Как настроить таргетинг по ключевым словам ВКонтакте — Маркетинг на vc.ru

3285 просмотров

Гибрид контекстной рекламы и таргета — так можно назвать очередное обновление ВКонтакте. Теперь в этой соцсети возможно настраивать таргетинг по ключевым словам. Хотите узнать, что это такое и почему это поможет сэкономить на рекламе — читайте статью от Madwins.

Что такое таргетинг по ключевым словам

Таргетинг по ключевым словам — это новый инструмент сбора целевой аудитории в рекламном кабинете ВКонтакте. Он позволяет искать ЦА по поисковым запросам.

Как таргетинг по ключевым словам поможет сэкономить на рекламе

Если искать ЦА по интересам и поведению, то в результате можно получить широкий набор пользователей. Есть вероятность показа рекламы тем, кто в ней мало заинтересован. Так можно потратить деньги на неэффективные связки.

Аудитория, на которую идет реклама, настроенная с помощью “ключевиков” — это аудитория со сформировавшимся спросом.

То есть более теплая, а значит — лояльная.

С помощью ключевых слов можно сузить ЦА, что позволяет снизить стоимость целевого действия и тем самым сэкономить на рекламе.

Как настроить таргетинг по ключевым словам

В рекламном кабинете ВКонтакте в настройках есть раздел “ключевые фразы”. В окошко нужно ввести слова, которые вы заранее выбрали для рекламной кампании.

Как подобрать ключевые запросы

Таргетинг по ключевым словам подразумевает тщательный подбор запросов для вашей рекламной кампании.

Запросы не должны быть:

• низкочастотными;
• высокочастотными;
• слишком короткими или чересчур длинными — 2 или 3 слова будут оптимальны.

Слишком низкочастотные запросы, например, “кашпо ручной работы для орхидей на Патриарших прудах” вряд ли даст достаточную для таргета аудиторию. А высокочастотный запрос “горшок” покажет чересчур широкий набор пользователей — мамы которые ищут своим чадам “ночные вазы”, почитатели таланта звезды панк-рока, цветоводы-любители.

Большой риск показать объявление не тем, кому это пригодится. То есть такой подход к выбору запроса сэкономить на рекламе не поможет.

Типы ключевых запросов

Для рекламной кампании нужно определить тип ключевого запроса.

• Брендовый запрос — содержит фразы напрямую обозначающие название продукта или бренда.

• Конкуренты — в запросе есть упоминания бренда конкурента или его продукта.

• Запросы по услугам или категориям товаров. В этих ключевиках должны находится категории, ниши, наименования товаров или услуг. Эффективнее “ключи” этого типа работают при наличии таких слов, как “купить”, “цена” или “заказть”.

• Синонимы. Для оптимизации РК можно добавлять слова с одинаковым смыслом, которые могут вбивать люди в строку поиска. Так для слова “смартфон”, синонимами будут — “телефон” или “мобильный телефон”.

• Жаргонизмы — разговорные названия товара. Например, для смартфонов, жаргонизмами будут слова — “мобильник”, “мобила”.

• Ошибки — слова, набранные в поиске неправильно. Обычно такое бывает, когда иностранное слово набирают кириллицей, а не латиницей.

• Околотематические или сопутствующие — запросы из соседних ниш. Например, для “дизайна квартиры”, сопутствующим может быть запрос “ремонт в квартире”.

Что нужно учитывать запуская таргетинг по ключевым словам

При выборе ключевиков нужно понимать, что подсказки, которые всплывут в рекламном кабинете не всегда могут помочь. Например, слишком широкие рекомендуемые запросы лучше не использовать, чтобы не тратить лишних денег из рекламного бюджета.

Также можно добавить минус-фразы, то есть слова по которым ваше объявление не будет показываться. Применять эти фразы нужно для каждого из ключевиков.

Чтобы указать, за сколько дней целевая аудитория искала нужный товар или услугу укажите период поиска. Причем, чем продукт дороже, тем длиннее временной отрезок.

Таргетинг по ключевым словам: особенности

Особенности актуальные для таргета по ключевикам:

• в одной фразе не более 128 символов;
• количество фраз вместе с минус-фразами — не более 150;
• в поле не больше 4500 символов;
• в период поиска можно вводить от 1 до 30 дней.

Таргетинг по ключевым словам доступен для всех типов и форматов оплаты.

Также нужно учитывать, что для ключевых запросов не надо искать разные формы слов — числа и падежи значения не имеют. Но разные части речи будут рассматриваться алгоритмом, как разные фразы. Например, “купить смартфон” и “купить смартфоны” — равнозначные ключевики. А запросы “кухонные весы” и “весы для кухни” дадут разные результаты.

Таргетинг по ключевым запросам — еще один шаг в развитии платной рекламы в ВКонтакте. Но при использовании инструмента нужно хорошо знать свою целевую аудиторию. Понимание того, что будет искать ваша ЦА, а что — не будет, можно почерпнуть из анализа ваших сегментов потребителей. В этом, кстати, могут помочь интеллект-карты. О них на сайте Madwins есть подробная статья. Можете почитать ее здесь.

А если вы хотите, чтобы мы сделали за вас всю работу по продвижению ваших сообществ, страниц и профилей в соцсетях — то свяжитесь с нами. Менеджеры ответят на вопросы.

Геотаргетинг в Instagram, Facebook и Вконтакте: настройка и повышение эффективности

Как настроить геотаргетинг в социальных сетях

Геотаргетинг в Instagram, Facebook и ВКонтакте — эффективный способ привлечь новых покупателей и напомнить о вашем бизнесе существующим клиентам. Что такое таргетинг по местоположению и как его использовать в рекламных кампаниях? Читайте дальше, чтобы получить инструкции и советы по настройке и запуску объявлений на желаемые локации.

Поделиться

Геотаргетинг в Instagram, Facebook и ВКонтакте — эффективный способ привлечь новых покупателей и напомнить о вашем бизнесе существующим клиентам. Что такое таргетинг по местоположению и как его использовать в рекламных кампаниях? Читайте дальше, чтобы получить инструкции и советы по настройке и запуску объявлений на желаемые локации.

Что такое геотаргетинг и зачем он нужен

Геотаргетинг в социальных сетях — это инструмент, позволяющий показывать рекламу людям, которые находятся или часто посещают определенное место. Это может быть страна, город, улица или дом. Он нужен, чтобы найти максимально заинтересованную аудиторию и исключить нерелевантную, например, жителей других регионов или районов.

Данные для геотаргетинга собираются социальными сетями из описаний пользователей — граф с местом проживания и работы. Также информация поступает в рекламные кабинеты благодаря IP-адресам, GPS, мобильному трафику и Wi-Fi.

Преимущества таргетинга по геолокации

1. Помогает локальному бизнесу быть замеченным. Геотаргетинг в Instagram, Facebook и ВКонтакте хорошо подходит для рекламы кафе, магазинов, салонов красоты и других локальных заведений.
2. Экономит рекламный бюджет. Благодаря грамотно настроенному таргетингу по местоположению ваши объявления будут показываться только в тех локациях, где вы хотите.
3. Увеличивает количество покупателей. Если настроить объявления на аккаунты людей, которые живут или часто посещают ваш район, конверсия будет выше.
4. Позволяет протестировать продукт на актуальность. Благодаря геотаргетингу можно выяснить спрос на товар в определенной локации.
5. Приносит «горячую» аудиторию при настройке на адреса конкурентов. Эти люди уже задумываются о покупке аналогичного продукта — вам останется лишь сделать им более выгодное предложение.

Геотаргетинг в Instagram

Настройка геотаргетинга из Instagram-аккаунта

При продвижении публикаций прямо в приложении вы можете выбрать две опции настройки геотаргетинга:

1. Региональный уровень. Введите в поисковую строку страны или города, по которым хотите продвигаться. Разработчики предлагают добавлять сразу несколько местоположений, чтобы охватить наибольшую территорию.
2. Местный уровень. Продвижение на выделенную зону — окружность, центром которой может быть как ваше текущее местоположение, так и любой другой адрес. Радиус показа объявлений — от 1 до 30 км.

Настройка геотаргетинга через приложение Instagram

Настройка геотаргетинга в Instagram через кабинет Facebook

Еще один способ настроить таргетинг по местоположению в Instagram — воспользоваться рекламным кабинетом Facebook Ads Manager. Чтобы запустить свои объявления на желаемую локацию, в меню настройки РК найдите блок «Аудитория», а в нем — пункт «Местоположение».

Пункт «Местоположение» в меню настройки РК в Facebook Ads Manager

Важно! Прежде чем настраивать рекламную кампанию, убедитесь, что ваши бизнес-аккаунты в Instagram и Facebook связаны между собой.

Настройка одного местоположения

Рекламный кабинет Facebook предоставляет на выбор несколько аудиторий для геотаргетинга:

1. Люди, которые живут или недавно были в указанном месте.
2. Люди, живущие в указанном месте.
3. Недавние посетители.
4. Путешественники — люди, которые недавно были в указанном месте, но живут на расстоянии более 125 км от него.

Выбрать нужный тип можно в выпадающем меню. Не забудьте указать саму локацию — напишите ее название в поисковую строку рядом.

Строка поиска местоположений в меню настройки РК

Помимо стран и городов, в качестве местоположения вы можете выбрать конкретный адрес и указать радиус показа объявлений от 1 до 80 км.

Выбор радиуса показа объявлений

Настройка нескольких местоположений

Объявление можно показывать в более чем одной локации:

1. Нажмите на кнопку «Добавить сразу несколько местоположений»;
2. Выберите тип местоположения: страны, города, регионы, индексы или адреса;
3. Выберите радиус — от 1 до 80 км;
4. Напишите название локации в окошко формы;
5. Нажмите «Сопоставить местоположение» и «Добавить геоданные».

Форма добавления нескольких местоположений

Кнопка «Добавить геоданные»

Геотаргетинг в Facebook

Настройка геотаргетинга для Facebook ничем не отличается от настройки таргетинга по местоположению для Instagram. Все процессы проходят в одном аккаунте Facebook Ads Manager.

Чтобы настроить геотаргетинг для Facebook, в пункте «Места размещения» в меню настройки РК поставьте галочки напротив площадок Facebook. Аналогично — для Instagram: чтобы объявления показывались там, поставьте галочки напротив мест размещения в этой социальной сети.

Выбор места размещения рекламы в Facebook Ads Manager

Рекомендации экспертов

1. Некоторые страны могут не попасть в настройки геотаргетинга — это места, в которых использование Facebook и Instagram запрещено на законодательном уровне. Помните об этом, если настраиваете таргетинг на несколько обширных локаций сразу.
2. Если вы не хотите, чтобы ваше объявление показывалось в определенных локациях, добавьте их в кампанию как исключенные. Для этого поставьте галочку рядом со словом «Исключить» в пункте «Местоположение» и введите название географической точки.

   
   Исключение местоположений в Facebook Ads Manager
   

3. Если вы хотите показывать объявления одновременно и на крупные, и на небольшие города — сделайте несколько рекламных кампаний. Цена клика зависит от количества жителей в населенном пункте — так вы сэкономите рекламный бюджет.
4. Учитывайте при выборе радиуса показа объявлений, что в англоязычной версии Facebook Ads Manager расстояние измеряется в милях, а не километрах. В одной миле 1,61 километра.

Геотаргетинг во ВКонтакте

Особенности таргетинга по локации во ВКонтакте

Геотаргетинг во ВКонтакте настраивается в меню запуска рекламной кампании — раздел «Настройка целевой аудитории», пункт «География». Система предлагает на выбор два варианта таргетинга по местоположению — «Города и регионы» и «Выбрать на карте».

Таргетинг по городам и регионам

1. Поставьте отметку у варианта «Города и регионы».
2. Выберите страну. Если хотите показывать объявления всему миру, выбирайте «Любая».
3. Введите название страны или региона. Можно выбрать несколько вариантов.
4. Если хотите исключить какие-то локации из РК, введите их в поле строки «За исключением».

Настройка таргетинга по городам и регионам в ВК

Таргетинг по геометкам

1. Поставьте отметку у варианта «Выбрать на карте»;
2. Выберите тип мест — «регулярно бывает», «дом», «работа», «сейчас находится»;
3. Выберите место — страну, город или конкретный адрес. Здесь же укажите радиус показа — от 500 м до 40 км.;
4. Если хотите таргетироваться на несколько локаций, добавьте их через кнопку «Добавить несколько мест».

Настройка таргетинга по геометкам в ВК

Рекомендации экспертов

1. Ставьте геометки не только рядом со своим бизнесом, но и на локации других компаний. Например, если вы владелец ресторана — настройте геотаргетинг на адреса вокзалов и отелей, чтобы к вам приходили путешественники. Если продаете товары для детей — включите в геотаргетинг адреса детских садов и школ.
2. Не все бизнесы могут таргетироваться только на местных жителей, прохожих и путешественников. Такой вариант отлично сработает, например, для кофейни, но не подойдет для тату-студии. Если у вашего бизнеса специфическая аудитория, добавьте к настройкам по местоположению во ВКонтакте и другие — демографию, интересы, ключевые фразы и прочее.
3. Геотаргетинг во ВКонтакте и других социальных сетях не подходит для рекламы экстренных услуг сантехника, электрика и подобных специалистов. Пока пользователь появится в зоне показа ваших объявлений, ему уже не будет нужна помощь в ремонте протекающей трубы.

Оглавление

Что ещё почитать

Как разблокировать аккаунт в Яндекс Директе?

Заблокировали аккаунт Яндекс Директе? Давайте разберемся, почему это произошло и что можно сделать, чтобы вернуть к работе рекламный кабинет. О причинах блокировки и способах их избежать читайте в этой статье.

Коэффициент вовлеченности: применение и расчет показателя

Engagement rate, или коэффициент вовлеченности — метрика в маркетинге, которая показывает, работает ли ваша SMM-стратегия или пора ее поменять. Что это за показатель, как его посчитать по формуле и использовать для повышения охватов и продаж — узнайте в этой статье.

Гайд по заголовкам в объявлениях Яндекс Директ

Первый и второй заголовки в объявлениях Яндекс Директа — самые важные элементы контекстной рекламы. Именно они привлекают внимание потенциального клиента и определяют, перейдет он на сайт или нет. Что и как написать в заголовке 1 и заголовке 2 — узнайте в этой статье.

Ноябрьский выпуск — Информационный бюллетень | VK Transformation

90% малых и средних предприятий и нишевых розничных брендов упускают свой шанс – большое время

Помимо разработки продукта, успех продукта часто определяется тем, как он продвигается на рынок своей целевой аудитории. За последние несколько лет VK Transformation (VKT) работала с многочисленными клиентами из числа малого и среднего бизнеса, которые столкнулись со слабыми показателями бизнеса, несмотря на их сильные уникальные торговые предложения, из-за отсутствия опыта продаж и маркетинга, а также неспособности должным образом использовать данные о клиентах.

​

 

С наступлением цифровой эпохи и ростом электронной коммерции с Covid-19 использование науки о данных и, в частности, искусственного интеллекта (ИИ) в качестве инструмента в маркетинге стало необходимо выделиться из растущей конкуренции. Это особенно актуально для компаний, которые успешно построили и расширили свое присутствие, но достигли потолка роста, обнаружив, что им трудно развивать свой бизнес с огромным количеством данных о клиентах, которые остаются неиспользованными. Согласно отчету Adobe, только 12% небольших организаций используют ИИ для маркетинга.

Наука о данных, искусственный интеллект и технологии машинного обучения и как они могут помочь предприятиям

Хотя мы работаем с малыми и средними предприятиями на разных этапах их жизненного цикла (как показано на этой диаграмме), важно понимать, что использование науки о данных, искусственного интеллекта и машинного обучения может помочь предприятиям повысить эффективность продаж.

Ускорение цифрового роста с помощью анализа данных и искусственного интеллекта

Создание цифрового присутствия бренда

Бизнес-задача

Компании сталкиваются с трудностями при масштабировании своего цифрового присутствия и узнаваемости бренда, чтобы не отставать от меняющегося пути и поведения клиентов.

Улучшение цифровых результатов

Business Challenge

Из-за конкурентной среды многие компании сталкиваются с трудностями в преобразовании посетителей веб-сайтов в квалифицированных лидов, клиентов и сторонников бренда с помощью рекламных и органических кампаний.

​

Business Challenge

Интенсивная конкуренция и неэффективный таргетинг привели к тому, что многие компании не смогли повысить рентабельность инвестиций в рекламу (ROAS) и стоимость привлечения клиента (CPA).

В соответствии с сотрудничеством, которое является одной из наших основных ценностей, VKT выбрала партнерство с Alavi.ai, чтобы дополнить наши решения в области цифрового брендинга, продаж и маркетинга для клиентов, благодаря своему большому опыту в этой области и доступным ценам, которые связаны с сильно с нашей страстью в оказании помощи МСП.

Что цифровые маркетологи могут сделать, чтобы улучшить результаты всего за 30 дней?

Когда предприятия электронной коммерции достигают порога роста, мы сотрудничаем с Alavi.ai, приложением для маркетинговой аналитики на базе искусственного интеллекта, которое использует точный таргетинг, чтобы помочь МСП прибыльно увеличить свои доходы в Интернете. Он разработан, чтобы быть всеобъемлющим, простым в использовании и доступным.

​

Используя науку о данных, искусственный интеллект и машинное обучение, Alavi.ai извлекает и анализирует данные веб-аналитики, рекламных платформ и CRM онлайн-бренда, чтобы повысить эффективность на каждом этапе воронки маркетинга и продаж.

. основные новшества включают: 

Способность значительно повысить рентабельность инвестиций в рекламу (RoAS) онлайн-бренда менее чем за 30 дней

Помогает брендам привлекать новых клиентов, конвертировать посетителей, которые не совершали покупок, и увеличивать повторные покупки существующих клиентов

Использует науку о данных, искусственный интеллект, машинное обучение и автоматизация для предоставления экспертных рабочих процессов, которые цифровые маркетологи всех уровней могут использовать для достижения значительного роста доходов

Помогите цифровым маркетологам всех уровней сэкономить значительное количество времени на запуске кампаний и управлении ими

Трансформация Far East Flora с помощью Alavi x VKT

Из-за возросшей конкуренции и более широкого охвата, в попытке расширить клиентскую базу команда FarEastFlora. com не получила ожидаемого ROI от своих маркетинговых инвестиций, что привело к свое решение о привлечении ВКТ.

​

Мы сотрудничали с Alavi, которая использовала свой механизм искусственного интеллекта для определения продуктов для рынка и целевых аудиторий, которые компания затем использовала для увеличения доходов без ущерба для своей прибыли. Всего за 3 недели FEF Singapore удалось ускорить рост рентабельности: RoAS увеличился на 21,75%, а AOV — на 20,33%. Сегодня команда FEF продолжает сотрудничество с VKT и Alavi.

Хотите узнать больше о том, как наука о данных и ИИ могут максимизировать отдачу от цифрового маркетинга для вашего бизнеса электронной коммерции?

​

1. Есть ли у вашего онлайн-бизнеса 10 тысяч посетителей в месяц и 1 тысяча онлайн-транзакций? Ускорьте свой рост с помощью автоматизированного искусственного интеллекта и обработки данных Alavi. Узнайте больше о приложении и попробуйте его бесплатно здесь

2. Еще не готово? Позвольте нам помочь! Запишитесь на бесплатную консультацию о том, как построить и развить свою электронную коммерцию

бизнес с нашими подходами, основанными на данных, производительности и клиентоориентированности здесь

Попробуйте бесплатно

Я хочу узнать больше

ПРИСОЕДИНЯЙТЕСЬ К НАМ СЕГОДНЯ!

ДЛЯ ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ИНФОРМАЦИИ СВЯЖИТЕСЬ С НАШЕЙ КОМАНДОЙ

Чтобы помочь предприятиям ускорить восстановление своего бизнеса с максимальной поддержкой, для программы VKT GO Digital доступен грант на развитие предпринимательства. Для местных компаний SG доступная финансовая поддержка выглядит следующим образом:

*только до конца сентября 2021 года

Если вам интересно узнать, как EDG может помочь в достижении ваших бизнес-целей, свяжитесь с нами по адресу info@vktransformation.com сегодня!

Вивьен Кох

Основатель и управляющий директор

Практикующий консультант по управлению

Шерил Чиа

Аналитик по перфоманс-маркетингу

Сэмми Чан

Консультант по цифровому маркетингу

5

50002 Консультант по цифровому маркетингу

Свяжитесь с нами

Для получения дополнительной информации перейдите по ссылке: https://www. vktransformation.com. Свяжитесь с нами на нашем веб-сайте и не стесняйтесь делиться новостной рассылкой.

Комплексное протеомное профилирование идентифицирует ось рецепторов андрогенов и другие сигнальные пути как мишени для микроРНК, подавленных при метастатическом раке предстательной железы

Сравнительное исследование

. 2016 5 мая; 35 (18): 2345-56.

doi: 10.1038/onc.2015.295. Epub 2015 14 сентября.

С Коарфа ^{1 2} , В. Фискус ^{1 3} , В. К. Эдунури ⁴ , К Раджапакше ¹ , К. Фоули ^{1 3} , S A Chew ^{1 3} , С. С. Шах ^{1 3} , С Генг ^{1 3} , Дж Шоу ³ , Дж. С. Мохамед ³ , Б.В. О’Мэлли ¹ , Н Митсиадес ^{1 2 3}

Принадлежности

• ¹ Кафедра молекулярной и клеточной биологии, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас, США.
• ² Онкологический центр Дэна Л. Дункана, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас, США.
• ³ Медицинский факультет, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас, США.
• ⁴ Адриенн Хелис Фонд медицинских исследований Малвина, Новый Орлеан, Луизиана, США.

• PMID: 26364608
• PMCID: PMC5915337
• DOI: 10.1038/onc.2015.295

Бесплатная статья ЧВК

Сравнительное исследование

C Coarfa et al. Онкоген. 2016 .

Бесплатная статья ЧВК

. 2016 5 мая; 35 (18): 2345-56.

doi: 10.1038/onc.2015.295. Epub 2015 14 сентября.

Авторы

С Коарфа ^{1 2} , Вт Фискус ^{1 3} , В. К. Эдунури ⁴ , К Раджапакше ¹ , К. Фоули ^{1 3} , С. А. Чу ^{1 3} , С. С. Шах ^{1 3} , C Gen ^{1 3} , Дж Шоу ³ , Дж. С. Мохамед ³ , Б. В. О’Мэлли ¹ , Н Митсиадес ^{1 2 3}

Принадлежности

• ¹ Кафедра молекулярной и клеточной биологии, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас, США.
• ² Онкологический центр Дэна Л. Дункана, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас, США.
• ³ Медицинский факультет, Медицинский колледж Бейлора, Хьюстон, Техас, США.
• ⁴ Адриенн Хелис Фонд медицинских исследований Малвина, Новый Орлеан, Луизиана, США.

• PMID: 26364608
• PMCID: PMC5915337
• DOI: 10. 1038/onc.2015.295

Абстрактный

МикроРНК являются важными эпигенетическими регуляторами экспрессии белков, запуская деградацию мРНК-мишеней и/или ингибируя их трансляцию. Сообщалось о нарушении регуляции экспрессии микроРНК при некоторых видах рака, включая рак предстательной железы (РПЖ). Мы всесторонне охарактеризовали протеомный след панели из 12 микроРНК, которые сильно подавляются при метастатическом РПЖ (SiM-миРНК: миР-1, миР-133а, миР-133b, миР-135а, миР-143-3p, миР-145- 3p, миР-205, миР-221-3p, миР-221-5p, миР-222-3p, миР-24-1-5p и миР-31) с использованием протеомных массивов с обращенной фазой. Повторная экспрессия этих SiM-миРНК в клетках РПЖ подавляла пролиферацию клеток и нацеливалась на ключевые пути онкогенеза, включая клеточный цикл, апоптоз, мишень Akt/млекопитающих для передачи сигналов рапамицина, метастазирование и ось рецептора андрогена (AR). Однако только 12%, самое большее, этих наблюдаемых изменений экспрессии белков могут быть объяснены предсказанным прямым связыванием микроРНК с соответствующими мРНК, что указывает на то, что большинство этих протеомных эффектов являются косвенными. AR и его коактиваторы стероидных рецепторов (SRC; SRC-1, -2 и -3) периодически подвергались воздействию этих SiM-миРНК. В соответствии с этим мы выявили обратную корреляцию между экспрессией этих SiM-миРНК и ранним клиническим рецидивом, а также с транскрипционной активностью AR в тканях РПЖ человека. Мы также выявили сильную индукцию miR-135a андрогеном и сильное прямое связывание AR с локусом miR-135a. Поскольку miR-135a сильно подавляет экспрессию AR, это приводит к петле отрицательной обратной связи, которая подавляет экспрессию белка AR андроген-зависимым образом, в то же время дерепрессируя экспрессию AR при андрогенной депривации. Наши результаты демонстрируют, что эпигенетическое замалчивание этих SiM-миРНК может привести к увеличению активности оси AR и пролиферации клеток, что способствует прогрессированию заболевания. Мы также демонстрируем, что петля отрицательной обратной связи с участием миР-135a может восстанавливать экспрессию AR в условиях андрогенной депривации, тем самым способствуя повышению экспрессии белка AR при кастрационно-резистентном РПЖ. Наконец, наше беспристрастное протеомное профилирование демонстрирует, что большинство фактических изменений экспрессии белков, вызванных SiM-miRNAs, не могут быть объяснены на основе предсказанных прямых взаимодействий.

Заявление о конфликте интересов

Конфликт интересов: Все авторы заявляют, что у них нет финансовых конфликтов интересов, о которых следует сообщать.

Цифры

Рисунок 1. Анализ микроРНК, подавленных в…

Рисунок 1. Анализ микроРНК, супрессированных в metPC (SiM-миРНК)

А . Биоинформатический анализ…

Рисунок 1. Анализ микроРНК, подавленных в metPC (SiM-миРНК)

А . Биоинформационный анализ уровней экспрессии miRNA в 14 образцах metPC по сравнению с 28 нормальными образцами простаты из набора данных GSE21036 позволил выбрать четырнадцать микроРНК со значительно сниженной экспрессией в metPC (SiM-miRNAs, P<0,05 для всех по t-критерию) для дальнейшего анализа. Из этих 14 микроРНК тринадцать также были подавлены в 99 первичных образцов ПК из того же набора данных по сравнению с нормальной простатой. * указывает значения p < 0,01; ** указывает на значения p < 0,001; *** указывает значения p <0,0001, определенные с помощью двустороннего t-критерия. Б . Анализ метилирования ДНК в промоторе каждого локуса гена SiM-микроРНК в образцах metPC по сравнению с нормальными образцами простаты в наборе данных GSE38240, который содержит 4 нормальных (N) и 8 образцов metPC (Met) пациентов, проанализированных с помощью Illumina Infinium Human Methylation 450K. Набор чипов для бисера. Наши результаты включают 12 SiM-миРНК на 8 диаграммах, поскольку некоторые из SiM-миРНК встречаются в одном и том же гене-хозяине или в кластерах. Уровни метилирования ДНК значительно повышены (p < 0,05) в metPC в двенадцати из четырнадцати локусов SiM-миРНК: MIB1 (ген-хозяин miR-1 и miR-133a), miR-31HG (ген-хозяин miR-31), RMST (ген-хозяин miR-135a-5p), MIR143HG (ген-хозяин miR-143-5p, miR-143-3p и miR-145-3p), miR-221-5p/miR-221-3p/miR -222, миР-205 HG (ген-хозяин миР-205) и ген-хозяин миР-24-1-5p. В этом наборе данных не наблюдалось значительных различий в метилировании CpG в локусах, проанализированных для miR-133b или miR-204 (p > 0,05).

Рисунок 2. A. Экспрессия SiM-миРНК…

Рисунок 2. A. Экспрессия SiM-миРНК связана с клиническим исходом при первичном РПЖ

Мы…

Рисунок 2. A. Экспрессия SiM-миРНК связана с клиническим исходом при первичном РПЖ.

Мы ранжировали 99 первичных образцов пациентов с РПЖ в исследовании Taylor 9.0355 et al когорта (GSE21036) в соответствии с их индивидуальной z-оценкой микроРНК (по сравнению с нормальной тканью предстательной железы) для каждой SiM-миРНК. Затем мы сравнили выживаемость без биохимического рецидива (BCR) между нижним квартилем и тремя верхними квартилями ранжированных образцов с использованием теста логарифмического ранга. Мы наблюдали, что для девяти SiM-miRNA (miR-205, miR-1, miR-133a, miR-133b, miR-145-3p, miR-221-5p, miR-31, miR-221-3p и miR- 135a-5p), низкая экспрессия микроРНК (нижний квартиль) была связана с худшей выживаемостью без BCR (p<0,05). Б . Трансфекция миметиков SiM-микроРНК в клеточные линии PC подавляет количество клеток . Клетки LNCaP, LAPC4 и 22Rv1 трансфицировали миметиками SiM-миРНК или отрицательной контрольной нецелевой миР (миР-NT) до конечной концентрации 30 нМ и инкубировали в течение 96 часов. Были проведены анализы МТТ, и они представлены как средняя жизнеспособность клеток ± стандартное отклонение.

Рисунок 3. Восстановление экспрессии SiM-миРНК…

Рисунок 3. Восстановление экспрессии SiM-миРНК заметно истощает экспрессию AR и ингибирует андрогенопосредованную индукцию…

Рисунок 3. Восстановление экспрессии SiM-миРНК заметно истощает экспрессию AR и ингибирует андроген-опосредованную индукцию генов-мишеней AR KLK3 и TMPRSS2.

А . Клетки LNCaP трансфицировали миметиками SiM-миРНК или нецелевой миР (миР-NT) в течение 48 часов с последующим введением RPPA. Анализ пути проводили для идентифицированных изменений целевого белка. На графике показаны пути KEGG, связанные с раком, для белков, измененных в одном направлении по крайней мере четырьмя из двенадцати SiM-миРНК. БК . Клетки LNCaP трансфицировали миметиками SiM-миРНК в течение 48 часов, а затем RPPA. Показано логарифмическое 2-кратное изменение экспрессии AR и SRC3 после трансфекции каждой SiM-миРНК. Восстановление экспрессии miR-1, miR-135a-5p, miR-221-5p и miR-31 приводит к наибольшей репрессии экспрессии белка AR. Столбцы представляют среднее значение 3 независимых трансфекций; Барс, С.Е. DE . Клетки LNCaP (D) и LAPC4 (E) трансфицировали указанными миметиками SiM-миРНК в очищенной на угле сыворотке в течение 24 часов. После этого клетки обрабатывали 1 нМ R1881 еще в течение 24 часов. В конце лечения была выделена тотальная РНК и проведена обратная транскрипция. Полученную кДНК использовали для qRT-PCR для определения уровней экспрессии KLK3 и TMPRSS2 в клетках. Относительная экспрессия мРНК нормирована на экспрессию мРНК β-актина; Барс, С.Е.

Рисунок 4. Протеомный анализ клеток ПК…

Рисунок 4. Протеомный анализ клеток РПЖ после восстановления экспрессии микроРНК SiM

А…

Рисунок 4. Протеомный анализ клеток РПЖ после восстановления экспрессии микроРНК SiM.

А . Схематическое и круговое представление клеточного цикла, перехода G1 / S, оси AR и сигнальных путей PI3K / PTEN / AKT / mTOR и белков, измененных экспрессией миметиков SiM-миРНК в клетках LNCaP. Порядок SiM-миРНК на каждой круговой диаграмме соответствует порядку, изображенному в ( B ) для AR. С . Анализ путей результатов RPPA указывает на то, что многие из мишеней, измененных миметиками SiM-микроРНК (по крайней мере, шесть в том же направлении), участвуют в переходе G1/S, репликации ДНК, эукариотической инициации трансляции, активации пост-кэп-зависимого связывания. к рибосомам, передаче сигналов AKT и mTOR. Путь AKT / mTOR был значительно нацелен на фосфо-AKT (pSer473 и Thr308), фосфо-GSK3 (Ser9), фосфо-S6 (Ser235/236 и Ser240/244), фосфо-p90RSK (pThr359/Ser363) и фосфо-4EBP1 (pSer65, Thr37/46/70), подавляемые трансфекцией миметиком SiM-миРНК. Интересно, что mTOR (фосфо и общее) имели тенденцию к увеличению. Д . Тепловая карта RPPA получается из клеток LNCaP, трансфицированных миметиками miR135a-5p в биологических тройных повторах в течение 48 часов. Каждая колонка представляет собой отдельную трансфекцию для miR-NT (нецелевой miR) или miR-135a-5p.

Рисунок 5. Восстановление экспрессии SiM-миРНК…

Рисунок 5. Восстановление экспрессии SiM-миРНК истощает коактиваторы AR и стероидных рецепторов в PC…

Рисунок 5. Восстановление экспрессии SiM-миРНК истощает коактиваторы AR и стероидных рецепторов в клетках РПЖ.

клетки LNCaP трансфицировали указанными миметиками SiM-миРНК в течение 48 часов. Затем клетки собирали и готовили тотальные клеточные лизаты. Были проведены иммуноблот-анализы уровней экспрессии AR, SRC-1, SRC-2, SRC-3, p-AKT(S473), общего AKT, p-S6(S235/236), общего S6, расщепленного PARP, c- Myc, SKP2 и β-актин в клеточных лизатах. Цифры под полосами представляют собой денситометрический анализ интенсивности полос по отношению к экспрессии β-актина.

Рисунок 6. Андрогены индуцируют экспрессию miR-135a-5p в…

Рисунок 6. Андрогены индуцируют экспрессию миР-135a-5p в клетках РПЖ

А . Клетки LNCaP и VCaP…

Рисунок 6. Андрогены индуцируют экспрессию miR-135a-5p в клетках РПЖ.

А . Клетки LNCaP и VCaP высевали в среду с добавлением 10% FBS, очищенной от угля, на 48 часов. Затем добавляли R1881 (1 нМ) и клетки инкубировали еще 24 часа. По окончании лечения тризольным методом выделяли тотальную РНК и подвергали обратной транскрипции. Обратная транскрипция мРНК, опосредованная стволовой петлей, была выполнена с использованием 250 нг общей РНК для miR-135a-5p и RNU6B. Относительную экспрессию miR-135a-5p в каждой клеточной линии определяли с помощью количественной ПЦР и нормализовали к RNU6B; Барс, С.Е. Б . Клетки LNCaP и VCaP обрабатывали MDV3100, как указано, в течение 48 часов. Тотальную РНК выделяли и подвергали обратной транскрипции с использованием обратной транскрипции, опосредованной стволовой петлей, для miR-135a-5p и RNU6B. Относительную экспрессию miR-135a-5p в каждой клеточной линии определяли с помощью количественной ПЦР и нормализовали к RNU6B; Барс, С.Е. С . Мы исследовали профили ChIP-Seq для AR, FOXA1, GATA2, SRC-2, CBP, p300, РНК Pol II, h4K4me1, h4K4me2, h4K4me3 и h4K27Ac в локусе гена RMST в клетках LNCaP с использованием браузера IGV. Мы наблюдали значительное связывание/локализацию этих белков в области примерно в 5 т. п.н. ниже кодирующей последовательности miR-135a-5p в гене RMST (серая стрелка), который является геном-хозяином для miR-135a-5p (черная стрелка).

Рисунок 7. Эпигенетические особенности и структура хроматина…

Рисунок 7. Эпигенетические особенности и структура хроматина определяют экспрессию и доступность miR-135a-5p в PC…

Рисунок 7. Эпигенетические особенности и структура хроматина определяют экспрессию и доступность миР-135a-5p при РПЖ по сравнению с нормальными эпителиальными клетками простаты.

А . Наборы данных ChIP-Seq для хроматиновых меток (h4K4me3 и h4K27me3) из клеток PrEC и LNCaP визуализировали с использованием браузера IGV. A. В клетках LNCaP локус гена RMST (ген-хозяин для miR-135a-5p) демонстрирует более сильный сигнал h4K27me3 и более слабый сигнал h4K4me3 по сравнению с клетками PrEC. БД. Обработка ингибитором пангистондеацетилазы и агентами, деметилирующими ДНК, вызывает реактивацию экспрессии miR-135a-5p, miR-1, miR-31 и miR-221-5p в клетках РПЖ . Б — Д . Клетки LNCaP и LAPC4 обрабатывали, как указано, в течение 24 часов вориностатом (VS) или 96 часов ингибитором ДНК-метилтрансферазы 5-азацитидином (5-Aza). Тотальную РНК выделяли и подвергали обратной транскрипции с использованием набора для обратной транскрипции, опосредованной петлей Stem, для miR-135a-5p, miR-1, miR-31 и miR-221-5p. Относительную экспрессию каждой миР определяли с помощью количественной ПЦР и нормализовали до RNU6B; Барс, С.Е. E Сайленсинг EZh3 активирует экспрессию miR-135a-5p в клетках PC . Клетки LNCaP трансфицировали si-NT или si-EZh3 в течение 48 часов. По окончании лечения суммарную РНК выделяли тризольным методом. Обратная транскрипция miR-135a-5p, опосредованная стволовой петлей, была выполнена с использованием 250 нг общей РНК. Относительную экспрессию miR-135a-5p определяли с помощью количественной ПЦР и нормализовали к RNU6B; Барс, С. Е.

См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC

Похожие статьи

• TCF7 подавляется андрогенным рецептором посредством подавления, опосредованного микроРНК-1, и участвует в развитии устойчивости к андрогенной депривации при раке предстательной железы.

  Siu MK, Chen WY, Tsai HY, Chen HY, Yin JJ, Chen CL, Tsai YC, Liu YN. Сиу М.К. и др. Рак простаты Prostatic Dis. 2017 июнь;20(2):172-178. doi: 10.1038/pcan.2017.2. Epub 2017 21 февраля. Рак простаты Prostatic Dis. 2017. PMID: 28220803

• Андроген-индуцированная миР-135a действует как супрессор опухоли посредством подавления RBAK и MMP11 и опосредует устойчивость к терапии депривации андрогенов.

  Wan X, Pu H, Huang W, Yang S, Zhang Y, Kong Z, Yang Z, Zhao P, Li A, Li T, Li Y. Ван Х и др. Онкотаргет. 2016 9 августа; 7 (32): 51284-51300. doi: 10.18632/oncotarget.9992. Онкотаргет. 2016. PMID: 27323416 Бесплатная статья ЧВК.

• Идентификация миР-30b-3p и миР-30d-5p в качестве прямых регуляторов передачи сигналов рецептора андрогена при раке предстательной железы путем скрининга библиотеки дополнительных функциональных микроРНК.

  Кумар Б., Халегзадеган С., Мирс Б., Хатано К., Кудролли Т.А., Чоудхури В.Х., Йетер Д.Б., Юинг К.М., Луо Дж., Исаакс В.Б., Маркионни Л., Лупольд С.Е. Кумар Б. и др. Онкотаргет. 2016 8 ноября; 7(45):72593-72607. doi: 10.18632/oncotarget.12241. Онкотаргет. 2016. PMID: 27683042 Бесплатная статья ЧВК.

• Рецептор андрогена и регуляция миР-206 при раке предстательной железы.

  Чуа Ф.Ю., Адамс Б.Д. Чуа Ф.Ю. и др. Транскрипция. 2017;8(5):313-327. дои: 10.1080/21541264.2017.1322668. Epub 2017 9 июня. Транскрипция. 2017. PMID: 28598253 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Взаимодействие между сигнальной осью рецептора андрогена и микроРНК при раке предстательной железы.

  Fernandes RC, Hickey TE, Tilley WD, Selth LA. Фернандес Р.С. и соавт. Endocr Relat Рак. 2019 май; 26(5):R237-R257. DOI: 10.1530/ERC-18-0571. Endocr Relat Рак. 2019. PMID: 30817318 Обзор.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Пониженная экспрессия миРНК-491-3p ускоряет рост колоректального рака за счет увеличения экспрессии uMtCK.

  Тан Х, Линь Ю, Хэ Дж, Ло Х, Лян Дж, Чжу Х. Тан X и др. Пир Дж. 2022 28 ноября; 10:e14285. doi: 10.7717/peerj.14285. Электронная коллекция 2022. Пир Дж. 2022. PMID: 36518289 Бесплатная статья ЧВК.

• Комбинация Hsa-miR-133a-3p, miR-1-3p, GOLPh4 и JUP дает хороший биомаркер для различения пациентов с раком предстательной железы и пациентов, не страдающих раком предстательной железы.

  Дука РБ, Массильо К., Фарре П.Л., Гранья К.Д., Моро Дж., Гарднер К., Лакунза Э., Де Сьерви А. Дука РБ и др. Фронт Онкол. 2022 26 окт;12:997457. doi: 10.3389/fonc.2022.997457. Электронная коллекция 2022. Фронт Онкол. 2022. PMID: 36387263 Бесплатная статья ЧВК.

• Опухолевые миРНК как регуляторы микроокружения опухоли для синергетических терапевтических вариантов.

  Мэн Кью, Дэн Ю, Лу Ю, Ву С, Тан С. Мэн Кью и др. J Cancer Res Clin Oncol. 15 ноября 2022 г. doi: 10.1007/s00432-022-04432-0. Онлайн перед печатью. J Cancer Res Clin Oncol. 2022. PMID: 36378341 Обзор.

• Бесклеточные микроРНК мочи у пациентов с локализованным раком простаты.

  Ко Ю., Бустос М.А., Мун Дж., Гросс Р., Рамос Р.И., Рю С., Чоу Дж., Лин С.И., Аллен В.М., Красне Д.Л., Уилсон Т.Г., Хун Д.Б. Ко Ю и др. Раков (Базель). 2022 12 мая; 14 (10): 2388. doi: 10.3390/раки14102388. Раков (Базель). 2022. PMID: 35625992 Бесплатная статья ЧВК.

• миР-221/222 как биомаркеры и мишени для терапевтического вмешательства при раке и других заболеваниях: систематический обзор.

  Ди Мартино М.Т., Арбитрио М., Караччоло Д., Кордуа А., Куомо О.