Ретаргетинг вк: Руководство по ретаргетингу ВКонтакте | Блог YAGLA

Содержание

Как настроить ретаргетинг ВКонтакте: возвращение целевых посетителей

Ретаргетинг Вконтакте — это особый вид взаимодействия с целевой аудиторией, при котором мы таргетируем наше предложение посетителям лендинга, имеющим аккаунт в социальной сети «ВКонтакте» и совершившим определенное действие: от простого перехода на ресурс до выполнения заказа или заполнения лид-формы.

Основываясь на полученной информации, маркетолог может обратиться к этой аудитории с рекламными предложениями для оптимизации конверсии посадочной страницы или среднего чека.

В данном примере мы разделим пользователей на две группы — посетители, не совершившие целевое действие и потенциальные покупатели, отправившие заявку. В нашем примере пользователи, совершившие целевое действие — это потенциальные покупатели смартфона, которым мы можем предложить также купить гарнитуру.

Для начала нам потребуется установить счетчики ретаргетинга: один на главную страницу лендинга, второй — на страницу благодарности.

Устанавливаем счетчик

1. Зайдите в социальную сеть и перейдите по ссылке: https://vk.com/ads?act=retargeting.

2. Если у вас еще не создано ни одного объявления, то на вкладке «Таргетинг» кликните по кнопке «Здесь» и создайте рекламное объявление:

3. После добавления объявления на вкладке «Таргетинг» выберите подраздел «Ретаргетинг», затем вкладку «Пиксели» и кликните «Создать пиксель»:

4. В открывшемся окне укажите название пикселя, адрес домена и выберите тематику объявления.

5. После этого в поле «Код для вставки» отобразится код. Скопируйте его полностью.

6. В визуальном редакторе LPgenerator откройте страницу благодарности и с помощью инструмента «Скрипты» вставьте скопированный код. Установите положение «Внутри тега <HEAD>».

7. Вернитесь в рекламный кабинет, выберите вкладку «Аудитории» и нажмите на кнопку «Создать аудиторию»:

8. Далее, заполните открывшееся окно по образцу. Затем, нажмите «Создать».

9. Аналогичные настройки нужно установить и на главной странице для захвата всех пользователей. Для этого заново проходим всю цепочку действий с 3 по 6 пункт.

10. Спустя некоторое время получаем информацию по собранным посетителям. В нашем случае:

Группа потенциальных покупателей, которые отправили заявку на посадочной странице — код, размещенный на странице благодарности
Группа всех посетителей лендинга — код, размещенный на главной странице.

Создаем целевые объявления

Теперь мы видим две аудитории пользователей. Применим эту информацию на практике и сделаем для каждой из групп свое целевое объявление. Ниже рассмотрим пример создания объявлений о продаже наушников.

1. Переходим в раздел «Рекламные кампании» и нажимаем на кнопку «Создать объявление»:

2. Первое объявление сделаем для группы пользователей, которые выполнили заказ (заполнили заявку) на нашем лендинге.

Кликаем на иконку «Внешний сайт». Поскольку полученную базу пользователей ретаргетинга можно использовать как для текущего, так и для другого лендинга, вы можете использовать ссылку как на отдельный лендинг, так и на тот, с которого собирали базу:

3. Далее пишем заголовок и текст объявления:

4. В разделе «Дополнительные параметры» в поле «Аудитории ретаргетинга» выбираем группу пользователей, которые уже сделали заказ основного продукта:

5. Таким же образом создаем второе объявление. Теперь уже для посетителей, которые не совершили целевое действие на лендинге, например, с предложением приобрести оффер со скидкой.

В настройках устанавливаем группу ретаргетинга на всех посетителей. Обязательно указываем потенциальных покупателей в поле «За исключением»:

6. Готово! После запуска рекламной кампании большинство пользователей, купивших у вас смартфон, увидят объявления о продаже аксессуаров. А посетители, не купившие основной товар, увидят объявление со спецпредложением.

Таким образом, конверсия может увеличиться до 2,5 раз, а цена лида — уменьшиться в 2–3 раза.

По любым возникшим вопросам обязательно обращайтесь к нашим специалистам службы технической поддержки. По будням, с 10 до 18 часов по Москве мы доступны по номеру телефона 8(800)505-72-45, а с 11 до 19 часов с нами можно будет связаться в рамках Skype (логин: lpgenerator).

Также мы будем рады ответить на любые ваши вопросы, адресованные на email-адрес [email protected], круглосуточно и без выходных.

Высоких Вам конверсий!

С уважением,
команда LPgenerator.

10-02-2015

Как настроить ретаргетинг во ВКонтакте – eLama

Показывать рекламу во ВКонтакте можно посетителям сайта, которые совершили целевое действие, например, положили товар в корзину. Они увидят рекламу просмотренных товаров или услуг в социальной сети.

Для этого нужен пиксель ретаргетинга ВКонтакте, который устанавливается на сайт как JavaScript-код.

Объявление будет показано только тем, кто зарегистрирован в социальной сети и посещал сайт. В будущем вы сможете работать с собранной аудиторией, например, сегментировать посетителей сайта на основе их действий.

Где найти ретаргетинг в кабинете ВКонтакте

Чтобы настроить ретаргетинг в рекламном аккаунте ВКонтакте, перейдите в раздел «Реклама» во ВКонтакте.

Затем откройте аккаунт. Для этого нажмите на ваш логин:

В левом меню вы увидите раздел «Ретаргетинг»:

В этом разделе можно создать аудитории и пиксели и настроить динамический ремаркетинг.

Как создать пиксель ретаргетинга

В разделе «Ретаргетинг» и выберите пункт «Пиксели»:

Нажмите «Создать пиксель» и заполните форму:

  • название пикселя;
  • домен или поддомен. Обращаем внимание, что собирать аудитории можно и с поддоменов сайта, если указать их адреса;
  • выберите одну из тем, которая наиболее близко характеризует ваш сайт.

Теперь пиксель появится в рекламном кабинете:

Нажмите на название пикселя, в выпадающем списке выберите «Редактировать». Система сгенерирует код, который необходимо вставить на сайт:

Если понадобится изменить домен или название пикселя после установки кода, то сделать это можно в этой же форме.

Установка пикселя на сайт

Зайдите в код вашего сайта, чтобы вставить пиксель. Важно: вставляйте код в верхнюю часть кода внутри тегов <head></head>. 

Как проверить работу Пикселя ретаргетинга ВКонтакте

Рекламный кабинет ВКонтакте позволяет проверить правильность работы пикселя.

Для этого откройте страницу сайта, на которую установлен код. На другой странице браузера откройте раздел пиксели в рекламном кабинете. В столбце «Статус» будет написано «работает»:

Как удалить пиксель

Во ВКонтакте есть ограничение по количеству пикселей в одном рекламном кабинете — не больше 25.

Для удаления нажмите на название и в выпадающем меню выберите «Удалить».

Собранные аудитории останутся, но перестанут пополняться.

Раздел ретаргетинга ВК | HiСonversion

Мы подробно рассмотрели каждую деталь в рекламном кабинете, остался раздел ретаргетинга ВК.

Мы писали о том, что такое ретаргетинг и как его использовать.

Сегодня посмотрим на кабинет ретаргетинга в ВК.

Найти вкладку “Ретаргетинг” можно в кабинете слева.

В ВК можно загрузить несколько вариантов аудиторий ретаргетинга

  • загрузить готовую базу id пользователей ВК, собранную, например, с помощью TargetHunter,
  • загрузить готовую базу телефонов или email, например, ваших клиентов,
  • создать похожую аудиторию или look-a-like (вот в этой статье мы рассказывали, что это такое),
  • собрать аудиторию с сайта с помощью пикселя (про пиксель можно почитать вот тут).

Как создать аудитории

Загрузка готовой базы id, телефонов или email.

Чтобы загрузить базу вам необходим файл в формате txt или csv с компьютера. Для этого нажимаем на кнопку “Создать аудиторию”.

Выбираем пункт загрузить из файла

Вводим название и выбираем файл. Далее жмем на кнопку “Создать”. После загрузки, база отобразиться в кабинете.

Создание похожей аудитории

Чтобы создать похожую аудиторию, нам нужна соответствующая вкладка.

Жмем на кнопку “Найти похожую аудиторию” и перед нами появляется попап.

Необходимо выбрать группу ретаргетинга, загруженную ранее, на основе которой будет собираться похожая аудитория.

После того как статус сбора аудитории будет “Выполнен”, у вас появится кнопка “Создать аудиторию”. Она нам и нужна.

При нажатии на нее нам появляется попап, в котором необходимо выбирать степень схожести аудитории с источником.

Чем выше точность, тем меньше аудитории будет в базе и тем больше будет степень схожести с источником. К примеру, при высокой точности ВК будет подбирать аудиторию, которая потребляет тот же контент в соцсетях, что и пользователи из источника. При широком охвате схожесть может быть только в населенном пункте или возрасте источника и похожей аудитории, поэтому и аудитории в готовой базе больше.

Выбор точность или охват зависит от рекламодателя. После того как вы определили степень схожести, жмите “Создать”.

Пиксель

Для того, чтобы собирать аудиторию, которая как-либо взаимодействовала с сайтом, необходимо для начала получить и установить пиксель на сайт.

Переходим во вкладку “Пиксель” в рекламном кабинете. И жмем на кнопку “Создать пиксель”.

В открывшемся попапе вводим название пикселя, домен и выбираем тематику. И кликаем “Создать”.

ВК сразу показывает нам программный код, который необходимо вставить на сайт.

Как только вы поставите код на сайт, статус пикселя изменится на “работает”.

После этого вы сможете создать аудиторию, взаимодействующую с вашим сайтом. Вновь жмем кнопку “Создать аудиторию”.

И выбираем источник “Получить с помощью пикселя”. Называем нашу аудиторию, выбираем правило, время и жмем “создать”.

Далее ВК будет сам автоматически собирать аудиторию, которая заходит к нам на сайт.

Ретаргетинг ВКонтакте — Senler

Настройка ретаргетинга позволяет автоматически синхронизировать подписчиков с аудиториями ретаргетинга в рекламном кабинете (РК).

​⚙ Настройка ретаргетинга

В личном кабинете в разделе Настройки — Ретаргетинг выберите РК, с которым будет выполнятся синхронизация аудиторий.

Внимание! РК можно выбрать только один и только из числа тех, к которым имеет доступ руководитель. При этом руководитель должен иметь права администратора в этом РК.

Права администратора в РК

После выбора РК необходимо настроить связь аудиторий ретаргетинга с группами подписчиков. Для этого в настройках нужной группы перейдите в раздел Ретаргетинг и там выберите аудиторию.

Настройка аудиторий ретаргетинга в Senler

Внимание! В аудиторию будут добавляться только новые подписчики, которые подпишутся после настройки. Старых подписчиков можно выгрузить отдельно файлом с помощью экспорта.

​⏰ Расписание синхронизации

Синхронизация с рекламным кабинетом ВКонтакте выполняется по следующим условиям:

  • если количество пользователей для добавления в аудиторию меньше 1000, то синхронизация выполняется каждые 15 минут с 08:00 до 23:45

  • если пользователей больше 1000, то каждые 15 минут с 01:00 до 07:45

​⚡ Особенности

В аудиторию отписчиков попадают отписчики, но из аудитории подписчиков они не исключаются, поэтому если хотите настроить рекламу только на активных подписчиков, в настройках рекламного объявления нужно исключить аудиторию с отписчиками.

Если у руководителя удалить доступ к РК или сам руководитель удалит ключ доступа для сервиса, синхронизация перестанет выполняться. Синхронизация также перестанет работать, если руководитель сменит пароль, так как при этом ключ доступа становится неактуальным.

Полезные материалы

  1. ​Подробнее о ретаргетинге ВКонтакте​

  2. ​Академия ВКонтакте​

  3. ​Сертификация специалистов ВКонтакте​

Частые вопросы

Два способа настройки ретаргетинга во ВКонтакте

Ретаргетинг во «ВКонтакте» — это полезный и эффективный инструмент для рекламодателей. Ретаргетинг позволяет показывать рекламные объявления тем пользователям, которые ранее посещали сайт рекламодателя или ранее пользовались его продуктом или услугами.

Чтобы воспользоваться ретаргетингом, необходимо загрузить аудиторию, т. е. базу пользователей, на которую вы хотите нацелить свои рекламные объявления. Аудиторию можно загрузить из заранее подготовленного файла или получить с помощью пикселя «ВКонтакте».

Ретаргетинг в рекламном кабинете

Способы настройки ретаргетинга

1. Пиксель

Пиксель «ВКонтакте» — это JavaScript-код, который нужно вставить в исходный код сайта. Когда человек заходит на сайт, пиксель ретаргетинга автоматически его учитывает. Это позволяет рекламодателю отслеживать всех посетителей сайта.

Ретаргетинг по пискселю может использоваться в следующих случаях:

  1. В качестве напоминания потенциальным клиентам о том, что они интересовались вашим продуктом или услугами.
  2. Чтобы предложить завершить неоконченное действие на сайте. Например, если пользователь добавил товар в корзину, но не оплатил его.
  3. Для исключения нынешних клиентов из целевой аудитории рекламных кампаний.
  4. Для анализа аудитории, посещающей ваш сайт.
2. Файл

При этом способе ретаргетинга необходимо загрузить заранее приготовленный список людей, который должен состоять из телефонных номеров, адресов электронной почты и/или ID пользователей во «ВКонтакте». После загрузки на сайт все данные из файла обрабатываются и сопоставляются с базой пользователей «ВКонтакте».

Ретаргетинг по файлу может использоваться в следующих случаях:

  1. Для информировании клиентов о каком-либо специальном предложении, например о скидках на товар, которым они ранее интересовались.
  2. В качестве напоминания клиентам о совершении целевого действия, например о покупке нового крема вместо заканчивающегося старого.
  3. Для исключения нынешних клиентов из целевой аудитории рекламных кампаний.
  4. Для побуждения клиентов выполнить целевое действие в дополнение к ранее совершенному. (приобрести картридж к недавно купленному принтеру).
  5. Чтобы привлечь клиентов компании вступить в группу во «ВКонтакте».

Важно отметить, что аудитория для ретаргетинга не может быть менее 100 человек. О том, как создать и настроить объявления для ретаргетинга, можно прочитать по ссылке.

Заключение

Ретаргетинг во «ВКонтакте» зарекомендовал себя в качестве эффективного рекламного инструмента для работы с пользователями социальной сети. В отличие от обычной таргетированной рекламы ретаргетинг позволяет более точно нацеливаться на заинтересованную аудиторию. Этот инструмент подходит тем рекламодателям, которые уже собрали определенную базу заинтересованных потенциальных клиентов и выявили их потребности.

Ретаргетинг ВКонтакте: сбор аудитории, настройка, пиксель ВК

Если после запуска рекламной кампании, Вы хотите улучшить её эффективность, то одним из способов это сделать, является ретаргетинг ВКонтакте.

Разбираемся в возможностях ретаргетинга в ВК, доступных видах ретаргетинга и его настройке.

Получайте до 18% от расходов на контекстную и таргетированную рекламу!

Рекомендуем: Click.ru – маркетплейс рекламных платформ:

  • Более 2000 рекламных агентств и фрилансеров уже работают с сервисом.
  • Подключиться можно самому за 1 день.
  • Зарабатывайте с первого потраченного рубля, без начальных ограничений, без входного барьера.
  • Выплаты на WebMoney, на карту физическому лицу, реинвестирование в рекламу.
  • У вас остаются прямые доступы в рекламные кабинеты, рай для бухгалтерии по документообороту и оплатам.
Начать зарабатывать >> Реклама

Читайте также: Как настроить таргетированную рекламу в ВК

Что такое ретаргетинг в ВК и как он работает

Ретаргетинг — это инструмент, который позволяет нацеливать рекламные объявления на конкретную, предварительно сформированную аудиторию.

Создание аудитории ретаргетинга, возможно одним из способов:

  • загрузка пользователей из файла. Можно загрузить данные пользователей (телефоны, email) или собрать с помощью парсера ВК;
  • при при помощи пикселя ВКонтакте, установленного на сайте или в мобильном приложении;
  • при помощи динамического ретаргетинга;
  • QR-код;
  • собирать по действиям в рекламных записях;
  • поиск похожей аудитории.

Пример: На сайт компании заходит 1000 посетителей в сутки. 10 оставляют заявку, а оставшиеся 990 уходят. Чтобы не потерять этих людей, мы используем ретаргетинг — помечаем их с помощью пикселя и теперь можем показывать свою рекламу. Разбираемся, как это сделать.

Статья в тему: Настройка ретаргетинга в Яндекс.Директ

Настройка ретаргетинга ВКонтакте для сайта

Создание аудитории ретаргетинга

Рассмотрим создание аудитории ретаргетинга, с помощью пикселя и дальнейшей настройки рекламы для сайты.

Шаг 1. Зайдите в рекламный кабинет ВКонтакте и перейдите в раздел «Ретаргетинг».

Шаг 2. Создание пикселя ретаргетинга в ВК. Откройте вкладку «Пиксели» и нажмите кнопку «Создать пиксель».

Придумайте название пикселя, укажите домен и тематику сайта, на котором будет размещён пиксель для сбора аудитории. Нажмите «Создать».

Шаг 3. Установка пикселя на сайт. Пиксель создан! Скопируйте код и установите его на свой сайт. Для этого разместите код для вставки между тегами <head></head>.

Шаг 4. Теперь социальная сеть ВКонтакте начнёт помечать каждого посетителя Вашего сайта. А нам нужно настроить аудиторию на которую мы собираемся в дальнейшем таргетироваться.

Возвращаемся на вкладку «Аудитории» и кликаем «Создать аудиторию».

Шаг 5. Правила формирования аудитории. Пишем название аудитории и выбираем пиксель.

Теперь нужно задать правила формирования аудитории и параметры.

Правила:

  • Выбираем все посетители сайта или пользователи посещавшие определённые страницы.
  • Период сбора аудитории — от 3 дней до 2 лет.

Параметры:

Если мы выбираем «Пользователи посещавшие определённые страницы», то ниже отобразится раздел «Параметры», где нужно указать URL-адреса этих страниц.

Пример: На нашем сайте есть страница «Реклама». Если мы хотим настроить ретаргетинг в ВК на тех, кто посещал эту страницу мы указываем адрес этой страницы. Точно так же Вы можете разделить свою аудиторию, по тому, что они смотрели на Вашем сайте, [строительство домов] или [отделка помещений], и специально под каждую группу создать отдельное объявление.

Создание объявлений

Обратите внимание, что после установки пикселя ВК на сайт, потребуется некоторое время, чтобы собрать аудиторию — она должна быть не менее 100 человек. Когда это условие выполнено, можно приступать к созданию целевых объявлений.

Шаг 6. Возвращаемся на первую страницу рекламного кабинета и нажимаем «Создать объявление».

Выбираем любой из рекламных форматов: реклама в ленте или на страницах сайта. Мы выберем «Реклама сайта».

Шаг 7. Создаём креатив. Указываем рекламируемую ссылку, загружаем картинку, пишем заголовок и описание.

Ниже, в настройках целевой аудитории находим пункт «Дополнительные параметры» и в поле «Аудитории ретаргетинга» выбираем нашу аудиторию.

После выбора аудитории, справа будет показан прогноз бюджета и охвата рекламной кампании в ВК.

Шаг 8. В завершении, устанавливаем стоимость перехода, места показа и пишем название рекламной кампании. Ниже кликаем «Создать объявление».

Реклама уйдёт на модерацию и показ объявления начнётся сразу после её прохождения. Обычно на это уходит от нескольких часов до одних суток.

Другие способы сбора аудитории ретаргетинга ВКонтакте

Мы описали как создать аудиторию ретаргетинга с помощью пикселя и запустить рекламу на неё. Теперь, вкратце расскажем, о других способах сформировать аудиторию.

Парсинг сообществ

Собрать аудиторию для ретаргетинга можно и с использование парсеров. Специальных сервисов сбора данных по заданным параметрам. Подробнее: Парсеры групп в ВК.

С помощью парсеров, можно собрать огромную базу пользователей, настроив нужные фильтры. Например, можно собрать всех подписчиков конкурентов или жителей определённого города.

Посе этого, собранный список, загружаем в виде файла.

Загрузка из файла

Жмём «Создать аудиторию — Загрузить из файла». Далее кликаем кнопку «Выбрать файл».

Здесь вы можете использовать базу контактов своих клиентов: email, номера телефонов, мобильные рекламные идентификаторы или ID пользователей ВКонтакте (аудитория собранная с помощью парсера). Загрузить её нужно в формате .CSV или .TXT. Размер файла не более 20 МБ. Файл может содержать .

Похожая аудитория

Если вы хотите сформировать похожую аудиторию, то у вас уже должна быть готовая аудитория, в которой более 1000 пользователей.

В разделе «Ретаргетинг» открываем вкладку «Похожие аудитории» и жмём кнопку «Найти похожую аудиторию».

В открывшемся окне выбираем исходную аудиторию. Поиск похожей аудитории займёт от 30 минут до нескольких часов в зависимости от нагрузки. После завершения поиска Вы сможете выбрать точность/охват и выгрузить аудиторию.

Действия с рекламой

Также, в качестве аудитории ретаргетинга, можно выбрать пользователей, которые видели вашу рекламу или совершали действия с ней.

Для этого при настройке рекламной кампании, в подразделе «Настройка сохранения аудитории», придумываем название сохраняемой аудитории и выбираем принцип сбора: клик, просмотр или другое.

Также, для создания аудитории вы можете использовать QR-код и динамический ретаргетинг.

Читайте также: 10 лучших сервисов для раскрутки группы в ВК

Заключение

Итак, если вы хотите добиться более высокой отдачи от своей рекламы, необходимо использовать ретаргетинг ВКонтакте.

Даже, если вы не сконвертируете посещение в лид с первого раза, то у вас будет второй шанс в виде ретаргетинга 🙂

CRM маркетинг – ретаргетинг ВКонтакте из Amocrm, догоняем клиента

Если в вашей компании выстроена воронка продаж, если у этой воронки есть определенные этапы сделок и все сделки хранятся не на бумажке, а в CRM, то эта статья определённо для вас. А если не хотите разбираться, а вам нужно внедрение CRM под ключ, то обращайтесь в Agency IMA Москва.

Вводные про CRM маркетинг и кому это нужно?

Часто клиент, обратившись в вашу компанию, параллельно общается и с вашими конкурентами. Либо завален другими делами и проблемами и проблема, с которой он обратился постепенно становится менее актуальна. Тут важно постоянно подогревать клиента и напоминать о себе.

Давайте условимся, что у нас не самый старт бизнеса и не всё сделано на коленке. То есть у нас есть црм система, есть понимание своей воронки продаж и как именно нужно вести клиента от обращения к продаже.

Используйте только AmoCRM. Не ведитесь на бесплатный тариф в Битрикс24. По факту в бесплатном тарифе сильно урезан функционал, а платные тарифы- стоят одинаково.

Преимущества Amocrm – быстрая поддержка в чате, возможность общаться с поддержкой по телефону, удобный и понятный интерфейс.

Какими инструментами можно подводить к продаже, благодаря црм маркетингу

  • Самое частое и простое – email рассылки. Ими нужно пользоваться всегда и это самый простой и бесплатный инструмент. Вы должны прописать цепочку из 3-5 писем на каждый из этапов воронки.
  • Смс рассылки. Также важно высылать клиентам СМС сообщения, в зависимости от этапа. Это не только поможет повысить лояльность, но и заставит клиента прочитать ваше письмо.
  • Автопрозвоны – также можно использовать как аналог смс. Не стоит злоупотреблять. Исключительно, как информирование, когда это нужно.
  • Ретаргетинг. Именно этому инструменту мы уделим максимум времени и внимания. В Амо црм вы можете использовать следующие виды ретаргетинга:
    • показ объявлений ВКонтакте,
    • в Фейсбук,
    • ретаргетинг в Google реклама (Гугл Адвордс \ AdWords).

Сразу скажу, что последний инструмент crm маркетинга практически невозможно использовать (минимальный порог входа для создания своей аудитории – уже израсходованный бюджет на рекламу 50 000$)

Ретаргетинг ВКонтакте — требования.

  • У вас должна быть создана группа. Пусть даже пустая, но реклама идёт от имени группы
  • У вас должна быть аудитория от 100 человек.
  • Желательно подготовить небольшую посадочную страницу, соответствующую этапу воронки..

Основной затык случается в необходимой минимальной аудитории. Ведь часто в этапе воронки у вас 1-20 клиентов. А нужно 100. Что же делать? Вам необходимо после создания аудитории, руками добавить туда примерно 100-150 пользователей.

Как связать догоняющую рекламу ВК с Амоцрм

  • Заходим в рекламный кабинет ВК – создаём от вашей группы рекламное объявление. Все фильтры\настройки убираем. Получается показ примерно на 98 миллионов человек. Сохраняем
  • Заходим в Амо – Сделки – Настроить воронку
  • В нужном этапе жмем на белое поле – Находим ВК – Подключить – Проходим авторизацию
  • Далее снова на белое поле – Находим ВК – Добавить в рекламную компанию – Выставляем фильтры (по тэгам, меткам, городу, источнику и т.д.) – Выбираем компанию и объявление – Ставим галочку применить триггер к текущим сделкам – Готово
  • Возвращаемся в ВК и руками или с помощью любых парсеров ВК собираем 100-150 человек. Если потом окажется мало и ВК скажет, что их недостаточно, то можете дособрать аккаунты позже.
  • Заходим в рекламный кабинет – Ретаргетинг – Находим базу со схожим названием AMOCRM_1338738_ACTIVE_18_11_18 – Жмём на неё и добавить аудиторию – Вкладка из файла – загружаем наш файл со списком левых пользователей
  • Заходим в рекламный кабинет – Настройки объявления – Редактировать – Дополнительные параметры – Аудитории ретаргетинга аудиторию AMOCRM_1338738_ACTIVE_18_11_18, За исключением ставим аудиторию AMOCRM_1338738_INACTIVE_18_11_18. Тем самым целевая аудитория объявления сокращается с 98 миллионов до 100-150 человек.
  • Запускаем рекламу и радуемся. Теперь все, кто попадает в определённый этап воронки – видит ваше объявление. Как только перемещается на следующий этап – перестает видеть объявление.

Постскриптум

  • Устанавливайте ставку за 1000 показов в разы выше рекомендуемой. Так как если у вас количество клиентов не огромное, то на ваших тратах это никак не отобразится.
  • Делайте по несколько объявлений (для каждого процедура повторяется), с количеством показов =1, чтобы не надоедать и показывать разные объявления.

3 способа сбора данных о ваших российских клиентах • Runetology.com

Даже если вы не планируете запускать рекламную кампанию в Рунете прямо сейчас, но у вас уже есть русскоязычная версия вашего сайта, начните сбор данных о ваших посетителях уже сегодня!

Перед тем, как начать любую маркетинговую деятельность в России, важно накопить статистику вашего сайта: SEO, PPC, контент-маркетинг, социальный маркетинг и т. Д. Под статистикой я имею в виду:

  • Запросы, которые пользователи вводили перед переходом на ваш сайт
  • Поведение пользователей (источник, целевая страница, что они нажимают, как ведут себя на каждой странице)
  • Они что-нибудь покупали на вашем сайте?
  • А если нет, то на каком этапе они отказались от покупки на вашем сайте, что им помешало?
  • Каковы их интересы (такие данные будут собираться в Яндексе по собственным алгоритмам)?

Прежде всего, эти данные помогут вам лучше понять намерения вашего потенциального клиента.Во-вторых, вы узнаете о «слабых» местах своего веб-сайта. И, наконец, накопленная статистика позволит вам ориентироваться на тех клиентов, которые уже посещали ваш сайт, но, например, не купили ваш товар или услугу.

Добавить код отслеживания Яндекс.Метрики

Давайте установим код Яндекс.Метрики. Этот инструмент похож на Google Analytics. Кстати, сейчас это второй по популярности инструмент аналитики в мире. Но в отличие от Google Analytics, сервис Яндекса позволяет вам видеть фактические запросы посетителей вашего сайта, поступающие с Яндекса и почты.ru поиск. Иногда вы также можете найти там некоторые запросы Google.

Теперь давайте зарегистрируем ваш код отслеживания Яндекс.Метрики.

Я снял видео с описанием этого процесса:

А вот подробная инструкция:

  1. Зарегистрируйтесь в Яндексе, если у вас еще нет аккаунта.
  2. Откройте https://metrika.yandex.com и нажмите Добавить счетчик кнопка:
  3. Введите информацию о вашем счетчике и нажмите Создать счетчик :

Готово, ваш счетчик создан.Зайдите в настройки кода отслеживания, перейдя на вкладку Счетчик кода . Чтобы не перегружать статью описанием всех настроек счетчика, у меня есть универсальные настройки, которые подходят для большинства сайтов:

  • включить отслеживание поведения пользователя (веб-обозреватель, карта прокрутки, анализ форм),
  • сделать код в одну строку (для удобства),
  • отключить информер.

Если у вас есть веб-сайт электронной торговли, отметьте опцию Отправлять данные электронной торговли в Метрику .По умолчанию он использует тот же уровень данных, что и Google Analytics (подробности).

Нажмите Сохранить , скопируйте код в буфер обмена и либо передайте его разработчику, который вставит его на сайт, либо сделайте это самостоятельно — прямо в исходном коде вашего сайта или через Диспетчер тегов Google.

Чтобы убедиться, что счетчик установлен правильно, перейдите на главную страницу и слева от нового профиля нажмите кнопку с круглой стрелкой. Если все в порядке, он должен стать зеленым, например:

Итак, сбор данных начался.В зависимости от того, сколько трафика из Рунета получает ваш сайт, в ближайшие дни вы сможете увидеть первую статистику по запросам с Яндекса или Mail.ru (Отчеты> Стандартные отчеты> Источники> Ключевые слова), данные о поведении в Webvisor инструмент , и другая полезная информация.

Добавьте свой сайт в Яндекс.Вебмастер

Короче говоря, этот инструмент помогает понять, что Яндекс знает о вашем сайте и как он отображается в результатах поиска Яндекса. Но в контексте этой статьи для нас важнее всего данные о ваших посетителях.Яндекс.Вебмастер хорош тем, что дает нам информацию о запросах, по которым пользователи находили ссылку на ваш сайт, но по какой-то причине не переходили. Чаще всего это происходит из-за слишком низкого рейтинга сайта (здесь вы можете прочитать о Yandex Rank Checker), иногда из-за непривлекательного сниппета.

Итак, добавим наш сайт в Яндекс.Вебмастер:

  1. У вас уже есть учетная запись на Яндексе, поэтому откройте https://webmaster.yandex.com, нажмите Добавить сайт и введите наш домен:
  2. Затем подтвердите свои права собственности.Самый простой способ — скачать HTML-файл и загрузить его в корневой каталог вашего сайта. Затем нажмите Проверить .
  3. Если все в порядке, ваш сайт будет добавлен в панель для веб-мастеров, и вам придется подождать 1-2 дня, пока Яндекс будет собирать статистику на сайте. И тогда вы увидите что-то вроде этого:

Установить код ретаргетинга ВКонтакте

VK.com входит в топ-1 социальных сетей в России, Украине и Беларуси с более чем 80 миллионами активных пользователей в день (источник).Если вы хотите привлечь клиентов из Восточной Европы, вы обязательно их туда получите.

Ретаргетинг — это рекламный инструмент, который позволяет вам привлекать пользователей, которые ранее посещали ваш сайт. С помощью ретаргетинга на VK.com вы можете показывать посетителям напоминание или специальное предложение, тем самым удерживая аудиторию на вашем сайте.

Если вы думаете, что рано или поздно вы попробуете рекламу ВКонтакте, то не медлите и установите код ретаргетинга. Вы сможете начать кампанию с пользователями, которые уже взаимодействовали с вашим сайтом.Вы можете сообщить им о скидках, новых предложениях продуктов или о новом контенте в своем блоге. Что немаловажно, такой же механизм можно использовать и в рекламе Яндекса, потому что код отслеживания Яндекс.Метрики уже содержит код ретаргетинга.

Теперь установим код ретаргетинга для ВКонтакте:

  1. Если у вас нет аккаунта ВКонтакте, вам необходимо авторизоваться здесь: https://vk.com. Вы можете использовать свою учетную запись Facebook, нажав Войти через Facebook .
  2. После создания профиля перейдите в рекламную панель ВКонтакте в раздел Ретаргетинг https: // vk.ru / ads? act = retargeting. Здесь вы создадите свою ретаргетинговую аудиторию. Аудитория ретаргетинга — это список посетителей, которые посетили определенные страницы вашего сайта.
  3. Во-первых, вам нужно создать пиксель ретаргетинга. Это просто код Javascript, который нужно вставить на свой сайт. Нажмите Создать пиксель и введите имя пикселя, домен и выберите подходящую категорию своего веб-сайта. Затем нажмите Создать :
  4. Вы получите код ретаргетинга. Установите его на свой сайт.Помните, что в отличие от кода Метрики, вы должны вставить код ретаргетинга ВКонтакте между тегами и :
  5. .
  6. После правильной установки нажмите кнопку Создать аудиторию . Вы увидите окно для создания ретаргетинговой аудитории. Введите имя, а затем в поле Правило выберите, хотите ли вы, чтобы все пользователи попадали в эту группу ретаргетинга или только те, кто посетил определенные страницы. Укажите количество дней, в течение которых эти люди будут оставаться в вашей группе ретаргетинга:

Вот и все.Теперь все пользователи, которые заходят на мой сайт www.runetology.com, если у них есть аккаунт в ВК (а это около 80% пользователей в России или Украине) и вошли в систему, попадут в эту группу ретаргетинга.

Когда ваша группа ретаргетинга наберет не менее 100 пользователей, вы можете нацелить на них свою рекламу. Просто пополните свой баланс ВКонтакте через PayPal или VISA / Mastercard и создайте объявление, нажав Create Ad справа от названия конкретной группы ретаргетинга.

Есть вопросы? Пожалуйста, оставьте комментарий или напишите мне по электронной почте.

DIY MSP Marketing: все, что вам нужно знать о ретаргетинге рекламы

Настоящая уловка в маркетинге MSP заключается не в том, чтобы привлечь потенциальных клиентов на ваш веб-сайт, а в том, чтобы заставить их вернуться на
и вернуться . Вот где на помощь приходит ретаргетинговая реклама.

Насколько важна игра с числами в лидогенерации? Согласно рекламной платформе Outbrain, жалкие 2% посетителей веб-сайта конвертируются, когда впервые попадают на ваш веб-сайт (даже если он действительно хороший). Подавляющее большинство людей просто не готовы приступить к серьезным обязательствам, не проверив воды и не увидев, что еще есть, в первую очередь.

Если вы хотите превратить больше заинтересованных потенциальных клиентов в платежеспособных клиентов, вам необходимо найти убедительные способы вернуть их назад на ваш сайт. Ни разу. Не дважды. По мнению экспертов по глобальной аналитике в Nielsen, большинству потребителей необходимо посетить ваш веб-сайт в общей сложности шесть раз по , прежде чем они наконец совершат конверсию.

Обескураженный? Не будь (пока). Хорошая новость в том, что есть уловка, которую вы можете украсть у крупных потребительских брендов, которая значительно увеличит ваши шансы на успех.Это называется с ретаргетингом , и это то, что вы, несомненно, испытали лично, даже если вы точно не знали об этом.

Что такое ретаргетинг?

Вы когда-нибудь замечали, как после посещения веб-сайта компании вы начинаете видеть рекламу определенного продукта или услуги повсюду? Очевидно, это не случайно. Маркетологи называют это ретаргетингом. Короче говоря, это стратегия повторного вовлечения, которая заключается в сборе информации о посетителях вашего веб-сайта, чтобы вы могли продолжать показывать им релевантную рекламу даже после того, как они покинут ваш сайт.

Источник: Newsfeed.org

Ретаргетинг стал правилом дня для широкого круга компаний (B2B в дополнение к B2C), и не зря. Вероятность конверсии посетителя веб-сайта, на которого был выполнен ретаргетинг, на 70% выше. И хотя средний рейтинг кликов (CTR) для медийной рекламы составляет 0,07%, , средний CTR для ретаргетированной рекламы в 10 раз выше и составляет 0,7% .

Ретаргетинг может даже увеличить количество поисковых запросов о бренде более чем на 1000%.Кроме того, коэффициент конверсии на самом деле увеличивается на до , чем больше потребители видят рекламу с ретаргетингом. Сам рейтинг кликов может снизиться, но вероятность конверсии у людей, которые кликают и , в два раза выше!

Итак, как работает ретаргетинг?

Ретаргетинг на основе пикселей, о котором мы будем говорить в этой статье, работает путем размещения фрагмента кода JavaScript (обычно называемого «cookie») в веб-браузере пользователя для отслеживания страниц и продуктов. они смотрят онлайн.Файл cookie взаимодействует с рекламными платформами (поисковыми системами, платформами социальных сетей и т. Д.), Выбранными рекламодателем (это вы!), И сообщает им, какие объявления показывать конкретному человеку в зависимости от того, что он просматривал.

Пиксельная реклама обычно может показываться в течение 30 дней с момента последнего посещения пользователем вашего веб-сайта. Выбранная вами платформа ретаргетинга будет определять, где будут отображаться ваши объявления. Обычные места включают страницы результатов поисковых систем, платформы социальных сетей и даже другие веб-сайты.

По сравнению с ретаргетингом на основе списков, который показывает рекламу людям, использующим адрес электронной почты, который вы указали для таргетинга, нам нравится пиксельный ретаргетинг, потому что он более ограничен по времени и лучше подходит для охвата потребителей, проявляющих определенное поведение.

Возьмем, к примеру, следующее объявление, в котором показано, как Expedia перенацеливает кого-то, кто недавно провел исследование или забронировал рейс в Уистлер, Британская Колумбия, Канада.

Хотя ретаргетинг является одной из наиболее технических маркетинговых стратегий MSP (и мы рассмотрели некоторые из них) и потребует от вас некоторого времени и / или рабочей силы, если вы сами инвестируете в цифровую рекламу, стоит приложить дополнительные усилия.

Почему? Ну, во-первых, из-за доступности. С ретаргетингом конверсии могут стоить всего пятую часть их стоимости при использовании типичной стратегии привлечения.

И, во-вторых, из-за неопровержимого доказательства того, что он просто работает . Ретаргетинг особенно полезен для предприятий с более длинными циклами продаж, которые, как правило, имеют большинство MSP, потому что он позволяет вашему MSP оставаться в центре внимания, пока потребители проходят через маркетинговую воронку. С того момента, как они впервые осознают, что им нужно решение, до момента, когда они оценивают варианты и готовятся совершить покупку — вот вы и ваше объявление.

Конечно, это возможно только в том случае, если вы решите, что ретаргетинг подходит вашему MSP. Вот как это сделать.

Подходит ли ретаргетинг для моего MSP?

Лидов становится все труднее конвертировать, поскольку все больше MSP приходят в сеть и конкуренция растет. Если вы уже реализовали поисковую оптимизацию, платный поиск и рекламу в социальных сетях и не получаете достаточной поддержки — или если у вас ограниченный маркетинговый бюджет, который вы хотите реализовать наиболее эффективным способом, — мы считаем, что ретаргетинг стоит учитывая, есть ли у вас необходимое время и ресурсы.

Что мы имеем в виду? Мы имеем в виду, что ретаргетинг, вероятно, не будет той единственной серебряной пулей, которая приведет ко всем необходимым вам конверсиям. Это должно быть реализовано как часть более крупного маркетингового плана.

По данным агентства цифрового маркетинга Lemonade Stand, у самых эффективных поставщиков услуг Интернета, с которыми они работают, обычно есть несколько ключевых характеристик:

  • Они тратят на маркетинг около 1000 долларов в месяц
  • Обычно они проводят несколько маркетинговых кампаний одновременно — Google Ads, SEO, даже офлайн-маркетинг — и всегда проводят ретаргетинг
  • Они всегда идут в ногу с хорошим отрывом
  • Они последовательны и придерживаются этого как минимум год
  • Они видят общую картину и понимают, что всего одна конверсия может означать положительную рентабельность инвестиций в рекламу (ROAS) в отрасли MSP

Теперь вы понимаете, что мы имеем в виду.Тот факт, что вы можете потратить свои деньги на ретаргетинг, не означает, что вы должны , если вы не готовы инвестировать время и усилия.

Если вы готовы точно увидеть, сколько времени и усилий уходит на создание кампании ретаргетинга MPS, вы находитесь в нужном месте. Но прежде чем мы углубимся, давайте подробнее остановимся на денежных инвестициях .

Рекламный бюджет ретаргетинга: сколько я должен потратить?

Вообще говоря, вы можете рассчитывать потратить в среднем от 2 до 3 долларов за клик по поисковой рекламе, хотя в некоторых конкурентных отраслях цена превышает 50 долларов.В среднем реклама ремаркетинга стоит от 0,25 до 0,60 доллара за клик.

Если вы предпочитаете работать в обратном направлении и устанавливать свой бюджет на основе результатов, вот калькулятор ретаргетинга, который позволяет вам ввести количество ежемесячных уникальных посетителей (аналитика вашего веб-сайта покажет вам это), которые вы получаете на страницах, которые хотите использовать. в ваших усилиях по ретаргетингу. На основе этого числа калькулятор порекомендует ежемесячный бюджет, а также оценку того, сколько показов вы можете ожидать.

И если это помогает узнать больше о том, что тратят все остальные, большинство маркетологов тратят на ретаргетинг менее 10% своего рекламного бюджета — на данный момент.Хорошая новость в том, что у вас еще нет большой конкуренции, когда дело доходит до ретаргетинга!

Чтобы сохранить свой бюджет, убедитесь, что вы выбираете лучший метод расходов: CPC (цена за клик), CPM («цена за тысячу показов» или цена за 1000 показов) и CPA (цена за приобретение. ). Вы также захотите использовать ограничение частоты показов, чтобы предотвратить усталость от рекламы, и длительность членства, чтобы удалить потенциальных клиентов, которые не совершили конверсию в течение обычного цикла продаж. Чтобы получить еще больше информации обо всех сокращениях и отраслевых терминах, которые мы вам только что бросили, ознакомьтесь с этим руководством по затратам на ретаргетинг от Wishpond.

Готовы потратить немного денег, чтобы заработать еще денег? Продолжайте читать, чтобы узнать, как настроить свою первую ретаргетинговую кампанию, расширить ее на различные платформы и использовать детализированные тактики, которые могут помочь улучшить результаты.

Crawl: настройте свою первую ретаргетинговую кампанию

Если вы только начинаете заниматься ретаргетингом, наиболее важная рекомендация, которую мы можем дать, — это начать с Google Рекламы.

Контекстно-медийная сеть

Google, группа из более чем двух миллионов веб-сайтов и приложений, на которых может показываться ретаргетинговая реклама, охватывает 90% интернет-пользователей во всем мире — 65% из них каждый день.В Google более триллиона рекламных показов обслуживается более чем 1 миллиардом пользователей каждый месяц.

Помимо области применения, Google Реклама чрезвычайно удобна для пользователей, достаточно популярна, чтобы гарантировать, что вы всегда сможете найти вспомогательные ресурсы, когда они вам понадобятся, и позволяет пользователям показывать ретаргетинговую рекламу в Интернете — тогда как некоторые инструменты могут только отображать рекламу на их конкретной платформе.

Как бы нам ни хотелось, чтобы потратил несколько часов на изобретение велосипеда, вместо этого мы отправим вас ознакомиться с этим подробным руководством по созданию вашей первой ретаргетинговой кампании Google Реклама от экспертов по рекламе AdEspresso.

В нем вы узнаете (и увидите!):

  • Как настроить тег Google Рекламы (этот «файл cookie» или фрагмент кода, который собирает информацию о посетителях вашего веб-сайта)
  • Как настроить кампанию для ретаргетинга посетителей веб-сайта, пользователей мобильных приложений, посетителей, которые просматривали определенные продукты на вашем веб-сайте, и т. Д.
  • Как создать и запустить свою рекламу

Но как только вы закончите, не забудьте вернуться сюда, чтобы мы могли ускорить вашу ретаргетинговую кампанию, расширив ее по каналам социальных сетей.

Walk: распространение ретаргетинга на социальные сети

Ожидается, что к 2021 году почти 3,1 миллиарда человек во всем мире будут использовать социальные сети. Что может быть лучше для увеличения конверсии, чем расширение усилий по ретаргетингу на свои каналы в социальных сетях?

Социальный ретаргетинг позволяет напоминать потребителям о контенте, продуктах и ​​услугах, к которым они проявили интерес, даже после того, как они покинули ваш веб-сайт и начали просматривать свои любимые социальные сети.

Каждая из лучших социальных сетей для рекламы MSP (читайте все о них в нашем полном руководстве по социальной рекламе для MSP) предлагает уникальный метод перенацеливания на потребителей.

Типы ретаргетинга в Facebook и Instagram

На Facebook, которому принадлежит Instagram и, следовательно, у них одинаковые настройки ретаргетинга, рекламодатели могут выбирать таргетинг на индивидуальную аудиторию или показ динамической рекламы.

Динамическая реклама больше всего похожа на известный нам классический ретаргетинг.Они используют ту же технологию отслеживания для автоматического продвижения ваших продуктов / услуг среди пользователей, которые уже посетили ваш веб-сайт, приложение или другие цифровые каналы. Все, что вам нужно сделать, это загрузить каталог ваших предложений, чтобы Facebook / Instagram могли использовать эту информацию для динамического создания рекламы, актуальной для текущего потребителя.

Для получения подробного руководства по динамической рекламе чрезвычайно с множеством полезных изображений мы рекомендуем вам прочитать «Как перенастроить на Facebook и Instagram с помощью динамической рекламы продуктов от Social Media Examiner».

И еще есть индивидуализированные аудитории, которые тоже в значительной степени соответствуют тому, на что они похожи. Они позволяют рекламодателю составлять уникальные списки тех, кого он хочет перенаправить, на основе контактов, посетителей веб-сайта и пользователей приложения.

  • Аудитория на основе списка контактов включает данные из CRM или собранного вручную списка контактов для выявления существующих клиентов или потенциальных клиентов в Facebook или Instagram.
  • Аудитория посетителей веб-сайта использует пиксель Facebook (похожий на файл cookie JavaScript, который мы описали ранее) для показа людям рекламы на основе того, что они просматривали на вашем веб-сайте.
  • Точно так же аудитория пользователей приложения также использует пиксель Facebook для таргетинга на людей, которые были активны в вашем приложении.

Ретаргетинг в LinkedIn

LinkedIn упрощает работу, предлагая только ретаргетинг веб-сайтов. С помощью тега LinkedIn Insight (еще один тег JavaScript) рекламодатели могут сегментировать посетителей веб-сайтов по разным аудиториям и показывать тщательно подобранные объявления в зависимости от того, какие страницы они просматривали.

Для получения дополнительных сведений перейдите прямо к источнику и ознакомьтесь с собственным практическим руководством LinkedIn.

Ретаргетинг на YouTube

YouTube предлагает «ремаркетинг для видео», который почти такой же, как и обычный ремаркетинг, за исключением того, что вы нацеливаетесь на людей, которые взаимодействовали с вашим каналом YouTube или просматривали одно из ваших видео на YouTube или на одном из своих партнерских видео-сайтов.

YouTube также дает вам инструменты для сегментации вашей целевой аудитории на людей, которые прокомментировали видео, подписались на ваш канал, посмотрели конкретное видео, поделились видео и множество других вариантов, чтобы вы могли создавать настраиваемые списки и показывать настраиваемая реклама.

Если вам нужна небольшая помощь в понимании идеи ремаркетинга для видео, послушайте плавные тона эксперта по рекламе YouTube Бретта Карри, который говорит по этой теме в течение 47 информативных минут.

Если вы прочитали все это, вы все это слышали, и у вас все еще готовы к большему, когда дело доходит до ретаргетинга — вы достигли последнего рубежа в ретаргетинге MSP: набирая его.

Run: Тактика дозвона в ретаргетинг кампании

Теперь, когда вы настроили ретаргетинг и запустили его на страницах своего веб-сайта и в социальных сетях, вам больше нечего делать, кроме как поэкспериментировать с некоторыми забавными тактиками, которые помогут расширить вашу кампанию и повысить результаты.

Tactic numero uno часто легче сказать, чем сделать — просто постарайтесь больше , когда дело доходит до ретаргетинга рекламного контента.

Мы слишком часто видим это, когда рекламодатель настолько устал к тому времени, когда он, наконец, дойдет до создания объявления, что он просто позвонит ему с дерьмовой стоковой фотографией и каким-то неубедительным текстом вроде «Вернись!»

У вас есть данные, поэтому используйте их. Будьте конкретны в своем контенте. Включите привлекательные изображения и ценные предложения, которые имеют отношение к тому, что потребитель только что просматривал на вашем веб-сайте.

Эта ретаргетинговая реклама J. Crew Factory, например, побуждает FOMO и предлагает многое, чтобы как можно быстрее соблазнить недавнего покупателя вернуться на свой веб-сайт.

Это подводит нас к другой тактике — творчеству с тегами.

Продукты, услуги и контент на вашем веб-сайте, вероятно, понравятся разным покупателям. Благодаря внедрению разных тегов на разных страницах будет проще и удобнее сегментировать аудиторию и показывать рекламу, которая гипер-релевантна их интересам и поведению.

Креативная реклама. Креативные теги. Как насчет того, чтобы подойти к вопросу творчески или достичь следующих целей?

Чаще всего ретаргетинг используется для охвата людей, впервые посетивших веб-сайт или целевую страницу. Но продвинутая стратегия включает в себя показ рекламы, предлагающей дополнительные услуги существующим клиентам, путем ретаргетинга людей, которые посещают страницы, ориентированные на клиентов, такие как платежные порталы, страницы входа и т. Д.

Если вы устали просто думать об использовании всех этих тактик, представьте, как устала ваша аудитория от того, что снова и снова видит одну и ту же рекламу и на снова.

Но это не обязательно, когда вы устанавливаете «ограничение частоты показов» в своей кампании ретаргетинга, чтобы ограничить количество раз, когда один и тот же человек видит одно и то же объявление. Затем есть код записи (или пиксель записи), который идентифицирует потребителей, которые уже совершили конверсию, чтобы вы больше не тратили свои деньги или их энергию на повторяющуюся рекламу.

И последнее, но не менее важное, есть A / B-тестирование, которое представляет собой процесс сравнения двух разных версий одного и того же, чтобы определить, какая из них работает лучше.

Когда дело доходит до ретаргетинга рекламы, вы можете протестировать все, от рекламного контента до платформы и сегментации аудитории. При A / B-тестировании важно, чтобы вы вносили и измеряли только одно небольшое изменение за раз, чтобы точно протестировать и оптимизировать свою ретаргетинговую кампанию.

Готовы поднять свой MSP маркетинг с помощью ретаргетинга?

Или вы качали головой все время, пока читали это руководство, зная, что вы просто , слишком заняты, работая в своем бизнесе, а не на , чтобы когда-либо применять какую-либо из этих тактик?

Ну, этого просто не пойдет.Вы заслуживаете лучшего — позвольте нам помочь вам оптимизировать ваши операции с помощью NinjaRMM, RMM №1 на G2 Crowd.

Попробуй бесплатно сегодня !

Plarin Менеджер рекламы

Обзор продукции

Менеджер рекламы — это программное обеспечение, которое интегрируется с VK® Ads API, чтобы автоматизировать трудоемкий процесс управления и оптимизации крупномасштабных рекламных кампаний ВКонтакте для максимального увеличения рентабельности инвестиций.Эта сложная система управления рекламой открывает новые возможности для ВКонтакте, обеспечивая автоматическую оптимизацию на основе правил, создание и редактирование массовых объявлений, автоматические алгоритмы оптимизации ставок, расширенную отчетность и аналитику, при этом значительно упрощая процесс создания кампаний и управления ими.

Специально разработан для агентств и рекламодателей, которые стремятся эффективно управлять крупномасштабными рекламными кампаниями ВКонтакте.

Мы гордимся тем, что Plarin Ad Manager был отмечен ВКонтакте как сертифицированная система управления рекламой с момента запуска программы сертификации в январе 2013 года.Этот эксклюзивный статус обеспечивает Plarin улучшенную поддержку бизнеса и приоритетный доступ к продуктам ВКонтакте и командам разработчиков.

Чтобы узнать больше о сертифицированных системах управления рекламой ВКонтакте, посетите:
https://vk.com/page-19542789_44261995


Обзор функций

Социальная реклама сильно отличается от традиционной поисковой и медийной рекламы, и поэтому мы предлагаем нашим клиентам функциональные возможности для решения конкретных проблем.Если вы когда-либо управляли рекламной кампанией в социальных сетях, вы знаете, насколько сложным и трудоемким может быть запуск и анализ рекламы в масштабе, поэтому все функции Plarin разработаны с учетом двух вещей: повышения производительности и экономии времени. Это означает, что значительная часть наших функций уникальна для платформы Plarin.


Настройка многомерных объявлений

Создавайте тысячи объявлений за секунды, используя множество комбинаций объявлений и таргетинга.Просто добавьте заголовки, тексты, URL-адреса и изображения, все остальное делается автоматически.

Возможности массового редактирования

Массовое управление сотнями объявлений и кампаний быстро и эффективно, используя расширенные фильтры или группируя объявления в папки. Невозможно сделать вручную.

Шаблоны объявлений и целей

Используйте шаблоны как для объявлений, так и для таргетинга, чтобы ускорить процесс создания объявлений в будущем.Улучшайте сохраненные шаблоны на основе статистики, чтобы получить лучшие результаты.


Торги в реальном времени

Повышайте прибыльность с помощью настраиваемых алгоритмов назначения ставок в реальном времени, которые постоянно обновляются, чтобы обеспечить максимальную отдачу в рамках бюджета.

Оптимизация на основе правил

Установите полностью настраиваемые правила оптимизации, чтобы определить, когда ваши кампании и объявления должны быть приостановлены, клонированы или повторно размещены в зависимости от ваших ключевых показателей эффективности.

Отслеживание конверсий

Изучите данные о CPA и конверсиях прямо в Plarin. Plarin поддерживает отслеживание целей и электронной торговли из Google Analytics, а также отслеживание нескольких конверсий.


Автоматическое разделение на цель

Используйте функцию таргетинга с автоматическим разделением, чтобы создавать объявления для различных социальных сегментов, таких как география, пол и возраст.

Планирование кампаний

Используйте функцию разделения суток, чтобы определить, в какие дни недели и в какое время должны показываться ваши объявления, чтобы охватить вашу целевую аудиторию.

Иллюстративные графики

Более быстрое определение тенденций с помощью наглядных графиков.Сравнивайте разные показатели одновременно на одном графике.


Журнал активности

Изучите журнал активности, чтобы получить полное представление о истории своей кампании. Здесь сразу видна вся активность пользователей и Plarin.

Уведомления по электронной почте

Включите уведомление по электронной почте о критических событиях, чтобы знать, срабатывает ли какое-либо из правил или достигаются желаемые цели.

Многоязычный интерфейс

Выберите предпочитаемый язык пользовательского интерфейса. Plarin Ad Manager — единственная система управления рекламой ВКонтакте, которая поддерживает как английский, так и русский интерфейс.


Экспорт в Excel

Выберите кампании или объявления, определите, какие показатели вы хотите экспортировать, и нажмите кнопку экспорта.Довольно просто, не правда ли?

Копирование в один клик

Скопируйте и повторно разместите свои кампании и объявления одним щелчком мыши, чтобы сбросить показатель качества и снизить цены за клик.

Ретаргетинг

Найдите тех, с кем хотите поговорить, используя электронную почту, номера телефонов или идентификаторы пользователей ВКонтакте.


в трубопроводе

В рамках нашего стремления к совершенству мы постоянно обновляем Plarin Ad Manager в соответствии с потребностями наших клиентов, чтобы быть на переднем крае технологий. Мы рекомендуем вам присылать нам свои комментарии и предложения, которые помогут нам решить, что выпустить дальше. Мы внимательно читаем все отзывы, но учтите, что мы не можем ответить на все отправленные вами комментарии.Используйте эту форму, чтобы отправить нам свои идеи.


Библиотека изображений

Изменяйте размер и кадрируйте изображения прямо в Plarin Ad Manager, сохраняйте их в структуре папок для удобной сортировки и доступа в будущем.

Построитель отчетов

Используйте встроенные шаблоны, которые выделяют важные данные, чтобы принимать быстрые и эффективные решения.Экспорт отчетов в PDF или отправка по электронной почте.

Допустимые типы трафика — Справочный центр Travelpayouts

В этой статье содержится информация о типах разрешенного трафика в партнерской сети Travelpayouts. Обратите внимание, что эта информация актуальна только для брендов Aviasales и Hotellook. Если вас интересует разрешенный трафик для других программ в нашей партнерской сети, ознакомьтесь с соответствующей информацией в описании каждой программы на вашей партнерской панели.

Описание типов трафика вы найдете под таблицей.

Тип трафика Разрешено или запрещено
Контекстная реклама

Запрещено посещать jetradar.com, jetradar.de, jetradar.co.uk, jetradar.co.uk, jetradar.co.nz, jetradar.sg, jetradar.in, jetradar.es, jetradar.co.th, hotellook. com, hotellook.de, hotellook.com.au, hotellook.co.uk, hotellook.es, aviasales.ru домены.

Допускается через White Label

Подробнее здесь.

Контекстная реклама бренда Запрещено
Тизерная реклама Разрешено
Дверные проемы Разрешено
Click-Under Запрещено
Всплывающее окно Разрешено
Pop-Under Запрещено
Электронный маркетинг Разрешено
Группы и страницы в социальных сетях Разрешено, кроме СПАМА
Таргетированная реклама в социальных сетях Запрещено
Приложения в социальных сетях По договоренности
Мессенджеры (Telegram, Viber и другие) Разрешено, кроме СПАМА
В мобильных приложениях Запрещено
Мотивированный трафик Запрещено
Кэшбэк Разрешено
iframe

Запрещено (партнерские ссылки на сайты Aviasales, Jetradar или Hotellook)

Панель инструментов Запрещено
Ретаргетинг / ремаркетинг Запрещено
Наберите Разрешено
Тайпосквоттинг Запрещено
Промокоды Запрещено
Взрослый трафик Запрещено
Youtube-трафик Запрещено
  • Реклама брендов — Использование названия или его производных в рекламе (например, билеты на # Jetradar #).Вы можете разрешить или запретить аффилированным лицам делать ставки и / или использовать торговую марку рекламодателя или ее производные. Вы также можете упомянуть эти запрещенные производные \ ключевые слова в разделе «прочее».
  • Тизерная реклама — Тизерная реклама — это термин, используемый для рекламной кампании, в которой потребителю представляется серия рекламных объявлений без раскрытия полной идентичности продукта или бренда до последнего объявления. Рекламные кампании-тизеры состоят из двух частей: серии рекламных тизеров (одна или несколько) и разоблачительной рекламы.Обычно реклама размещается на сайтах с основной посещаемостью (агрегаторы новостей и т. Д.).
  • Click-Under — Агрессивная реклама. Окно с сайтом рекламодателя открывается под окном текущего пользователя после любого щелчка по исходному сайту, независимо от воли пользователя.
  • Pop-Up — Агрессивная реклама. Всплывающее окно открывается над текущим окном после того, как вы щелкните любую область исходного сайта.
  • Pop-Under — Агрессивная реклама.Пока пользователь читает страницу, открывается новое ФОНОВОЕ окно, не беспокоя пользователя. В этом окне загружается рекламируемый веб-сайт.
  • Электронный маркетинг — Использование партнерских ссылок в электронном маркетинге через вашу собственную базу данных адресов электронной почты. По умолчанию СПАМ запрещен.
  • Группы и страницы в социальных сетях — Реклама на страницах ВКонтакте, Facebook и других социальных сетях.
  • Таргетированная реклама в социальных сетях — Показывать рекламу в ВК, Facebook и других социальных сетях с использованием возможностей рекламной сети для таргетинга рекламы.Например, отправьте рекламу определенной аудитории, например мужчинам 18–26 лет, Нью-Йорку.
  • Приложения в социальных сетях — Показывать рекламу в приложениях ВКонтакте. Встроенная реклама или реклама через рекламные сети.
  • Мессенджеры (Telegram, Viber и другие) — Распространение рекламных ссылок и других рекламных материалов в мессенджерах типа Telegram, Viber и других. Вы можете размещать ссылки в своих каналах / группах (если их содержание не противоречит закону).Разрешена реклама в чужих каналах / группах по согласованию с их владельцами. По умолчанию СПАМ запрещен.
  • В мобильных приложениях — Показывать рекламу (в различных форматах) в мобильных приложениях. Встроенная реклама или реклама через рекламные сети.
  • Дорвеи — Страницы дорвеев — это веб-страницы, которые создаются (могут быть сгенерированы) для преднамеренного манипулирования индексами поисковых систем (спамодексинг). Часто это некачественный трафик, который, тем не менее, может приносить продажи.
  • Мотивированный трафик — Пользователь мотивирован пройти рекламу и совершить действие. Мотивация обычно — это деньги или бонус — например, купить страховку или тур и получить бонус.
  • Кэшбэк — Возврат части уплаченной суммы покупателю. Например, веб-мастер обещает возврат 4% стоимости страховки каждому, кто покупает страховку по его ссылке. Вебмастер возмещает 4% своей комиссии.
  • Iframe — часто включает мошеннический трафик.Обычно «невидимый» iframe используется для размещения cookie для максимального количества посетителей.
  • Панель инструментов — часто включает мошеннический трафик. Партнер A распространяет свою панель инструментов (плагин для браузера), которая изменяет cookie исходного партнера B, который фактически привлек покупателя. В результате комиссия на основе файла cookie поступает не тому человеку.
  • Ретаргетинг / ремаркетинг — Пользователь, который уже был заинтересован в продукте, но не совершил покупку, может быть «найден» с помощью ретаргетинга / ремаркетинга.Ретаргетинг, также известный как ремаркетинг, представляет собой форму онлайн-рекламы, которая может помочь вам удержать ваш бренд от отраженного трафика после того, как он покинет ваш сайт.
  • Введите — термин, описывающий, когда посетители попадают на веб-сайт, вводя ключевое слово или фразу (без пробелов или дефисов вместо пробелов) в адресной строке веб-браузера, а не переходя по гиперссылке с другого сайта. веб-страницу, используя закладку браузера или поиск в окне поиска.
  • Typosquatting — например, веб-мастер создает сайт: hotelook.com (исходный: hotellook.com) и размещает инструменты для аффилированных лиц в надежде, что пользователь неправильно введет имя сайта (набирает) в браузере.
  • Промокоды — Используйте промокоды рекламодателя для других маркетинговых мероприятий по привлечению пользователей.
  • Adult-трафик — Трафик с сайтов для взрослых.
  • Youtube-трафик — Трафик с Youtube.

Гетерозиготные мутации в SMARCA2 перепрограммируют ландшафт энхансеров путем глобального перенацеливания SMARCA4

РЕЗЮМЕ

Комплексы SWI / SNF млекопитающих представляют собой мультисубъединичные комплексы ремоделирования хроматина, связанные с АТФазой SMARCA4 или SMARCA2.Гетерозиготные мутации в АТФазе SMARCA2 вызывают синдром Николаидеса-Барайцера (NCBRS), синдром умственной отсталости, связанный с задержкой начала речи. Мы сконструировали эмбриональные стволовые клетки человека (hESC), несущие NCBRS-ассоциированные гетерозиготные мутации SMARCA2 K755R или R1159Q. В то время как мутантные hESC SMARCA2 были фенотипически нормальными, дифференцировка в нейральные клетки-предшественники (NPC) была серьезно нарушена. Мы обнаружили, что мутации SMARCA2 вызывают реорганизацию энхансеров с потерей SOX3-зависимых нервных энхансеров и заметным появлением астроцит-специфичных энхансеров de novo .Изменения доступности хроматина на энхансерах были связаны с увеличением связывания SMARCA2 и перенацеливания SMARCA4. Мы показываем, что член семейства AP-1 FRA2 аберрантно сверхэкспрессируется в SMARCA2 мутантных NPCs, где он функционирует как пионерный фактор на de novo энхансерах. В совокупности наши результаты демонстрируют, что мутации SMARCA2 вызывают нарушение дифференцировки из-за перепрограммирования энхансера через несоответствующее нацеливание на SMARCA4.

Графическое резюме:

Рекламное объявление eTOC ( Также должно быть включено рекламное объявление eTOC, длина которого не превышает 50 слов, описывающих контекст и значение результатов для более широкой читательской аудитории журнала.При написании этого абзаца, пожалуйста, нацелите его на неспециалистов, выделив основной концептуальный момент статьи простым языком, без обширных экспериментальных деталей. Рекламное объявление должно быть написано от третьего лица и ссылаться на «Первого автора и др.» ):

Мутации в субъединицах комплекса SWI / SNF вызывают нарушения развития, связанные с умственной отсталостью и задержкой речи. Однако механистическая основа болезни плохо изучена. Gao et al. показывают, что ассоциированные с заболеванием мутации SMARCA2 приводят к нарушению нейральной дифференцировки из-за изменений в экспрессии факторов транскрипции, которые управляют перепрограммированием энхансеров.

ВВЕДЕНИЕ

Комплексы ремоделирования хроматина SWI / SNF млекопитающих играют ключевую роль в регуляции эмбрионального развития и детерминации клонов. Комплексы SWI / SNF состоят из АТФазы, SMARCA4 (BRG1) или SMARCA2 (BRM), и до 15 связанных субъединиц, кодируемых 29 генами (Hargreaves and Crabtree, 2011; Kadoch et al., 2013). Недавние усилия по секвенированию следующего поколения выявили de novo мутаций в субъединицах комплекса SWI / SNF у людей с синдромом Коффина-Сириса (CSS) (Miyake et al., 2016; Santen et al., 2012; Santen et al., 2013; Цурусаки и др., 2012; Zarate et al., 2016) и синдром Николаидеса-Баррайтсера (NCBRS) (Tang et al., 2017; Van Houdt et al., 2012; Wolff et al., 2012), а также у лиц с неопределенными нарушениями развития (Deciphering Расстройства развития, 2015; Wright et al., 2018) и аутизм (De Rubeis et al., 2014; Stessman et al., 2017; Yuen et al., 2017). Эти синдромы характеризуются умственной отсталостью и задержкой или отсутствием речевого развития, а также различными лицевыми и скелетными аномалиями (Kosho and Okamoto, 2014; Pretegiani et al., 2016). Считается, что гетерозиготные миссенс-мутации в домене SMARCA2 ATPase являются основной причиной NCBRS и теперь используются в качестве генетического идентификатора этого синдрома (Sousa and Hennekam, 2014). Однако неизвестно, как мутации в генах субъединиц SWI / SNF и, в частности, миссенс-мутации в SMARCA2 влияют на нейронную дифференцировку человека.

Во время эмбрионального развития комплекс SWI / SNF комбинаторно собирается, давая начало функциям, специфичным для типов клеток и стадий развития (Ho and Crabtree, 2010).Во время дифференцировки от эмбриональных стволовых клеток (ESC) к нейральным клеткам-предшественникам (NPC) экспрессия SMARCA4 постепенно снижается, в то время как SMARCA2 активируется и продолжает высоко экспрессироваться в нейронах (Lessard et al., 2007; Staahl et al., 2013; Wu et al., 2007). SMARCA4 необходим для пролиферации нервных стволовых клеток (Lessard et al., 2007; Wu et al., 2007). Кроме того, условная делеция SMARCA4 в нервных стволовых клетках взрослых приводит к аномальной нейральной дифференцировке, в частности, из-за неспособности регулировать экспрессию зависимых от PAX6 генов (Ninkovic et al., 2013). Напротив, гетерозиготная или полная делеция SMARCA2 не влияет на развивающуюся мышь, кроме того факта, что эти мыши немного больше (Reyes et al., 1998). Таким образом, фенотипы, возникающие в результате гетерозиготных миссенс-мутаций SMARCA2 у индивидуумов NCBRS, не согласуются с потерей функции SMARCA2.

На молекулярном уровне было высказано предположение, что мутанты АТФазы мешают активации транскрипции, опосредованной комплексами SWI / SNF. Ранние исследования продемонстрировали, что мутации в АТФазе SMARCA4, а именно в K785R, приводят к снижению активности ремоделирования АТФазы и хроматина, не влияя на стабильность белка или сборку комплекса SWI / SNF (Richmond and Peterson, 1996; Sif et al., 2001). Трансформация SMARCA4 K785R в дрожжи swi2Δ или SWI2 + устраняет SWI2-зависимую транскрипцию из дрожжевого локуса HO (Khavari et al., 1993). Точно так же экспрессия SMARCA4 K785R отменяет SWI / SNF-зависимую экспрессию репортерных конструкций люциферазы GRE и EF-1a, трансфицированных в дрожжевые или человеческие клетки, соответственно (Khavari et al., 1993; Richmond and Peterson, 1996). Эти данные в совокупности предлагают модель, в которой мутации в АТФазном домене гомолога SMARCA4 SMARCA2 могут приводить к экспрессии мутантного белка, который доминантно препятствует способности АТФазы дикого типа ремоделировать хроматин и активировать транскрипцию.Однако мутанты SMARCA2 не были охарактеризованы ни в in vitro анализах ремоделирования хроматина , ни в контексте дифференцировки in vivo .

Чтобы понять молекулярную основу миссенс-мутаций SMARCA2, мы разработали модельную систему, использующую дифференцировку человеческих ESC в NPC генно-инженерных мутантных ESCs. Мы обнаружили, что мутации в SMARCA2 нарушают дифференцировку нейронов, что приводит к потере самообновления NPC и потере экспрессии маркера NPC.Потеря нейральной дифференцировки сопровождается изменениями в экспрессии генов, включая потерю нервно-специфических факторов SOX2 , SOX3 и последующих мишеней PAX6 и SOX11 . Эпигеномный анализ с использованием анализа доступного для транспозаз хроматина с высокопроизводительным секвенированием (ATAC-seq) продемонстрировал, что мутантные NPC по SMARCA2 имеют значительные потери в доступности хроматина на клеточных энхансерах, в первую очередь на связывающих мотивах SOX3, что сопровождается потерей активирующего гистона. модификации и привязка SOX3.Неожиданно потеря доступности хроматина на этих сайтах коррелирует с потерей связывания SMARCA4 и отсутствием изменений в уже низких уровнях связывания SMARCA2. С другой стороны, прирост совместно связанных SMARCA4 и SMARCA2 коррелирует с активацией de novo дистальных энхансеров, связанных с клоном астроцитов. Механически мы обнаружили, что перенацеливание SMARCA4 и SMARCA2 на энхансеры de novo управляется новаторской активностью факторов AP-1, включая FRA2, которые сверхэкспрессируются в мутантных NPC SMARCA2.Наши исследования обеспечивают важную информацию об эпигенетическом контроле нейральной дифференцировки и бросают вызов существующим моделям молекулярной активности мутантных АТФаз. Это, в свою очередь, имеет значение для нарушений умственной отсталости и рака, где миссенс-мутации АТФазы преобладают в SMARCA2 и его гомологе SMARCA4.

РЕЗУЛЬТАТЫ

NCBRS-ассоциированные мутации SMARCA2 вызывают нарушение дифференцировки нейральных предшественников

Чтобы определить, насколько вероятно, что отдельные миссенс-мутации SMARCA2 являются патогенными, мы провели анализ консервации АТФазного домена SMARCA2 человека с помощью ConSurf (Ashkenazy et al., 2010; Berezin et al., 2004), который оценивает отдельные аминокислоты от 1 (наименьшее) до 9 (наибольшее) консервативное (). Мы картировали мутации, выявленные у пациентов с NCBRS, а также однонуклеотидные варианты (SNV) из нормальной популяции (Lek et al., 2016) и обнаружили, что связанные с заболеванием миссенс-мутации значительно больше обогащены в высококонсервативных областях, чем нормальные SNV, что позволяет предположить они, вероятно, играют причинную роль в возникновении дефектов развития, наблюдаемых у индивидов NCBRS (,).Сопоставляя NCBRS-ассоциированные мутации с соответствующими остатками дрожжевого SWI2 (Liu et al., 2017), мы также обнаружили, что все эти мутации происходят на остатках, которые контактируют с ДНК (). Эти данные предполагают, что мутации, связанные с NCBRS, могут влиять на функцию SMARCA2 аналогичным образом, потенциально влияя на связывание ДНК или ДНК-зависимую активность АТФазы.

Мутации SMARCA2 нарушают дифференцировку нейральных предшественников.

A. Схематическая диаграмма домена АТФазы SMARCA2 с оценкой сохранения.B. Анализ сохранения, сравнивающий SNV NCBRS с нормальными SNV. Планки погрешностей = среднее ± стандартное отклонение, n = 28 (NCBRS), 24 (нормальный) C. Структура дрожжевого домена SNF2 и ДНК с мутациями NCBRS, отмеченными красным. D. Световая микроскопия NPC SMARCA2 + / + , SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . E. Слияние клеток WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC. **: p <0,01, * p <0,05 Планки погрешностей = среднее ± стандартное отклонение, n = 4. F. Анализ клеточного цикла NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + , измеренный путем окрашивания йодидом пропидия.Полоса ошибок = среднее ± стандартное отклонение, n = 3. G и H. Иммунофлуоресценция NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + , окрашенных PAX6 и NESTIN (слева) или SOX2 и Ki67 (справа) вместе с DAPI. Шкала шкалы = 50 мкм. I. Количественное определение процента положительно окрашенных клеток в G и H, шкала погрешности = среднее ± стандартное отклонение, n = 3. J. Иммунофлуоресценция нейронов WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + , окрашенных TUJ1, MAP2 и DAPI. Шкала шкалы = 50 мкм. K. Количественное определение количества положительно окрашенных клеток на поле в Дж, шкала погрешности = среднее ± стандартное отклонение, n = 3.См. Также рисунок S1.

Чтобы изучить, как мутации, связанные с NCBRS, влияют на развитие нервной системы, мы использовали редактирование CRISPR / Cas9 для введения гетерозиготных мутаций K755R или R1159Q SMARCA2 в линию hESC H9, поскольку первая, как известно, отменяет активность АТФазы в дрожжевом SWI2 (Richmond and Peterson , 1996; Sif et al., 2001) и последний, поскольку это наиболее частая мутация в NCBRS. Мы подтвердили гетерозиготность геномной ДНК и кДНК экспрессируемых транскриптов (рисунок S1A). Мы не наблюдали каких-либо морфологических изменений или различий в экспрессии маркеров плюрипотентности OCT4, SOX2 или субъединиц SWI / SNF в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159 90Q4 HES по сравнению с W1159 + . hESCs (рисунок S1B – D), что указывает на то, что мутации SMARCA2 не оказывают существенного влияния на регуляторную сеть hESC.Чтобы изучить, как мутации SMARCA2 влияют на нейральную дифференцировку, мы дифференцировали hESCs в NPCs, используя протокол формирования эмбриоидных телец (EB) с последующей изоляцией нервной розетки (Zhang et al., 2001). NPC, происходящие от hESC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + hESC, были крупнее, чем NPC WT с менее конденсированными ядрами и пролиферировали медленнее, чем NPC WT в фазе G клеточный цикл (-). Мы провели иммунофлуоресценцию для маркеров нейральных предшественников NESTIN, PAX6 и SOX2.В то время как уровни NESTIN были схожими между мутантными NPC WT и SMARCA2, значительно меньшее количество NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC, окрашенных в SMARCA, показало, что мутантный SMARC2 не экспрессирует SMARC2, который не может экспрессировать мутантный SMARC2 PAX6 или ключевые факторы транскрипции, связанные с идентичностью NPC (-). В соответствии с нашим анализом клеточного цикла мы обнаружили, что меньше мутантных NPC по SMARCA2 окрашиваются положительно по маркеру пролиферации Ki67 (,). SMARCA2 мутантные NPC неспособны дифференцироваться в нейроны, несмотря на устойчивую нейрональную дифференцировку WT NPC, на что указывает нейрон-специфический β-тубулин класса III (Tuj1) и связанный с микротрубочками белок 2 (MAP2) и разрастание дендритных отростков (,).Эти данные указывают на то, что мутации SMARCA2 влияют на самообновление NPC и нарушают собственно нейральную дифференцировку.

Экспрессия генов нейральных предшественников нарушена в мутантных NPC SMARCA2

Чтобы понять, как мутации SMARCA2 влияют на экспрессию нейральных генов на глобальном уровне, мы выполнили последовательность РНК на WT, SMARCA2 K755 90R / и SMARCA2 R1159Q / + NPC. Несколько сотен генов по-разному регулировались вверх и вниз в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC (). SMARCA2 R1159Q / + NPC продемонстрировали высокую степень перекрытия с SMARCA2 K755R / + NPC, с 1244 и 526 генами, регулируемыми вверх и вниз (соответственно) у обоих мутантов. Среди этих дифференциально экспрессируемых генов (DEG) несколько ключевых регуляторов нейральной идентичности были значительно подавлены в обеих мутантных линиях NPC по SMARCA2, включая SOX2 , SOX3 , SOX11 , PAX6 и RFX4 ().Мы наблюдали повышенную регуляцию белков внеклеточного матрикса, таких как FN1 и COL1A1 , факторов транскрипции семейства NFI NFIB, NFIA и NFIX , связанных с астроглиогенезом, а также факторов транскрипции AP-1 FOSL1 , , , FOSL2 , JUNB и JUND в мутантных NPC по SMARCA2 (). Анализ онтологии генов (GO) показал значительное обогащение генов, участвующих в клеточном цикле, развитии центральной нервной системы и нейрогенезе среди подавленных DEG, что согласуется с наблюдаемыми нами клеточными и митотическими фенотипами (, -).Активизированные ДЭГ были обогащены внеклеточным матриксом, внеклеточным пространством и структурой, а также условиями развития ткани (). Эти данные демонстрируют, что NCBRS-ассоциированные мутации в SMARCA2 вызывают изменения транскрипции, которые приводят к нарушению нейральной дифференцировки из-за подавления нервных факторов транскрипции и генов нейрогенеза.

Мутантные NPC по SMARCA2 имеют измененную экспрессию генов.

A. Диаграмма разброса среднего log2 фрагментов на килобазу транскриптов на миллион отображенных считываний (FPKM) уровня экспрессии мРНК против log2-кратного изменения (FC) в экспрессии SMARCA2 K755R / + / WT (вверху) или SMARCA2 R1159Q / + / WT NPC (внизу).B. Иерархическая кластеризация log2 FPKM дифференциально экспрессируемых генов (DEG) в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . C. Перекрытие активированных и подавленных DEG в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . D. Важность анализа онтологии генов (GO) генов, которые подвергаются понижающей регуляции (вверху) или усиленной регуляции (внизу) как в NPC SMARCA2 K755R / + , так и в SMARCA2 R1159Q / + . E. FPKM субъединиц SWI / SNF в NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + .Планки погрешностей = среднее ± стандартное отклонение, n = 2. F. Иммуноблоттинг уровня белка субъединиц SWI / SNF в NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . G. Количественное определение вестерн-блоттинга, как представлено на F, планки ошибок = среднее ± стандартное отклонение, размер образца см. Метод. Иммунопреципитация H. SMARCA2 в NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + и иммуноблоттинг для указанных субъединиц SWI / SNF. См. Также рисунок S2.

Мы также измерили экспрессию субъединиц SWI / SNF с помощью RNA-seq и иммуноблоттинга в мутантных NPC по SMARCA2.Мы обнаружили, что несколько субъединиц SWI / SNF были уменьшены на уровне мРНК, включая SMARCA4, ARID1A и SMARCD1, в то время как SMARCA2 и SMARCD2 / 3 были активированы (). Белки SMARCD1 и ARID1A также были значительно снижены, но экспрессия белков многих других субъединиц SWI / SNF существенно не пострадала (,). SMARCA2, однако, сильно повышается как на уровне мРНК, так и на уровне белка (-). Кроме того, мы обнаружили, что SMARCA2 может эффективно иммунопреципитироваться в мутантных NPC SMARCA2, где он ассоциируется с известными субъединицами комплекса SWI / SNF, но не с SMARCA4, который является взаимоисключающим с SMARCA2 в сборке комплекса SWI / SNF ().Чтобы напрямую сравнить биохимические свойства мутантных белков WT и SMARCA2, мы лентивирусно экспрессировали AM tagged-SMARCA2 WT, K755R или R1159Q в NPC и обнаружили, что не было никакой разницы в способности WT или мутантного SMARCA2 связываться с SWI / SNF. субъединицы (рисунок S2A). Эти данные подтверждают, что миссенс-мутации в SMARCA2 не влияют на способность мутантного белка экспрессироваться или собираться с субъединицами SWI / SNF, что согласуется с предыдущими сообщениями (Richmond and Peterson, 1996).Однако изменения в экспрессии субъединиц SWI / SNF, включая повышающую регуляцию SMARCA2, могут вносить вклад в мутантные фенотипы SMARCA2. Т.о., дефекты нейральной дифференцировки в мутантных NPC SMARCA2 возникают из-за изменений транскрипции, связанных с экспрессией и включением мутантного белка SMARCA2 в комплексы SWI / SNF.

Мутации SMARCA2 приводят к изменениям доступности хроматина, коррелированным со связыванием SMARCA4

Предыдущее исследование показало, что SMARCA4 K785R, который аналогичен SMARCA2 K755R, снижает активность ремоделирования хроматина in vitro на нуклеосомных матрицах (Sif et al., 2001). Таким образом, мы предположили, что активность ремоделирования хроматина будет нарушена в клетках, экспрессирующих мутации АТФазы SMARCA2. Мы выполнили ATAC-seq в мутантных NPC WT и SMARCA2 и обнаружили, что десятки тысяч сайтов регулируются по-разному, с удивительно примерно равным количеством сайтов с повышенной и отрицательной регуляцией в обоих SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC (,). Мы не наблюдали значительных изменений между NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + , что позволяет предположить, что эти мутации имеют очень похожие эффекты на ремоделирование хроматина ().Таким образом, мутации SMARCA2 не вызывают сплошного ингибирования ремоделирования хроматина, а скорее приводят к изменениям в доступности, отражающим широко распространенные потери и выгоды.

Изменения в доступности хроматина у мутантных NPC по SMARCA2 коррелируют со связыванием SMARCA4.

A. Диаграмма рассеяния средней плотности тегов Log2 ATAC-seq WT по отношению к SMARCA2 K755R / + (вверху), WT по отношению к SMARCA2 R1159Q / + (в центре) и SMARCA2 K755R / + по отношению к SMARCA2 90/773 (внизу).B. Тепловая карта плотности тегов log2 ATAC на дифференциально доступных сайтах в NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . C. Диаграмма рассеяния средней плотности тегов Log2 ChIP-seq WT против SMARCA2 K755R / + (вверху), WT против SMARCA2 R1159Q / + (посередине) и SMARCA2 K755R / + против SMARCA2 R11459Q / Нижний). D. Тепловая карта тегов SMARCA2 и SMARCA4 ChIP-seq на сайтах с повышенной или пониженной доступностью в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC, сгруппированных, как в B.E и F. Гистограмма нормализованного сигнала ChIP-seq для SMARCA2 или SMARCA4 на сайтах, которые уменьшили (E, n = 15,791) или увеличили (F, n = 19,203) доступность в SMARCA2 K755R / + или SMARCA2 R1159Q / + NPC. G. Диаграмма рассеяния log2-кратного изменения (FC) SMARCA2 от плотности SMARCA4 ChIP в SMARCA2 K755R / + (слева) или SMARCA2 R1159Q / + (справа) по сравнению с WT. H. Круговая диаграмма состава сайтов с пониженной (вниз) или повышенной (вверх) доступностью в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + по сравнению с NPC WT.См. Также рисунки S2 и S3.

Чтобы понять, как геномная занятость SMARCA2 и SMARCA4 соответствует изменениям в доступности хроматина, мы выполнили ChIP-seq для SMARCA4 и SMARCA2 в WT, SMARCA2 K755R / + и Q7 + NPC. Удивительно, но мы восстановили <100 пиков для SMARCA2 в WT NPC (,). Напротив, мы обнаружили 54 920 и 34 362 пика SMARCA2 в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC, соответственно, что предполагает глобальное усиление связывания хроматина 2 с SMARCA.Чтобы проверить, является ли это усиление связывания результатом повышенной ядерной локализации или сродства связывания ДНК мутантного SMARCA2, мы выполнили клеточное фракционирование и экстракцию солей на мутантных NPC WT и SMARCA2. Мы обнаружили, что клеточная локализация (рисунок S3A, B) и аффинность связывания ДНК (рисунок S3C, D) субъединиц SWI / SNF, включая SMARCA2, были сходными у мутантных NPC WT и SMARCA2. Кроме того, мы не обнаружили разницы в способности AM-SMARCA2 WT, K755R или R1159Q извлекаться из ДНК (рис. S2B, C).Таким образом, мутантные белки SMARCA2 не обладают резко измененным клеточным распределением или аффинностью связывания ДНК, которые могли бы объяснить усиление связывания SMARCA2 в мутантных NPC SMARCA2.

В отличие от SMARCA2, мы наблюдали устойчивое связывание SMARCA4 на 49 280 сайтах в WT NPCs (). Связывание SMARCA4 было потеряно на 31 194/28 580 сайтах и ​​увеличено на 70 582/73 359 сайтах в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC относительно WT соответственно.Поразительно, что потеря доступности коррелировала с потерей связывания SMARCA4 в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC с небольшими изменениями или без изменений в уже низких уровнях связывания SMARCA2 ( ). С другой стороны, повышение доступности коррелировало с усилением связывания как SMARCA4, так и SMARCA2 (,). Связывание SMARCA4 и SMARCA2 сильно коррелировало на сайтах, которые стали доступными, перекрываясь на 66,2% и 64.4% сайтов связывания SMARCA2 в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC (). Таким образом, SMARCA2 и SMARCA4 демонстрируют повышенное, скоординированное и функционально активное связывание с хроматином, в результате чего тысячи сайтов становятся более доступными. Чтобы сравнить связывание WT и мутанта SMARCA2, мы выполнили AM-ChIP на SMARCA2 R1159Q / + NPC, экспрессирующих AM-SMARCA2 WT или R1159Q, и обнаружили, что связывание WT и мутантного SMARCA2 в значительной степени перекрывается с обоими локализация на сайтах, которые становятся доступными (рис. S2D, E).Т.о., перенацеливание SMARCA2 в SMARCA2 мутантных NPCs не связано с присущими им различиями в аффинности связывания ДНК или каталитической активности, позволяющей предпочтительную фиксацию ChIP мутантного SMARCA2, как это наблюдалось в случае ISWI (Gelbart et al., 2005). Наконец, мы аннотировали пораженные сайты и обнаружили, что подавляющее большинство дифференциально доступных сайтов находится в межгенных или интронных областях (). Эти данные демонстрируют удивительное открытие, что изменения в доступности хроматина у мутантных NPC SMARCA2 согласуются с глобальным перенацеливанием SMARCA4, а не с потерей функции или доминантно-негативной активностью мутантного SMARCA2.Фактически, хотя связывание ДНК SMARCA2 резко увеличивается в мутантных NPC по SMARCA2, это связывание происходит специфически в тех участках, где наблюдается активное ремоделирование хроматина в форме повышенной доступности.

Нейро-специфические энхансеры потеряны в мутантных NPC по SMARCA2

Мы перекрыли сайты, доступность которых увеличилась или уменьшилась в мутантных NPC по SMARCA2, с ChIP-seq модификаций гистонов из NPC WT (). Сайты, которые теряют доступность хроматина, обогащены монометилированием гистона 3, лизина 4 (h4K4me) и ацетилированием гистона 3 лизина 27 (h4K27ac), обнаруживаемым у сбалансированных, активных и суперэнхансеров (Rada-Iglesias, 2018; Whyte et al., 2013), и в меньшей степени триметилирование гистона 3 лизина 4 (h4K4me3) обычно обнаруживается на промоторах, но не на сайтах, отмеченных триметилированием гистона 3 лизина 27 (h4K27me3). Однако на сайтах, которые стали доступными (), не было практически никакого обогащения какими-либо модификациями. Затем мы выполнили ChIP-seq для h4K4me и h4K27ac в мутантных NPC по SMARCA2. Мы обнаружили, что нейроноспецифические энхансеры, которые теряют доступность, также теряют h4K4me и h4K27ac в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC, что позволяет предположить, что эти сайты теряют активные гистоны. Мероприятия ().Таким образом, сайты, которые теряют доступность, отражают потерю открытого хроматина в нейронных регуляторных элементах, тогда как приобретенные сайты возникают в сайтах, которые не имеют сбалансированных и активных меток гистонов.

SOX3-зависимые нервные энхансеры теряются в мутантных NPC по SMARCA2.

A. Обогащение сайтов, которые увеличивают или уменьшают доступность как в NPC SMARCA2 K755R / + , так и в SMARCA2 R1159Q / + для модификаций гистонов и групп энхансеров в NPC WT. Б. Гистограмма нормализованных тегов ChIP-seq для h4K4me и h4K27ac на активных энхансерах NPC (n = 4977), которые теряют доступность в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + .C. Значение обогащения мотивов de novo на сайтах, которые теряют доступность в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . D. Мотивы SOX3 и RFX1, идентифицированные в C. E. Доля уменьшенных доступных сайтов в NPC SMARCA2 K755R / + или SMARCA2 R1159Q / + , содержащих указанный мотив. F. Перекрытие сайтов связывания SOX2, SOX3 и SMARCA4 ChIP-seq. G. Доля суперэнхансеров (SE) NPC или суперэнхансеров мозга (поясная извилина), которые связаны с SMARCA4 или SMARCA4, SOX2 и SOX3.H. Гистограмма нормализованных тегов ChIP-seq для SMARCA4 в NPC WT, трансфицированных siRNA против контроля или SOX2 и SOX3 в сайтах связывания SOX3, которые теряют доступность хроматина (n = 3190). I. Иммуноблот SOX2 / 3 в WT, SMARCA2 K755R / + , SMARCA2 R1159Q / + NPC. J-N. Гистограмма нормализованных тегов ChIP-seq для тегов SOX2 (J), SOX3 (K), SMARCA4 (L), SMARCA2 (M) или ATAC-seq (N) в WT, SMARCA2 K755R / + или SMARCA2 R1159Q / + NPC в сайтах связывания SOX3, которые теряют доступность (n = 3190).О. Фракция всех дифференциально экспрессируемых генов (DEG) от SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC, связанных с SOX2, SOX3 или обоими. P. Разделите все DEG из SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC с понижающей или повышающей регуляцией в NPC с нокдауном SOX2 / SOX3. См. Также рисунок S4.

Анализ мотивов на уменьшенных доступных сайтах выявил обогащение мотивов для SOX3, RFX1, HOXA2, MEIS1 и BRN1 (,). Действительно, мотивы SOX3 присутствуют почти в 50% сайтов, которые теряют доступность в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC ().Чтобы идентифицировать bone fide сайтов связывания SOX3 в NPCs, мы выполнили SOX3 ChIP-seq, а также SOX2 ChIP-seq, поскольку SOX2, как было показано, инициирует связывание SOX3 в NPCs мышей (Bergsland et al., 2011). Мы обнаружили, что SOX2 и SOX3 связаны друг с другом и с SMARCA4 в NPC (). Кроме того, мы обнаружили, что SMARCA4 связан с подавляющим большинством NPC-специфичных суперэнхансеров, а также суперэнхансеров, определенных в ткани мозга из поясной извилины (Khan and Zhang, 2016), большинство из которых также связаны с SOX2 и SOX3 ().Чтобы определить, рекрутируют ли SOX2 и SOX3 SMARCA4, мы сбили SOX2 и SOX3 в NPC с помощью siRNA-опосредованной трансфекции (рисунок S4A). Действительно, связывание SMARCA4 было снижено в сайтах связывания SOX3 в siSOX2 / 3 нокдаун NPC по сравнению с NPC, трансфицированными скремблированным контролем (). Вместе эти данные подтверждают, что SOX2 и SOX3 являются ключевыми факторами транскрипции, которые функционируют, чтобы рекрутировать SMARCA4 на нервно-специфические регуляторные элементы в NPCs.

Затем мы сосредоточились на эпигенетических изменениях в сайтах связывания SOX3 ChIP-seq в мутантных NPC по SMARCA2.В результате более низкой экспрессии мРНК экспрессия белков SOX2 и SOX3 была снижена в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + , что привело к снижению связывания SOX3 и SOX2. в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC в сайтах связывания SOX3 (,). В соответствии с ролью SOX2 / 3 в рекрутировании SMARCA4, мы обнаружили, что связывание SMARCA4 и доступность хроматина были резко снижены на сайтах связывания SOX3 в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R911 (,), в то время как связывание SMARCA2 было низким как у WT, так и у мутантных NPC SMARCA2 на сайтах связывания SOX3 ().Эти данные указывают на то, что потеря экспрессии SOX2 и SOX3 в SMARCA2 мутантных NPCs ведет к неспособности рекрутировать SMARCA4-содержащие SWI / SNF комплексы и поддерживать доступность хроматина в сайтах связывания SOX3, обогащенных нейроноспецифическими энхансерами. Затем мы перекрыли DEG в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC с генами, аннотированными с сайтами связывания SOX2 или SOX3, и обнаружили, что 43% всех мутантных сайтов связывания SMARCA2. , SOX3 или оба ().Кроме того, мы обнаружили, что более 25% генов с подавленной регуляцией в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC также были уменьшены с помощью siSOX2 / 3 нокдауна в мышах al., 2011), включая ключевые нейронные гены PAX6 , POU3F2 , SOX13 и NKX6.1 , в то время как 19% активированных генов, включая FN1 , COL1A1 , JUNB NFIB и NFIX были увеличены после нокдауна SOX2 / 3 ().В качестве примеров мы остановились на PAX6 и SALL1 . Эти гены имеют связывание SOX2 и SOX3 с интронными энхансерами, которые отмечены доступностью и активными модификациями гистонов в NPC WT, которые значительно уменьшены в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q4 + вместе со связыванием SOX2, SOX3 и SMARCA4 (рисунок S4B). Эти результаты демонстрируют, что SOX2 / 3 являются ключевыми факторами транскрипции NPC, которые регулируют нервные гены частично за счет рекрутирования SMARCA4 на нервно-специфические энхансеры.В мутантных NPC SMARCA2 сниженная экспрессия SOX2 / 3 и других факторов транскрипции приводит к потере связывания SMARCA4, доступности хроматина и активным модификациям гистонов в нервно-специфических энхансерах, что приводит к нарушению регуляции транскрипции нервных генов.

Мутации SMARCA2 активируют программу эктопического гена астроцитов

Затем мы исследовали сайты, которые становятся доступными в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R11 94Q4 хроматина доступность, h4K4me и h4K27ac в NPC WT ().Мы называем их de novo энхансерами (DE), чтобы отличить их от сайтов, которые имеют базовую доступность в WT NPCs (). Более того, в подавляющем большинстве увеличенных доступных сайтов (9,309 / 10 015) отсутствуют h4K4me или h4K27ac в hESC, что позволяет предположить, что они полностью возникают de novo , а не из уравновешенных энхансеров, которые предназначены для активации в hESC. Чтобы дополнительно охарактеризовать эти сайты, мы перекрыли сайты, которые потеряли или стали доступными в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC с суперэнхансерами из 59 различных тканей, о которых сообщалось в базе данных dbSUPER (dbSUP Хан и Чжан, 2016).В соответствии с нашими выводами, 30-40% суперэнхансеров, идентифицированных в тканях мозга, включая гиппокамп, нижнюю височную долю и среднюю лобную долю, теряют доступность хроматина в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 RQ + NPC (). Поразительно, однако, что более 60% суперэнхансеров, идентифицированных в астроцитах и ​​миобластах, становятся доступными для хроматина (). Кроме того, DE увеличили h4K4me и h4K27ac в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + , что указывает на то, что активные мутации SMARCA2 приводят к (установлению) мутации.Действительно, из суперэнхансеров астроцитов, которые продемонстрировали повышенную доступность в мутантных NPC по SMARCA2, почти треть также приводила к повышенной экспрессии ближайшего аннотированного астроцит-специфического гена (). Параллельно мы обнаружили, что 20% активированных генов в мутантных NPC по SMARCA2 специфически обогащены астроцитами мыши и человека (Cahoy et al., 2008; Zhang et al., 2016), около половины из которых также демонстрируют повышенную доступность (). Этот список отражает обогащение ранних генов-предшественников астроцитов и включает несколько маркеров астроцитов ( CD44, F3, CLU, и FSTL1 ), семейство факторов транскрипции NFI ( NFIA , NFIB , NFIX , NFIX , NFIX , NFIC ), которые могут способствовать дифференцировке астроцитов in vitro и in vivo (Caiazzo et al., 2015; Денин и др., 2006; Matuzelski et al., 2017), а также нескольких генов роста и выживания астроцитов ( EGFR , NOTCh3 и JUNB ) (Scholze et al., 2014). Эти данные убедительно свидетельствуют о том, что мутантные NPC по SMARCA2 активируют программу эктопических генов астроцитов посредством аберрантной активации de novo энхансеров астроцитов.

Мутации SMARCA2 приводят к активации de novo специфичных для астроцитов энхансеров.

A. Тепловая карта плотности тегов log2 ATAC или тегов ChIP-seq на участках с повышенной доступностью в WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC, определенных как не имеющие доступа (De novo) или пиковое значение доступность (Уравновешенная) в NPC.B. Рейтинг процентного перекрытия сайтов, которые увеличили или уменьшили доступность в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC с суперэнхансерами из 59 тканей в базе данных dbSUPER. C. Гистограмма нормализованных тегов ChIP-seq для h4K4me (вверху) и h4K27ac (внизу) на сайтах DE, которые становятся доступными в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC (n = 9 441). D. Доля генов, ассоциированных с суперэнхансером (SE) астроцитов, с повышенной доступностью и экспрессией генов в мутантных NPC по SMARCA2.E. Доля мутантных SMARCA2-мутантных генов, которые избирательно экспрессируются в астроцитах и ​​имеют повышенную доступность в мутантных NPC SMARCA2.

Новаторская активность AP-1 перенаправляет комплексы SWI / SNF на

de novo энхансеров

Мы обнаружили, что мотив FRA1 (bZIP), специфичный для факторов AP-1, был специфически обогащен на сайтах, которые становятся доступными в мутантных NPC SMARCA2 ( ). Факторы AP-1 часто взаимодействуют с факторами, определяющими клонирование, при клеточной дифференцировке (Heinz et al., 2010; Vierbuchen et al., 2017). Соответственно, мы обнаружили обогащение мотивов RUNX, TEAD и NFI +/- 50 пар оснований от центра мотива AP-1 в сайтах, которые стали доступными в мутантных NPC по SMARCA2. Однако эти мотивы встречаются менее чем в 7% AP-1, содержащих увеличенные доступные сайты (), указывая на то, что AP-1 является основным драйвером в установлении новых доступных сайтов благодаря ранее недооцененной пионерской активности. Члены AP-1 FOSL1 (FRA1), FOSL2 (FRA2) и JUNB были значительно активированы в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R911 , как и белок FRA2 ().Кроме того, мы обнаружили, что связывание FRA2 ChIP было сильно обогащено в сайтах, которые становятся доступными в мутантных NPC по SMARCA2 (). Мы и другие показали, что доступность сайтов связывания AP-1 зависит от комплекса SWI / SNF (Kelso et al., 2017; Mathur et al., 2017; Nakayama et al., 2017), частично опосредованного взаимодействием между Комплексы SWI / SNF и факторы AP-1 (Vierbuchen et al., 2017). Действительно, мы обнаружили, что FRA2 связан с SMARCA4, а также с WT и мутантным SMARCA2 (). Кроме того, мы обнаружили, что связывание SMARCA2 и SMARCA4 резко увеличилось с одновременным увеличением доступности на сайтах DE, которые получают связывание FRA2 в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / s ( ).Эти данные предполагают, что повышающая регуляция факторов AP-1 и, в частности, FRA2 приводит к перенацеливанию SMARCA4- и SMARCA2-содержащих комплексов SWI / SNF, управляя активацией de novo энхансеров. Чтобы проверить эту гипотезу, мы отключили FRA1, FRA2 и JUNB у SMARCA2 R1159Q / + NPC (рис. S5A) и обнаружили, что отключение факторов AP-1 снижает прирост доступности (), а также рекрутирование SMARCA4 и SMARCA2 (,) на сайты связывания FRA2 в SMARCA2 R1159Q / + NPC.Т.о. рекрутирование комплексов SWI / SNF и увеличение доступности хроматина в SMARCA2 мутантных NPCs для энхансеров de novo зависит от AP-1. Наконец, мы обнаружили, что 97% усиленных генов с соответствующим увеличением доступности (n = 595) связаны с FRA2 в мутантных NPC SMARCA2 (), например NFIB и FN1 (Рисунок S5B). Вместе эти данные демонстрируют, что мутации SMARCA2 приводят к перенацеливанию SMARCA4 и SMARCA2 пионерским фактором AP-1, что приводит к функциональному ремоделированию энхансеров астроцитов и усилению регуляции генов астроцитов.

Новаторская активность AP-1 перенаправляет комплексы SWI / SNF на энхансеры de novo.

A. Обогащение мотивов de novo на сайтах, которые становятся доступными в NPC SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . B. Мотив De novo FRA1 (bZIP), идентифицированный в AC (Bottom) Обогащение (-log p значение) мотивов +/- 50 п.н. сайтов AP-1 с повышенной доступностью в SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC. (Вверху) Процент сайтов AP-1 с повышенной доступностью, имеющих указанный мотив.D. FPKM последовательности РНК членов семейства AP-1 в NPC WT, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . Планки погрешностей = среднее ± стандартное отклонение, n = 2. * FDR <0,05. E. Иммуноблоттинг и количественное определение FRA2 у NPC дикого типа, SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + . F. Тепловая карта тегов FRA2 ChIP-seq на разно доступных сайтах, сгруппированных, как в. G. Совместная иммунопреципитация FRA2 SMARCA4, AM-SMARCA2 и AM-SMARCA2 R1159Q в NPC дикого типа. HJ. Гистограмма нормализованных тегов ChIP-seq для тегов SMARCA4 (H), SMARCA2 (I) и ATAC-seq (J) на сайтах DE, которые получают связывание FRA2 в обоих SMARCA2 K755R / + и SMARCA2 R1159Q / + NPC ( n = 7,312).К-М. Гистограмма нормализованных тегов ATAC-seq (K) или тегов ChIP-seq для SMARCA4 (L) и SMARCA2 (M) в NPC SMARCA2 K755R / + , трансфицированных siRNA против контроля или FRA1 / FRA2 / JUNB на сайтах DE, которые увеличивают Связывание FRA2 в SMARCA2 K755R / + NPC (n = 10900). N. Доля генов с повышенной экспрессией, доступностью и связыванием FRA2 в мутантных NPC по SMARCA2. См. Также рисунок S5.

ОБСУЖДЕНИЕ

Здесь мы сообщаем об открытии, что NCBRS-ассоциированные мутации в SMARCA2 приводят к дефектам нейрогенеза, возникающим из-за потери экспрессии SOX3 и SOX3-зависимого рекрутирования SMARCA4 на нервные энхансеры.Это, в свою очередь, приводит к снижению экспрессии генов-мишеней SOX3, включая PAX6, SALL1, и SOX11 . Эти результаты согласуются с несколькими сообщениями, описывающими мутации SOX11 у лиц с умственной отсталостью и фенотипами, связанными с SWI / SNF (Hempel et al., 2016; Tsurusaki et al., 2014). Однако следует отметить, что люди с мутациями SMARCA2 имеют различные и более серьезные фенотипы, чем люди с мутациями SOX11 (Bogershausen and Wollnik, 2018), что позволяет предположить, что фенотипы мутантов SMARCA2, вероятно, происходят из-за изменений в экспрессии многих генов.Например, мы обнаружили, что факторы AP-1 и NFI активируются вместе со многими генами, связанными с астроглиогенезом. AP-1 ранее не участвовал в астроглиогенезе, хотя известно, что передача сигналов MAPK, влияющая на факторы AP-1, необходима для астроглиогенеза in vitro (Rajan and McKay, 1998) и в развивающемся мозге (Li et al. , 2012). Интересно, что гены AP-1 и гены семейства NFI также напрямую связываются с SOX2 / 3 и активируются в NPC, нокдаун SOX2 / 3 (Bergsland et al., 2011), указывая на то, что глиогенез может активно ингибироваться за счет репрессии этих генов SOX2 / 3. В совокупности эти данные предполагают, что морфологические и фенотипические эффекты мутаций SMARCA2 обусловлены нарушением регуляции программ SOX3-зависимых генов, что приводит к потере нейрогенной способности в пользу глиогенного потенциала.

Возможно, наиболее интригующим открытием нашей работы является ассоциация связывания SMARCA4 и SMARCA2 в мутантных NPC SMARCA2 с изменениями в доступности хроматина.Вопреки открытиям об активности мутантного SWI2 (Richmond and Peterson, 1996) и мутантного hBRG1 (Khavari et al., 1993), мы не наблюдали связывания SMARCA2 в ассоциации с уменьшенной доступностью или генной репрессией генов-мишеней SMARCA2. Вместо этого мы наблюдали широко распространенное перераспределение SMARCA4, включая уменьшение связывания на сайтах, которые теряют доступность, и увеличение связывания на сайтах, которые становятся доступными. В сайтах, которые приобрели связывание SMARCA4 и доступность хроматина, наблюдалось одновременное усиление связывания как WT, так и мутантного SMARCA2, в значительной степени из-за активации SMARCA2, что позволяет предположить, что связывание мутантного SMARCA2 не влияет на ремоделирующую активность SMARCA4 / A2 на этих сайтах .Эти данные несовместимы с моделями, поддерживающими ингибирование активности дикого типа мутантными АТФазами посредством прямого вмешательства (Khavari et al., 1993; Richmond and Peterson, 1996) или секвестрации партнеров взаимодействия, как это предлагается для мутантного SMARCA4 (Hodges et al., 2018). Напротив, мы обнаружили, что связывание SMARCA4 и SMARCA2 является функционально активным при перепрограммировании ландшафта энхансеров, и что ключевой особенностью мутантных клеток SMARCA2 является аберрантное усиление активности комплекса SWI / SNF.

Наши исследования указывают на ранее недооцененную новаторскую активность AP-1 в перераспределении SMARCA4 и SMARCA2. Примечательно, что мы и другие показывают, что члены семейства AP-1 взаимодействуют с комплексами SWI / SNF (Vierbuchen et al., 2017). Кроме того, наша и другие работы показали, что доступность хроматина в клон-специфичных энхансерах, высокообогащенных AP-1 мотивами и связыванием AP-1, зависит от SWI / SNF и AP-1 (Alver et al., 2017; Kelso et al. al., 2017; Mathur et al., 2017; Vierbuchen et al., 2017). Здесь мы показываем, что факторов AP-1 достаточно, чтобы управлять перераспределением комплекса SWI / SNF и функциональным ремоделированием до de novo сайтов. Эти данные подтверждают, что AP-1 обладает пионерской активностью (Zaret and Carroll, 2011) или способностью связывать свой родственный сайт на нуклеосомах, независимо от сотрудничества с др. Факторами, определяющими клонирование. Пока не ясно, как AP-1 специфически обращается к этим сайтам, что может быть связано с расположением сайта связывания относительно фазирования нуклеосом, лежащей в основе последовательности ДНК или статуса метилирования ДНК.Наши результаты имеют значение для нашего понимания роли AP-1 в детерминации клонов и предполагают, что необходимы будущие исследования для пересмотра потенциального новаторского вклада AP-1 и комплексов SWI / SNF в действие факторов, определяющих клонирование, в определении клеток. типоспецифичные энхансерные ландшафты.

Как настроить кампанию ретаргетинга в Facebook

Если вы активно пользуетесь Facebook и недавно просматривали ленту новостей, вы определенно знакомы с ретаргетингом Facebook, но, возможно, даже не подозреваете об этом!

Маркетологи в настоящее время достигают пользователей стратегическим способом, используя Facebook для перенаправления посетителей, которые посетили их сайт.Результат — низкая стоимость приобретения и высокая рентабельность инвестиций для бизнеса. Давайте рассмотрим сценарий этой нативной формы рекламы, чтобы лучше понять, как она работает.

Введение в ретаргетинг на Facebook

Однажды вечером вы решаете посетить Nordstrom.com и ищете пару джинсов «7 для всего человечества», но решаете в данный момент не покупать в Интернете. По иронии судьбы, в течение следующих 14 дней, просматривая Facebook, вы обращаете внимание на рекламу в ленте новостей и в правом столбце с изображениями именно этих джинсов и специальным ценовым предложением.(Поднимите руку, если это случилось с вами.)

Нордстрому удалось разместить пиксель отслеживания на странице конкретного продукта для джинсов «7 для всего человечества». Пиксель, который их разработчик разместил на странице продукта, знает, что пользователь еще не совершил покупку. Затем они попросили своего графического дизайнера создать изображения, а их креативный отдел придумал рекламную копию, которая будет показана людям в Facebook, которые уходят с этой страницы. Наконец, у них установлена ​​аналитика и отслеживание конверсий, чтобы гарантировать, что когда кто-то совершает покупку, ее можно отнести к кампании ретаргетинга медийной рекламы.

Это может показаться сложным, но этот пост представляет собой руководство для новичков по настройке кампании ретаргетинга на Facebook, чтобы помочь любому научиться настраивать кампанию ретаргетинга в Facebook.

Независимо от того, ведете ли вы веб-сайт электронной коммерции или ведете бизнес B2B, ретаргетинг на Facebook поможет сохранить ваш бренд в центре внимания клиентов, проявивших интерес к вашей компании.

Мой фон

В дополнение к реализации этих типов кампаний для клиентов электронной коммерции мое агентство The Media Captain реализовало ретаргетинг на Facebook для различных сфер бизнеса, таких как стоматологическая практика, юридическая фирма и жилой комплекс в Шарлотте.В целом, мы увидели потрясающую цену за конверсию, которая помогла конвертировать как обычный, так и платный трафик! Даже если вы новичок, у вас нет причин не начать ретаргетинговую кампанию в Facebook, а окупаемость инвестиций, по нашему опыту, была огромной.

Как настроить кампанию ретаргетинга в Facebook:

Шаг 1. Откройте свой менеджер рекламы Facebook и щелкните аудитории в левой части экрана.

Убедитесь, что вы вошли в свою учетную запись Facebook и правильно настроили учетную запись рекламодателя.

Шаг 2. Нажмите «Создать аудиторию» в правом верхнем углу экрана.

Также будет вариант для «Lookalike Audience», но, поскольку мы сосредоточены на ретаргетинге, мы собираемся держаться от него подальше.

Шаг 3. Выберите индивидуальную аудиторию на своем веб-сайте.

На изображении ниже вы захотите нажать на последний вариант, хотя вы начнете видеть, что есть и другие удобные варианты, когда дело доходит до настраиваемых аудиторий!

Шаг 4. Скопируйте появившийся код и следуйте инструкциям на экране, чтобы вставить его в код своего веб-сайта.

Если у вас нет навыков разработки, вы можете просто скопировать и вставить этот код и отправить его своему разработчику. У вашего разработчика не должно уйти более 15-20 минут на внедрение на ваш сайт.

После того, как вы правильно разместите этот пиксель на страницах вашего сайта, на которые вы хотите произвести ремаркетинг, вам нужно будет выполнить следующие шаги, перечисленные ниже.

  1. Убедитесь, что изображения и сообщения рекламы, которую вы создаете для кампании ремаркетинга, побуждают людей повторно посетить ваш веб-сайт
  2. Правильно настроенное отслеживание конверсий в Google Analytics, чтобы вы могли отслеживать все конверсии, среднее время пребывания на сайте из этой кампании, показатель отказов и т. Д.
  3. Делайте ставки стратегически, чтобы эта форма рекламы приносила доход от инвестиций.

Вам нужно будет потратить больше времени, чтобы придумать креатив и копию для вашей новой кампании ретаргетинга, но приведенные выше шаги показывают, как настроить ретаргетинг на Facebook для вашего сайта. Как только код будет размещен, Facebook начнет создавать индивидуализированные аудитории из людей, которые посещали ваш сайт или посещали определенные страницы. Затем вы можете настроить рекламу, чтобы настроить таргетинг на каждую из этих пользовательских аудиторий с подходящей рекламой для каждой группы.

Как мы уже писали ранее, ретаргетинг на Facebook является обязательной стратегией на 2015 год. Он помогает вернуть на ваш сайт как обычных, так и платных посетителей после того, как они ушли, и в конечном итоге конвертирует больше вашего трафика. При правильной реализации ретаргетинг на Facebook приведет к низкой стоимости приобретения и поможет повысить узнаваемость бренда для вашего бизнеса. Я настоятельно рекомендую попробовать и посмотреть, как он может помочь вашему бизнесу расти в 2015 году.

Автор

Джейсон Паркс является владельцем The Media Captain, агентства цифрового маркетинга, базирующегося в Колумбусе, штат Огайо, которое предлагает онлайн-рекламу, поисковую оптимизацию, социальные сети, веб-разработку и услуги по производству видео.

5 шагов для настройки кампании ретаргетинга

В среду я провел тренинг, на котором я шаг за шагом показал участникам, как начать работу с ретаргетингом рекламы. В этой статье я кратко описываю 5 основных шагов по настройке кампании ретаргетинга.

Ретаргетинг 101

Но сначала, если вы не знакомы с ретаргетингом, вот краткий обзор.

Ретаргетинг — это тип интернет-рекламы, позволяющий показывать рекламные баннеры людям, которые уже посещали ваш сайт, но ушли, не купив ваши продукты и не предоставив свою контактную информацию.С помощью ретаргетинга вы можете показывать этим людям свои рекламные баннеры, когда они посещают другие веб-сайты в Интернете.

А вот 5 шагов для начала …

Шаг №1. Добавьте код ретаргетинга на свой сайт

Первый шаг — добавить код ретаргетинга на каждую страницу вашего сайта. Если у вас есть система CMS, такая как WordPress, Joomla или Drupal, это очень просто сделать. Вы просто копируете и вставляете код в один из файлов шаблона. Теперь, если вам это совершенно незнакомо и вы не знаете, как добавить код в файл шаблона, просто спросите своего веб-мастера.Любой веб-мастер сделает это за вас. Это буквально 5-10 минут работы.

Если у вас нет CMS, а есть только обычные файлы HTML, то, к сожалению, вам придется заходить в каждый файл и добавлять код. Это займет немного больше времени, но это все еще просто. Этот шаг буквально просто скопировать и вставить.

Шаг №2. Создать сегменты

Сегмент — это определенная часть трафика вашего веб-сайта, на которую вы хотите ориентироваться. В сфере услуг это могут быть люди, которые посещают ваш сайт и переходят на страницу ваших услуг, но не заполняют контактную форму.Это потенциальные клиенты, которые еще не вышли на связь, и это отличный сегмент. Если у вас есть веб-сайт электронной коммерции, другим сегментом будут посетители, которые добавляют товар в свою корзину, но не завершают покупку.

Способ их настройки будет немного отличаться в зависимости от того, какую сеть ретаргетинга вы используете. Но это очень просто и не слишком технически. Одна из платформ, которые мы используем и рекомендуем, — это AdRoll, и они позволяют очень легко создавать эти сегменты.Вам просто нужно знать URL-адрес веб-страницы, которую вы хотите сегментировать, и URL-адрес любой страницы, которую вы хотите исключить. Например, если вы хотите исключить всех, кто действительно совершил покупку на вашем веб-сайте, вы должны исключить страницу благодарности или страницу квитанции на своем сайте.

Шаг №3. Создайте свою рекламу

После того, как код размещен на вашем веб-сайте и сегменты настроены, вам необходимо разработать и создать реальную рекламу ретаргетинга. Что действительно нужно помнить, так это то, что это не холодный трафик.Вы будете ориентироваться на людей, которые уже посещали ваш сайт и что-то знают о вашем бизнесе. Имея это в виду, я настоятельно рекомендую включить ваш логотип и название вашей компании. Это должно вызвать у них воспоминания, повысив вероятность того, что они прочитают рекламу и нажмут на нее. URL вашего веб-сайта также важен по той же причине. Кроме того, я рекомендую указать номер телефона, потому что, опять же, эти люди уже были на вашем сайте. Они могут решить позвонить вам прямо из объявления, не возвращаясь на ваш сайт.

В каждой отличной рекламе есть обещание или предложение. Заметно разместите свое предложение в своем рекламном баннере вместе с сильным призывом к действию. Вы можете разместить кнопку прямо в объявлении с надписью «Нажмите здесь, чтобы начать бесплатную пробную версию» или «Нажмите здесь, чтобы назначить встречу сегодня». Этот призыв к действию может помочь мотивировать кого-то перейти по ссылке и заполнить контактную форму на вашем веб-сайте.

Подробнее о разработке кампании

Шаг №4. Настройка отслеживания конверсий

Есть две формы отслеживания конверсий, которые вы хотите настроить для кампании с ретаргетингом.Первый — это встроенное отслеживание конверсий, которое есть в каждой ретаргетинговой сети. Это фрагмент кода, который вы скопируете и вставите на страницу конверсии.

Что такое страница конверсии? Как я упоминал ранее, если у вас есть веб-сайт электронной коммерции, люди, совершающие покупку, обычно переходят на страницу благодарности или страницу квитанции. Если ваш бизнес не связан с электронной коммерцией (т.е. ваши транзакции происходят в автономном режиме), тогда у вас будет веб-форма. Таким образом, последняя страница, на которую клиент попадает после совершения покупки или связи с вами, является страницей конверсии.Поместите туда код конверсии, и он сообщит сети ретаргетинга, что человек совершил покупку или превратился в лида.

Я настоятельно рекомендую вам также настроить так называемое отслеживание телефонных звонков. Вы можете сделать это несколькими способами. Достаточно технический, но также очень точный способ отслеживания телефонных звонков — это динамическая вставка номера (DNI). С DNI вы можете динамически изменять номер телефона, отображаемый на вашем веб-сайте, в зависимости от источника трафика. В этом случае, если кто-то нажмет на рекламу с ретаргетингом, он увидит уникальный номер телефона.Это позволяет точно отслеживать, сколько звонков поступило от кампании ретаргетинга.

Когда вы создаете свое объявление (шаг 3), обязательно включите этот номер телефона для отслеживания в объявление. Таким образом, вы можете засчитать любые прямые телефонные звонки из объявления в общее количество потенциальных клиентов из вашей кампании ретаргетинга.

И теперь вы готовы включить свою кампанию…

Шаг №5. Измерьте результаты

Измерение рентабельности инвестиций в эту кампанию — действительно важный шаг.Однако просто предупреждение: как только вы включите эту рекламу, вы, как правило, не сразу увидите много трафика. Это потому, что для создания пула кандидатов с кодом ретаргетинга требуется время. В зависимости от количества посетителей, которых привлекает ваш веб-сайт, может пройти некоторое время, прежде чем у вас будет достаточно людей для фактического перенацеливания.

Сколько времени это займет, зависит от посещаемости вашего веб-сайта, но, как правило, я рекомендую позволить ретаргетинговой рекламе показываться в течение хорошего месяца. К тому времени у вас должно быть достаточно данных для просмотра.Вы сможете просмотреть общее количество показов, общее количество кликов по вашим объявлениям, общее количество конверсий и общее количество телефонных звонков.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.