляцию на основе схемы окраски, но также есть различное количество черных кругов (иногда разного размера). Являются ли результаты усредненными электродами, окрашенными в крест или «обведенными» электродами? Какое значение имеет размер круга? Чем шире база усреднения, тем меньше меня будет беспокоить. Я считаю, что проверка устойчивости к разделению половин с такой высокой корреляцией для начала не очень обнадеживает.Однако тот факт, что отношения также обнаруживаются внутри субъектов (хотя и гораздо меньшего размера), явно помогает.

    Этот комментарий заставил нас понять, что способ построения результатов не совсем ясен, поэтому мы попытались его улучшить. Для корреляционного анализа мы использовали кластерный перестановочный тест по времени, электроду и временной шкале. Этот анализ очень похож на обычно применяемое статистическое тестирование спектральной мощности (модуляции) Э / МЭГ по временным, электродным и частотным измерениям.С этой целью мы использовали функциональные возможности кластерной статистики в функции ft_freqstatistics.m (Maris and Oostenveld, 2007), реализованной в наборе инструментов FieldTrip (Oostenveld et al., 2011). Как отмечает рецензент, этот метод наиболее чувствителен к сильным корреляциям, которые широко распространяются по трем измерениям. Однако мы решили не выбирать интересующий априорный регион или диапазон времени / шкалы времени для исследования корреляции, потому что нас интересовало, будет ли какой-либо регион проявлять эффект.Действительно, мы обнаружили сильную значительную корреляцию для mMSE, но не для спектральной мощности, и теперь также не для ERP (см. Пункт 4 рецензента). Таким образом, несмотря на то, что он чувствителен в основном к сильным, протяженным кластерам корреляций, метод позволяет нам выявить эффект для mMSE над другими, обычными измерениями нейронной активности без необходимости предварительно выбирать шкалы времени, точки времени и интересующие электроды.

    Важно отметить, что диаграмма рассеяния, изображенная на рисунке 3B, служит только для иллюстрации кластерного теста корреляции, представленного на рисунке 3A, и не несет никакой дополнительной информации по сравнению со статистическим тестом, представленным на рисунке 3A.Мы получили этот график разброса, сначала усреднив либерально-консервативные значения mMSE по всем бинам электродов временной шкалы, которые находились в пределах значимого трехмерного кластера, изображенного на рисунке 3A, и сопоставив с либерально-консервативным критерием SDT для участников. Учитывая, что интервалы были предварительно выбраны на основе их корреляции в первую очередь, а затем были усреднены, полученная корреляция rho = 0,87 представляет собой верхнюю границу фактической корреляции. Электроды, включенные в кластер, показаны черными точками, и значения были извлечены исключительно в этих значимых каналах.Поскольку окраска местоположений электродов выполняется посредством интерполяции, может случиться так, что указанные местоположения электродов не точно соответствуют цветам на топографических диаграммах. Кроме того, может случиться так, что в месте расположения электрода отсутствует цвет — это указывает на то, что, хотя электрод был представлен в кластере, его вклад был настолько мал, что не выходил за пределы серого диапазона цветовой полосы. Теперь мы разъяснили эти принципы иллюстрации в легенде на Рисунке 3A.

    3) Все рецензенты считали, что методы, с помощью которых вычисляется mMSRE, должны быть лучше сформулированы, особенно с учетом того, что в рукописи используется модифицированная версия опубликованного метода.m)… »Многие из этих утверждений неоднозначны — вместо этого следует дать пошаговое описание алгоритма. Уравнения также помогут сделать раздел« Материалы и методы »более читабельным.

    Мы согласны с тем, что наше объяснение нашей модифицированной меры MSE может быть улучшено, поэтому мы тщательно пересмотрели раздел «Материалы и методы» с учетом этого момента. Теперь мы шаг за шагом опишем, как вычисляется MSE, а также предоставим уравнения, которые передают логику вычислений.Мы надеемся, что рецензенты сочтут вычисление энтропии и наши модификации более легкими для понимания. Теперь в подразделе «Вычисление энтропии» напишем следующее:

    Мы измерили временную нейронную изменчивость в ЭЭГ, используя многомасштабную энтропию (MSE) (Costa et al., 2002). MSE характеризует неравномерность сигнала в нескольких временных масштабах путем оценки энтропии выборки (SampEn) временного ряда сигнала при различных частотах дискретизации. Оценка SampEn включает в себя подсчет того, как часто определенные временные паттерны повторяются с течением времени, и эффективно измеряет, насколько непредсказуемо развивается сигнал от момента к моменту.В заданном временном масштабе оценка SampEn состоит из следующих шагов: […]

    Таким образом, SampEn оценивает долю похожих последовательностей из m выборок, которые все еще остаются подобными, когда к последовательности добавляется следующая выборка, то есть m + 1. Здесь мы используем m = 2 и r = 0,5, как это обычно делается в нейрофизиологических условиях (Courtiol et al., 2016; Grandy et al., 2016; Richman and Moorman, 2000) ».

    Теперь мы также отдельно выделяем наши адаптации к этой формуле для ясности и сопоставимости с предыдущими реализациями, см. Раздел «Материалы и методы».

    Один рецензент также посчитал, что может помочь реструктуризация раздела «Результаты» таким образом, чтобы сначала представлялись величины, близкие к измеренным данным, прежде чем строить их для получения корреляции «изменение-изменение». Например, раздел должен начинаться с линейных графиков mMSE за время испытания для каждого условия и т. Д. Таким образом, читатели смогут лучше понять, что происходит.

    Это интересное предположение, над которым мы много думали при написании рукописи.Поскольку выходные данные mMSE имеют три измерения (время, пространство и шкалы времени), одна проблема с построением одномерных временных курсов mMSE в виде линейных графиков заключается в том, что для этого требуется произвольный выбор электродов и шкалы времени для усреднения перед построением графика. (Аналогичная проблема возникает для представления трехмерных значений спектральной мощности во времени, пространстве и частоте.) Кроме того, мы не преобразуем сначала mMSE в процентную модуляцию от базовой линии до стимула, как это обычно делается для спектральные оценки, которые запрещают статистический тест против нуля, который может помочь выбрать соответствующие электроды и временные рамки.Пожалуйста, посмотрите наш ответ на пункт 2 обозревателя, почему мы решили в первую очередь работать с необработанными, не скорректированными на базовом уровне значениями mMSE. Поэтому мы решили, что показ линейных графиков mMSE может ввести в заблуждение, и решили сразу перейти к корреляции «изменение-изменение» с поведением по всем измерениям.

    4) Все рецензенты также согласились с тем, что анализ следует повторить без предварительного удаления ERP. Авторы вычитают ERP для условий, сеансов и участников из исходных испытаний перед всеми анализами.Хотя иногда это оправдано, но если ответы отдельных испытаний не являются стереотипными, процедура вычитания может фактически добавить (инвертированную) ERP обратно в данные. Более конкретно, вычитание ERP для получения данных только для индуцированных явлений оправдано только в том случае, если можно предположить, что вызванная реакция (однократная проба) не зависит от «текущей» активности (т.е. линейно прибавляет к ней). В настоящем исследовании авторы особенно озабочены тем, как текущая деятельность влияет на обработку новых стимулов, тем самым по определению нарушая это предположение.Следовательно, в этом случае вычитание ERP проблематично, и его следует избегать. В связи с этим другой рецензент отметил, что одним из потенциальных факторов, способствующих получению результатов, является то, что испытания, в которых более сильное (например, временное) отклонение сигнала ЭЭГ от среднего ERP приводит к более низкой энтропии, поскольку там « вызванный » ответ удаляется менее эффективно, тогда как в испытаниях, где ЭЭГ больше похожа на ERP, энтропия будет выше, поскольку стереотипный ответ был удален. Таким образом, повторите анализ, не удаляя ERP, а также покажите ERP для различных условий.

    В ходе этого проекта мы много думали о взаимосвязи между ERP и энтропией и решили удалить потенциалы, связанные с событиями (ERP), из нашей первоначальной заявки по двум причинам. Во-первых, мы стремились сосредоточить наш анализ на нейронной активности, которая изначально возникает в мозге, а не непосредственно вызвана сенсорной стимуляцией. Это также было мотивировано нашим блочным дизайном, который требовал от наших участников постоянного сохранения стратегической предвзятости в Интернете.Кроме того, удаление ERP также удалило сильный устойчивый визуальный вызванный потенциал на 25 Гц в затылочных электродах, о котором мы сообщали в нашей предыдущей статье (Kloosterman et al., 2019), что могло повлиять на оценки энтропии в более быстрых масштабах. Во-вторых, при представлении результатов разным аудиториям и во время внутренних раундов рецензирования рукописей нас часто спрашивали, можно ли объяснить результаты энтропии различиями ERP между условиями, поскольку вычисление ERP — это хорошо известный и сравнительно более простой анализ, чем энтропийный анализ.Чтобы решить эти проблемы, мы решили вычесть ERP перед вычислением энтропии в нашей первоначальной отправке. Тем не менее, мы согласны с рецензентами, что помимо удаления вызванных ответов вычитание ERP может иметь нежелательные последствия, такие как введение ERP с обратным знаком обратно в данные. Поэтому мы повторили анализ, не удаляя ERP, и получили очень похожие результаты с практически неизменной отрицательной корреляцией изменения-изменения между смещением и энтропией. Это соответствует предыдущей статье, в которой также были показаны аналогичные результаты MSE с удалением ERF и без него в данных MEG (Mišić et al., 2010). Теперь мы сообщаем ERP для двух условий на рисунке 3 — рисунок в приложении 4 и сообщаем об их корреляции с поведением. В отличие от либерально-консервативного подхода, мы наблюдали один положительный кластер (то есть более сильный ERP для либерального) над центральным и париетальным электродами между 0,37 с и 0,8 с после начала испытания и один отрицательный кластер на среднефронтальном, центральном и теменном электродах несколько раньше. Время и топография первого положительного кластера близко соответствуют ERP, известной как центропариетальная положительность (CPP), которая отражает накопление сенсорных данных во время перцептивного принятия решений (O’Connell et al., 2012). Это согласуется с нашими предыдущими выводами об увеличении накопления доказательств в либеральных условиях (Kloosterman et al., 2019). Что важно для текущей статьи, мы также выполнили корреляцию изменения-изменения между ERP и критерием по электродам и временным интервалам и не обнаружили значимых кластеров (наименьшее p-значение кластера p = 0,69 для положительного кластера и p = 0,23 для отрицательного кластера). . Взятые вместе, эти результаты предполагают, что ERP, привязанные по времени к началу стимула, не могут объяснить наблюдаемые результаты энтропии.

    В заключение мы хотели бы отметить, что этот результат интригующе предполагает, что обширная область исследований ERP (как, возможно, наиболее широко используемого метода анализа ЭЭГ) могла структурно упустить из виду важное свойство сигнала ЭЭГ, которое на самом деле тесно связана с поведением, и эта связь осталась скрытой во многих существующих наборах данных ЭЭГ, проанализированных с помощью ERP. Мы обсуждаем эти результаты и их значение в рукописи в новом подразделе «Связь энтропии-смещения не объясняется потенциалами, связанными с событием » и в разделе «Обсуждение».

    5) Текст в разделе «Результаты» предполагает, что спектральный анализ был проведен как для спектральных значений, скорректированных по базовой линии, так и для исходной мощности (но это не указано в разделе методов, где упоминаются только значения мощности, скорректированные по базовой линии). Поскольку экспериментальный план заблокирован, очень важно смотреть на скорректированные значения, не относящиеся к базовому уровню. Я хотел бы, чтобы авторы предоставили анализ спектральной мощности (по частотным диапазонам), которая не корректировалась по базовой линии, но где, возможно, была вычтена средняя мощность каждого участника и электрода в разных условиях — для учета межиндивидуальных различий в сигнале ЭЭГ. мощность, которая может не иметь отношения к процессам принятия решений (проводимость, толщина черепа, диполярная ориентация и т. д.)

    Следуя рекомендациям рецензентов, мы выполнили базовую коррекцию исходных оценок спектральной мощности путем вычитания для каждого субъекта средней мощности по всем условиям в период до стимула (–0.От 4 до 0 с) от каждого частотно-временного интервала в каждом электроде. См. Результаты на новом рисунке 3 — добавлении к рисунку 3. В целом, модуляция с использованием этой базовой линии очень похожа на модуляцию мощности с использованием базовой линии для конкретного состояния, о которой сообщалось в нашей предыдущей статье (Kloosterman et al., 2019), включая ответы SSVEP в задних областях, усиление гамма-излучения в затылочных электродах и низкие значения. подавление частоты в центральном и затылочном электродах (Рисунок 3 — приложение к рисунку 3A и B).Сравнение этих двух условий показало более сильную общую высокочастотную мощность, а также подавленную активность альфа-диапазона для либерального состояния (панель C). Однако важно отметить, что когда изменение-изменение коррелирует либерально-консервативную модуляцию мощности со сдвигом смещения решения, мы не обнаружили значимых кластеров (самый низкий кластер p = 0,26, рисунок 3 — приложение к рисунку 3D). Таким образом, эта конкретная базовая коррекция также не выявила никакой связи между участниками между спектральной модуляцией мощности и смещением решения, в соответствии с уникальным вкладом сдвигов энтропии в сдвиг смещения.Обратите внимание, что, поскольку теперь мы сообщаем о результатах, не удаленных из ERP, мы удалили предыдущий анализ (т. Е. Спектральный анализ данных с удаленным ERP и скорректированным по условию исходным уровнем) из текущей пересмотренной рукописи, но по-прежнему сообщаем об отсутствии корреляция между участниками между модуляцией, скорректированной базовым уровнем для каждого условия, и сдвигом смещения в рукописи. Мы ссылаемся на нашу предыдущую статью для подробного спектрального анализа с этой базовой линией для каждого условия без удаления ERP (Kloosterman et al., 2019).

    6) Авторы подчеркивают, что это может быть не тета-амплитуда, а другие характеристики колебаний тета-диапазона, которые способствуют результатам. Это, вероятно, лучше всего было бы исследовать, предоставив анализ данных с полосовой фильтрацией (в идеале приблизительно в более широком диапазоне, охватывающем полосу, в которой были обнаружены различия амплитуд в определенных условиях) и сравнив их с другими полосами или сигналом без полосовой фильтрации.

    Действительно, остается интригующий вопрос, какая именно характеристика сигнала ЭЭГ во временной области лежит в основе связи между mMSE и предвзятостью решения.Поскольку ранее мы обнаружили более сильную колебательную активность в диапазонах частот дельта / тета (2-6 Гц) во фронтальных электродах (Kloosterman et al., 2019), мы исследовали влияние систематического удаления самых низких частот из данных о силе наблюдаемые отношения между мозгом и поведением. Это отражает строгий тест на необходимость узкополосных частотных диапазонов для взаимосвязи между мозгом и поведением. С этой целью мы применили фильтр верхних частот Баттерворта с разными частотами среза к данным во временной области (порядок фильтрации 4, испытания с зеркальным заполнением до 4 с, чтобы обеспечить надежную оценку (Cohen, 2014), а затем применили анализ mMSE. .Чтобы количественно оценить силу корреляции между мозгом и поведением на каждом этапе фильтрации и сделать возможным беспристрастное сравнение по частотам отсечки, мы, наконец, усреднили mMSE в пределах кластера времени-пространства-шкалы времени, который показал сильную отрицательную корреляцию в нашем основном (не фильтрованном) анализе ( см. рис. 3B), а также графики рассеяния корреляции. На рисунке 4 показаны результаты этого анализа для фильтров верхних частот без фильтрации (исходный результат, панель A), 1, 2 и 3 Гц (панели B-D). (Обратите внимание, что мы применили 0.Фильтр верхних частот 5 Гц для непрерывных данных во время предварительной обработки для удаления дрейфа во всех вариантах). Интересно, что мы наблюдаем, что взаимосвязь между мозгом и поведением постепенно ослабевает по мере увеличения частоты среза, так что корреляция незначительна (но все еще отрицательна) после применения фильтра верхних частот 3 Гц перед оценкой энтропии.

    Принимая во внимание, что этот результат предполагает, что эти низкие частоты необходимы для взаимосвязи mMSE-bias, наши предыдущие контрольные анализы, представленные в первоначальной документации, показывают, что статистический контроль мощности 1-2 Гц (дельта) не влияет на взаимосвязь между мозгом и поведением (рис. 3 — приложение к рисунку 3G).Одним из объяснений этих, казалось бы, несовместимых результатов могут быть разные способы обработки колебательной фазы в этих двух анализах: в то время как статистический контроль дельта-мощности полностью игнорирует фазу, анализ фильтрации верхних частот удаляет мощность и фазу из сигнала, прежде чем энтропия вычислено. Более того, управление мощностью игнорирует потенциальные взаимодействия между 1-2 Гц и более высокими частотами (например, тета), которые могут способствовать взаимосвязи. Взятые вместе, эти анализы показывают, что самые низкие частоты, присутствующие в данных, могут играть роль в соотношении энтропия-поведение, возможно, за счет нелинейных взаимодействий между спектральной мощностью и спектральной фазой этих частот.Мы добавили этот анализ к рукописи и предлагаем рассмотреть точные нелинейные отношения между энтропией, спектральной мощностью и фазой в будущей работе.

    [Примечание редакции: до принятия были предложены дальнейшие изменения, как описано ниже.]

    Однако остались следующие проблемы, которые необходимо решить:

    1) Рецензенты были более или менее убеждены в изложении авторов, что корреляции между участниками улавливают нечто иное, чем основные эффекты, связанные с условиями.Однако они оба считали, что интерпретировать этот эффект как

    было бы преувеличением.

    «стратегический» — что действительно потребовало бы главного эффекта консервативного против либерального условия. Оба рецензента отметили, что основные положения документа не зависят от того, является ли это истинным стратегическим, контролируемым сверху вниз эффектом, и поэтому мы хотели бы, чтобы вы смягчили эти утверждения.

    Более подробно, баллов от каждого из рецензентов:

    «Аргумент авторов:« одни участники могли использовать правильную, а другие неправильную стратегию »(раздел« Обсуждение ») неудовлетворительны.Если бы это было так, то подгруппа участников с высокой разницей в поведенческих консервативных и либеральных критериях должна была бы показать более сильную корреляцию между мозгом / поведенческими изменениями / изменениями, чем подгруппа участников с низкой разницей между поведенческими конфликтами и либами. Это другой прогноз (т. Е. Взаимодействие между поведенческими различиями (группой) и корреляцией изменение / изменение), чем наличие существенной корреляции изменение / изменение как таковое. Из рисунка 3B ясно, что такого взаимодействия в данных нет.Обратите внимание, что я * не * предлагаю авторам действительно проверять это взаимодействие! Это чрезвычайно производный процесс и потребует гораздо большего количества участников, чем здесь присутствует. Я упоминаю это, чтобы показать, что аргумент авторов, почему корреляция может быть следствием стратегического эффекта, неверен. Вместо этого авторам, вероятно, следует признать, что описанные здесь эффекты, скорее всего, не имеют стратегического характера ».

    и

    «Я ценю полное обсуждение ситуации среднего и изменчивости. Я полностью согласен с тем, что корреляции и средние эффекты предоставляют ортогональную информацию и что логически возможно, что одна половина участников поступает стратегически правильно, а другая — неправильно. вещь, приводящая к устойчивым эффектам изменения-изменения при отсутствии средних различий.Моя точка зрения заключается в том, что мне кажется довольно неправдоподобным, что наш мозг обеспечивает стратегический механизм для такой фундаментальной проблемы, как установка критериев, которую только половина людей может использовать адаптивным образом. Мне интересно, может ли альтернативная интерпретация заключается в том, что вариабельность увеличивается и уменьшается эндогенно и / или различается у разных людей неконтролируемым образом, и что только посредством дополнительного стратегического процесса (например, индексируемого с помощью тета-активности) эта вариабельность ограничивается. в сторону воздействия на установку порога.Другими словами, каждый знает, когда нужно дотянуться до молотка, когда нужно забить гвоздь, но качество молотка варьируется между людьми (и внутри них). (Возможно, это даже то, что можно проверить в рамках предметного анализа, изучив взаимодействие между повышением тета и энтропией при влиянии на поведение.) «

    Мы ценим аргументы рецензентов, ставящие под сомнение наш предыдущий вывод о том, что стратегическая модуляция нейронной изменчивости лежит в основе сдвига смещения стратегического решения.Хотя мы утверждаем, что основной эффект нейронной изменчивости не говорит о том, мог ли человек быть более или менее стратегическим, чем другой (что зависит от индивидуальных различий), мы согласны с тем, что оба наших общего вывода о стратегическом происхождении нейронной изменчивости сдвигаются: а также их причинная роль в корректировке поведенческой предвзятости, возможно, были неоправданными с учетом имеющихся данных. По этой причине мы решили оставаться ближе к данным и теперь интерпретируем результаты в свете адаптивного когнитивного процесса, который экспериментальные манипуляции с предвзятостью требовали от субъектов, чтобы избежать штрафов.Это ослабляет предположение, что эти нейронные сдвиги возникли в результате стратегического процесса, и учитывает неделеративные факторы, сохраняя при этом центральное представление, поддерживаемое экспериментальным планом, что эти сдвиги являются поведенческими адаптивными. Хотя мы считаем, что действительно очень вероятно, что субъекты могли сознательно и стратегически реализовывать определенный образ мышления при выполнении задачи (что также предполагает фронтальная топография корреляции), для детальной оценки этого потребуются дополнительные эксперименты для проверки, включая e.грамм. устные отчеты субъектов стратегии, использованных для решения задачи. Чтобы отразить эту измененную позицию, наша интерпретация в разделе «Обсуждение» теперь выглядит следующим образом:

    «Здесь мы представляем первое свидетельство того, что большие сдвиги смещения типичны у тех субъектов, которые демонстрируют большие сдвиги во фронтальных мМСЭ после появления стимула, предполагая, что мМСЭ обеспечивает основную сигнатуру таких адаптивных поведенческих сдвигов».

    Наконец, мы теперь воздерживаемся от проведения прямых связей между mMSE и стратегией в рукописи и изменили название рукописи, чтобы лучше отразить корреляционный характер наших результатов (mMSE «отслеживает» сдвиг смещения, а не «лежит в основе»).Мы надеемся, что это должным образом решит опасения рецензентов, что сдвиги нейронной изменчивости могли не иметь стратегического значения.

    2) Один из рецензентов отметил, что они все еще хотят видеть «сырые» значения mMSE. Ответ авторов («построить mMSE сложно, потому что он имеет измерения время / пространство / шкала времени») очень неубедителен, поскольку на рисунке 3A они показывают значения корреляции изменение / изменение точно для этих трех измерений. Итак: авторам следует просто показать два графика, точно как на рисунке 3A, один для либерального, другой для консервативного, показывая при этом необработанные значения mMSE (усредненные по условию и предмету), а не корреляции изменения / изменения.Каналы, выбранные для цветового графика времени / шкалы времени, должны быть идентичны тем каналам, которые получены из кластерного теста корреляции изменений / изменений, а вокселы шкалы времени / шкалы времени для топографической диаграммы также должны быть идентичны тем, которые были выбраны для этого теста (так что в основном используйте тот же набор данных, что и на рисунке 3A; нет необходимости отдельно проверять mMSE на ноль или что-то еще). Добавление этих графиков (если авторы предпочитают: в качестве дополнения) имеет решающее значение для читателей, чтобы понять, какие аспекты сигнала mMSE (и производных показателей mMSE-change и их корреляции с поведением) улавливаются, и, таким образом, позволить им чтобы оценить важность выводов здесь.

    Мы согласны с рецензентом в том, что полезно иметь некоторую интуицию в отношении фактических значений mMSE в двух условиях, чтобы оценить корреляцию изменения-изменения в поведении. Таким образом, мы выполнили просьбу рецензентов и теперь сообщаем усредненные по предметам топоплоты и цветные графики mMSE в рамках значимого корреляционного кластера, указанного на рисунке 3A, отдельно для двух условий (см. Рисунок 3 — приложение к рисунку 1). В самом деле, мы видим, что на усредненном по субъекту уровне mMSE для этих двух состояний очень похожи, что согласуется с нашим ранее сообщенным отсутствием основного эффекта состояния.Вычитание двух условий действительно показывает только небольшие несущественные различия между условиями (см. Рисунок 3 — дополнение к рисунку 1, нижние панели). Этот рисунок еще раз подчеркивает диссоциацию между основными эффектами и корреляцией в наших данных: хотя мы не видим основного эффекта от состояния, мы наблюдаем сильную корреляцию между участниками между либерально-консервативными сдвигами в mMSE и критериях (Рисунок 3).

    3) Было предложено показать корреляции в некоторой сжатой форме отдельно для либеральных и консервативных условий (помимо средних значений).Оценка разницы предполагает, что оба условия вносят свой вклад, но это не обязательно. Например, по крайней мере возможно, что отношения создаются только через либеральное условие, тогда как эффект изменчивости может быть подавлен в консервативном условии (что фактически усилило бы аргумент стратегии). Маловероятно, но стоит изучить.

    Чтобы изучить эту возможность, мы повторили корреляцию отдельно для консервативных и либеральных условий и обнаружили слабые, незначимые, отрицательные корреляции в обоих (консервативные: rho = –0.12, p = 0,66, либеральный: rho = –0,21, p = 0,43). Более того, мы не обнаружили существенной разницы в силе корреляции между условиями (либерально-консервативный ∆rho = –0,09, p = 0,7, непараметрический тест разницы корреляций, 10.000 перестановок), что позволяет предположить, что корреляция не определяется только одним из два условия. Скорее, это открытие предполагает, что сосредоточение внимания на сдвиге смещения путем вычитания внутри субъекта действительно необходимо, чтобы выявить связь с поведением, и что оба условия вносят свой вклад.Теперь мы сообщаем об этих результатах в подразделе «Отношение энтропии к смещению не объясняется общим изменением сигнала или спектральной мощностью».

    https://doi.org/10.7554/eLife.54201.sa2

    Вакцинация против ВИЧ антагонистом IL-4R слизистой оболочки с бустером SOSIP-gp140 может индуцировать высококачественные цитотоксические CD4 + / CD8 + Т-клетки и гуморальные реакции у макак

  • 1.

    Excler, J.-L. И Майкл, Н. Л. Уроки испытаний эффективности вакцины против ВИЧ-1. Curr. Opin. ВИЧ СПИД 11 , 607–613.https://doi.org/10.1097/COH.0000000000000312 (2016).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 2.

    Kelleher, A. D. et al. Рандомизированное плацебо-контролируемое испытание фазы I первичной ДНК, рекомбинантной бустерной профилактической вакцины против ВИЧ-1, вызванной вирусом оспы птиц. AIDS (Лондон, Англия) 20 , 294–297 (2006).

    CAS Статья Google Scholar

  • 3.

    Hammer, S. M. et al. Испытание эффективности профилактической вакцины против ВИЧ-1 ДНК / rAd5. N. Engl. J. Med. 369 , 2083–2092. https://doi.org/10.1056/NEJMoa1310566 (2013).

    ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 4.

    McCormack, S. et al. EV02: Испытание фазы I для сравнения безопасности и иммуногенности буста NYVAC-C первичной ДНК-C ВИЧ с только NYVAC-C. Вакцина 26 , 3162–3174. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.02.072 (2008).

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 5.

    Hemachandra, A. et al. Рекомбинантная буст-вакцина против вируса оспы птиц с первичной ДНК клады ВИЧ-1 A / E безопасна, но не является иммуногенной в рандомизированных испытаниях фазы I / IIa на тайских добровольцах с низким риском заражения ВИЧ. Hum. Вакцины 6 , 835–840.https://doi.org/10.4161/hv.6.10.12635 (2010).

    CAS Статья Google Scholar

  • 6.

    Rerks-Ngarm, S. et al. Вакцинация ALVAC и AIDSVAX для предотвращения заражения ВИЧ-1 в Таиланде. N. Engl. J. Med. 361 , 2209–2220. https://doi.org/10.1056/NEJMoa0